染色質(zhì)免疫共沉淀

服務(wù)簡介：

染色質(zhì)免疫共沉淀技術(shù)主要應(yīng)用于驗(yàn)證及探尋體內(nèi)環(huán)境中，蛋白質(zhì)和DNA的直接相互作用，旨在探索特定蛋白質(zhì)在DNA上的特定結(jié)合序列，常在研究轉(zhuǎn)錄調(diào)控以及組蛋白修飾中被應(yīng)用到。

服務(wù)原理：

在活細(xì)胞狀態(tài)下固定蛋白質(zhì)－DNA復(fù)合物，并將其隨機(jī)切斷為一定長度范圍內(nèi)的染色質(zhì)小片段，然后通過免疫學(xué)方法沉淀此復(fù)合體，特異性地富集目的蛋白結(jié)合的 DNA 片段，通過對(duì)目的片斷的純化與檢測(cè)，從而獲得蛋白質(zhì)與 DNA 相互作用的信息。

服務(wù)優(yōu)勢(shì)：

完善的實(shí)驗(yàn)平臺(tái)：全進(jìn)口的儀器試劑，高標(biāo)準(zhǔn)甲醇交聯(lián)、Bioruptor超聲打斷；
2. 專業(yè)的實(shí)驗(yàn)流程：*的ChIP優(yōu)化流程，個(gè)性化實(shí)驗(yàn)方案，IP效率高，高成功率（高于95%）；
3. 豐富的實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)：專業(yè)的ChIP服務(wù)部門，實(shí)驗(yàn)人員從事ChIP實(shí)驗(yàn)長達(dá)5年以上，上千次成功ChIP實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)，針對(duì)不同動(dòng)植物組織有不同的前處理方式。
服務(wù)流程：
1、樣品準(zhǔn)備：培養(yǎng)細(xì)胞(若樣品為組織，可先培養(yǎng)原代細(xì)胞)；固定，或者直接活細(xì)胞送樣。
2、細(xì)胞固定：此步驟目的為將結(jié)合在DNA上的蛋白用共價(jià)形式交聯(lián)在所結(jié)合的位點(diǎn)上，避免在之后的操作步驟中脫離丟失。直接將甲醛加入細(xì)胞培養(yǎng)液，搖晃固定10分鐘后，迅速加入2.5M甘氨酸解交聯(lián)5分鐘，PBS洗滌，刮下細(xì)胞。
3、超聲打碎： 此步驟目的為將長鏈的DNA打碎成200-1000bp的DNA片段。使用設(shè)備是超聲水浴鍋，EP管在冰水混合物中超聲，超聲后細(xì)胞懸液變得澄清透明。離心取上清。
4、免疫沉淀：此步驟是加入特異性抗體和對(duì)照IgG，和結(jié)合抗體的磁珠（或protein A/G）。經(jīng)稀釋后，超聲產(chǎn)物分成兩份，分別加入特異性抗體和對(duì)照IgG，輪轉(zhuǎn)過夜，第二天加入磁珠輪轉(zhuǎn)4小時(shí)。
5、洗滌：此步驟是減少非特異性結(jié)合。分別用稀釋緩沖液、低鹽溶液、高鹽溶液、氯化鋰溶液以及TE緩沖液洗滌共7次。用洗脫緩沖液在65℃洗脫過夜。
6、DNA純化：將洗脫的產(chǎn)物用DNA純化試劑盒純化，得到50ul純化產(chǎn)物，用于檢測(cè)ChIP結(jié)果。

收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)/服務(wù)周期/提供結(jié)果：
詳談，我們會(huì)根據(jù)您的方案及需求制定詳細(xì)的服務(wù)協(xié)議。

【本公司合作項(xiàng)目】
慢病毒，腺病毒，RNAi類，分子生物實(shí)驗(yàn)，病理實(shí)驗(yàn)，免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)，細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，蛋白組學(xué)實(shí)驗(yàn)等，能夠進(jìn)行藥效學(xué)評(píng)價(jià)、毒理學(xué)評(píng)價(jià)、細(xì)胞藥篩、動(dòng)物建模、病理檢測(cè)、蛋白組學(xué)、代謝組學(xué)、高通量測(cè)序、ChIP、CO-IP、生物信息學(xué)分析服務(wù)！

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