Roche 高效DNA地高辛標記和檢測試劑盒I

Roche 高效DNA地高辛標記和檢測試劑盒I 產(chǎn)品介紹：
高效地高辛（DIG）標記探針可應(yīng)用于RNA雜交，DNA雜交，點雜交分析等，同時也可用于克隆和噬菌斑雜交。試劑盒使用DIG-11-dUTP（堿不穩(wěn) 定性）隨機引物標記DNA模板并對DIG標記雜交物進行顯色檢測。試劑盒備有結(jié)合儲存液NBT/ BCIP，現(xiàn)有的封閉液和DIG易雜交顆粒。高效DIG混合物包含穩(wěn)定Klenow enzyme（克列諾酶），核苷酸，引物和反應(yīng)緩沖液。

Roche 高效DNA地高辛標記和檢測試劑盒I 檢測原理: 高效DNA地高辛標記檢測試劑盒I是用地高辛（Digoxigenin，簡稱DIG；又稱異羥基洋地黃毒甙元，是一種類固醇半抗原分子）標記的DNA探針，應(yīng)用于分子雜交和隨后的顯色反應(yīng)檢測。羅氏公司的該試劑盒檢測主要分三階段進行：1）DNA標記：根據(jù)隨機引物標記技術(shù)，生成DIG地高辛標記的DNA探針。2）雜交：按照標準雜交方法進行，將地高辛標記的DNA探針用于核酸點雜交，可選擇帶正電的尼龍膜或純硝酸纖維素膜作為雜交膜。 3）免疫學檢測：首先將標記有AP的地高辛抗體與雜交探針免疫結(jié)合；通過檢測堿性磷酸酶與NBT/BCIP底物進行顯色反應(yīng)的數(shù)值，從而達到免疫檢測的目的。

 靈敏度和特異性：標準檢測使用1µg線狀pBR328。通常需要0.8µg標記DNA（標記1小時后）和 2.3µg標記DNA（20小時反應(yīng)后）。在點雜交過程中，16小時顯色后（探針濃度20ng/ml）可以檢測到0.1pg同源DNA。DNA印跡中，加 載1µg消化胎盤DNA可檢測到單拷貝基因（tPA）。
 地高辛引物標記優(yōu)點：質(zhì)粒、柯斯質(zhì)粒和λ噬菌體DNA均可作為模板，模板DNA（線狀或超螺旋）標記10ng-3µg引物都具有同樣的標記效率。

 產(chǎn)品組成成份：
? DIG-High Prime, 5x conc., 50 µl
? DIG-labeled Control DNA, 20 µl, （5 µg/ml） pBR328 （linearized with Bam HI）
? DNA Dilution Buffer, 3 x 1 ml
? Anti-digoxigenin-AP Conjugate, 100 µl
? NBT/BCIP Stock Solution, conc., 6 x 1 ml
? Blocking Solution, 10x conc., 4 x 100 ml
? DIG Easy Hyb Granules, 4 x 100 ml

Roche作為zui大的生物技術(shù)公司，羅氏在抗腫瘤、抗病毒、炎癥、代謝和中樞神經(jīng)系統(tǒng)等領(lǐng)域擁有*的差異化藥物。羅氏在體外診斷和基于組 織的腫瘤診斷市場中享有，同時也是糖尿病管理領(lǐng)域的者。Roche公司生產(chǎn)的DIG標記DNA檢測試劑盒在DNA、RNA和核酸點雜交等實驗 應(yīng)用中有出色表現(xiàn)，特別是第二代試劑盒使用CSPD化學發(fā)光檢測具有更高的準確度和靈敏性。

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