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PI細(xì)胞周期可能有四種命運(yùn)

閱讀:1170        發(fā)布時(shí)間:2022-10-22
  PI細(xì)胞周期指細(xì)胞一個(gè)世代所經(jīng)歷的時(shí)間。從一次細(xì)胞分裂結(jié)束到下一次分裂結(jié)束為一個(gè)周期。細(xì)胞周期反應(yīng)了細(xì)胞增殖速度。細(xì)胞周期是一個(gè)重要的檢測參數(shù),研究細(xì)胞周期變化的影響對(duì)于腫瘤的發(fā)展及藥物研發(fā)有著重要的作用。例如,已知抑制有絲分裂的化合物大都用來減緩腫瘤細(xì)胞的生長。
 
  PI細(xì)胞周期檢測步驟:
 
  1.細(xì)胞樣品的準(zhǔn)備:
 
  收集細(xì)胞,用1ml預(yù)冷PBS洗1遍,輕輕彈擊離心管底以適當(dāng)分散細(xì)胞,避免細(xì)胞成團(tuán)。
 
  2.細(xì)胞固定:
 
  加入1ml預(yù)冷的70%乙醇中,輕輕吹打混勻,4度固定2小時(shí)或更長時(shí)間(固定12-24小時(shí)可能效果更佳)。1000g離心3-5分鐘,沉淀細(xì)胞(如果細(xì)胞沉淀不充分,可以適當(dāng)延長離心時(shí)間或加大離心力)。棄上清,用用1ml預(yù)冷PBS洗1遍。
 
  3.PI染色:
 
  每個(gè)樣品用0.5ml染色緩沖液(或PBS)重懸,加入25ulPI染色液(20×)、10ulRNaseA(50×)。37度避光溫浴30分鐘。
 
  4.流式檢測:
 
  用流式細(xì)胞儀在激發(fā)波長488nm波長處檢測紅色熒光,同時(shí)檢測光散射情況。采用分析軟件進(jìn)行細(xì)胞DNA含量分析和光散射分析。
 
  PI細(xì)胞周期可能有四種命運(yùn):
 
  ①細(xì)胞經(jīng)M期又開始第二次周期;
 
 ?、谕V褂贕2期,稱為G2期細(xì)胞(R2),它受某種刺激后可進(jìn)入周期;
 
  ③停止在G1期,稱為休止細(xì)胞或G0期細(xì)胞,這類細(xì)胞受某種刺激后仍能進(jìn)入周期,繼續(xù)進(jìn)行有絲分裂;
 
 ?、軉适谒劳龅募?xì)胞,稱為丟失細(xì)胞,或稱不再分裂的細(xì)胞。繼續(xù)分裂的細(xì)胞沿著細(xì)胞周期從一個(gè)有絲分裂期到下一個(gè)分裂期。不再分裂的細(xì)胞離開了細(xì)胞周期不再分裂,終死亡。

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