目錄:上海華雅思創(chuàng)生物科技有限公司>>細(xì)胞培養(yǎng)>>DC-CIK治療細(xì)胞治療>> Cygnus_F550 CHO HCP ELISA Kit CHO宿主細(xì)胞蛋白免疫檢測(cè)試劑盒
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更新時(shí)間:2021-11-23 10:52:49瀏覽次數(shù):1847評(píng)價(jià)
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產(chǎn)品英文名稱(chēng):CHO HCP ELISA kit, 3G
產(chǎn)品中文名稱(chēng):CHO HCP酶聯(lián)免疫分析試劑盒
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CHO HCP ELISA 試劑盒 產(chǎn)品介紹:
CHO HCP是第三代ELISA試劑盒,比之前試劑盒具有更廣泛HCP反應(yīng)性。新型試劑盒在檢測(cè)CHO HCPs 蛋白方面有很多改進(jìn)。新試劑盒具有更高的靈敏度,在抗體物和其它CHO表達(dá)蛋白中檢測(cè)HCP蛋白可以精確到到十億分之一百。第三代ELISA試劑盒經(jīng)過(guò)大 量藥物原料和中試樣品檢測(cè)評(píng)估,是工藝開(kāi)發(fā)和大量釋放試驗(yàn)檢測(cè)的通用方法??贵w反應(yīng)性使用傳統(tǒng)2D 蛋白雜交技術(shù)(2D HPLC-ELISA)鑒定。2D HPLC-ELISA方法顯示抗體對(duì)超過(guò)750種HCPs都具有反應(yīng)性。用蛋白檢測(cè)方法和ELISA正交試驗(yàn)表明這些多達(dá)750種的宿主細(xì)胞蛋白意味著高 于98%的蛋白種類(lèi)均可用ELISA方法檢測(cè)到。因此,這種抗體可以避免丟失任何重要的HCP蛋白。
產(chǎn)品使用時(shí)一定要做好保護(hù)措施:0.5M硫磺酸有強(qiáng)腐蝕性,要避免接觸眼睛、皮膚和衣物。檢測(cè)前所有試劑都要平衡到室溫。
§檢測(cè)原理:CHO檢測(cè) 是一個(gè)雙位點(diǎn)酶聯(lián)免疫檢測(cè)。樣本中包含的CHO HCPs蛋白與標(biāo)記有抗-CHO抗體的辣根過(guò)氧化物酶同時(shí)反應(yīng),反應(yīng)發(fā)生在之前涂有一層吸附性抗-CHO蛋白抗體的微量滴定板中進(jìn)行。免疫反應(yīng)構(gòu)成為夾層 式結(jié)構(gòu):固相抗休-HCP-酶標(biāo)記抗體。反應(yīng)結(jié)束后清洗微量滴定板去除未結(jié)合反應(yīng)物。添加TMB作用底物反應(yīng)。微量滴定板讀數(shù)器上測(cè)定水解物濃度,水解物 濃度與CHO HCPs蛋白濃度成比例。用提供的標(biāo)準(zhǔn)液繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)讀數(shù)可以計(jì)算出CHO HCPs蛋白含量。
§檢測(cè)過(guò)程:取出所有試 劑平衡到室溫→移取100µl anti-CHO:HRP(#F551)至每孔→分別移取50µl標(biāo)準(zhǔn)液,對(duì)照物和樣品至待測(cè)孔→密封滴定板,搖床室溫溫育2小時(shí),180rpm→清空小 孔,用紙吸干殘留液,350µl清洗緩沖液清洗4次→加100µl TMB 作用物(#F005)→室溫靜置30分鐘,不需搖床→加100µl反應(yīng)終止液(#F006)→分光光度計(jì)450/650nm讀數(shù)
§結(jié)果分析:標(biāo)準(zhǔn)液(0, 1, 3, 12, 40, 100ng/mL)可用于制作標(biāo)準(zhǔn)曲線,標(biāo)準(zhǔn)液濃度相當(dāng)于免疫反應(yīng)HCP總濃度。根據(jù)測(cè)定的小孔中標(biāo)準(zhǔn)液吸光值繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。數(shù)據(jù)分析可以使用計(jì)算機(jī)選配曲線,例如點(diǎn)到點(diǎn),三次樣本函數(shù),或四參數(shù)邏輯曲線。不要使用線性回歸分析修改樣品吸光值,這樣會(huì)出現(xiàn)顯著誤差。也可以手工繪圖,Y軸標(biāo)注吸光值,X軸標(biāo)注濃度。然后根據(jù)樣品吸光值計(jì)算出樣品中HCP濃度。(操作時(shí)每一濃度標(biāo)準(zhǔn)液都要重復(fù)滴定到兩個(gè)小孔中,以便計(jì)算平均分光光度值,樣品也需計(jì)算平均吸光值)。
CHO HCP ELISA組成成份:
● Anti-CHO:HRP(辣根過(guò)氧化物酶) 1x12mL F551(Product#)
● Anti-CHO微量滴定板 12x8孔 F552
● CHO HCP標(biāo)準(zhǔn)液(0, 1, 3, 12, 40, 100ng/mL) 1mL/瓶 F553
● Stop Solution終止液(0.5M硫磺酸) 1x12mL F006
● TMB (3,3’,5,5’-四甲基聯(lián)苯氨) 1x12mL F005
● Wash Concentrate清洗物(20倍濃縮) 1x50mL F004
需自備物:
? 微量板分光光度計(jì),雙波長(zhǎng)450 & 650nm
? 移液器-50L and 100L
? 可重復(fù)使用或多通道移液器-100L
? 微量板搖床(150 - 200 rpm)
? 樣品稀釋液(*使用Cat # I028)
? 1L清洗瓶
? 蒸餾水
2015年統(tǒng)統(tǒng)*,--一切活動(dòng)盡在上海華雅思創(chuàng)!
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