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更新時(shí)間:2024-08-24 10:21:07瀏覽次數(shù):1317評(píng)價(jià)
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基因組提取試劑盒 DNA病毒基因組提取試劑盒
貨號(hào):D2400
規(guī)格:50T、100T
保存:室溫(15℃-25℃) 干燥保存,復(fù)檢期 12 個(gè)月,2℃-8℃保存時(shí)間更長(zhǎng) 。
產(chǎn)品說(shuō)明:
本試劑盒適合于從血清、細(xì)胞上清、淋巴液中提取 DNA 病毒基因組,不適合于 RNA 病毒基因組的提取。使用本試劑盒提取的基因組 DNA 可用于各種常規(guī)操作,包括酶切、PCR、文庫(kù)構(gòu)建、Southern 雜交等實(shí)驗(yàn)。
產(chǎn)品包裝:
操作步驟:
使用前請(qǐng)先在漂洗液中加入無(wú)水乙醇,加入體積請(qǐng)參照瓶上的標(biāo)簽。所有離心步驟均為使用臺(tái)式離心機(jī)在室溫下離心。
1、 取病毒上清液 0.5ml,12000rpm 離心 5min,盡量吸盡上清使用,棄去沉淀。
2、 向病毒上清中加入 20ul 10mg/ml 的蛋白酶 K, 充分混勻, 65℃消化 10-20min, 期間可顛倒離心管混勻數(shù)次。
3、 向管中加入 500ul 結(jié)合液,充分混勻。再向管中加入 400ul 無(wú)水乙醇,充分混勻,此時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀沉淀,不影響DNA 的提取,可將溶液和絮狀沉淀都加入吸附柱中,靜置 2min。 (吸附柱的大容積為 750ul,可分兩次加入。一次吸附完離心后再將余下的混合液體加入柱中靜置離心。 )
4、 12000rpm 離心 2min,棄廢液,將吸附柱放入收集管中。
5、 向吸附柱中加入 700ul 漂洗液(使用前請(qǐng)先檢查是否已加入無(wú)水乙醇),12000rpm 離心 1min,棄廢液,將吸附柱放入收集管中。
6、 向吸附柱中加入 500ul 漂洗液,12000rpm 離心 1min,棄廢液,將吸附柱放入收集管中。
7、 12000rpm 離心 2min,將吸附柱置于室溫或 50℃溫箱放置數(shù)分鐘,目的是將吸附柱中殘余的漂洗液去除,否則漂洗液中的乙醇會(huì)影響后續(xù)的實(shí)驗(yàn)如酶切、PCR 等。
8、將吸附柱放入一個(gè)干凈的離心管中,向吸附膜中央懸空滴加 50ul-100ul 經(jīng) 65℃水浴預(yù)熱的洗脫液,室溫放置 5min,12000rpm 離心 1min。
9、 離心所得洗脫液再加入吸附柱中, 室溫放置 2min, 12000rpm 離心 2min, 即可得到高質(zhì)量的病毒基因組 DNA。
注意事項(xiàng):
1、試劑盒拆封后,蛋白酶K需放置-20℃保存。
2、樣品應(yīng)避免反復(fù)凍融,否則會(huì)導(dǎo)致提取的DNA片段較小且提取量也下降。
3、若結(jié)合液中有沉淀,可在37℃水浴中重新溶解再使用,不影響效果。
4、洗脫緩沖液的體積好不少于50ul,體積過(guò)小會(huì)影響回收效率。洗脫液的pH值對(duì)洗脫效率也有影響,若需要用水做洗脫液應(yīng)保證其pH值在8.0左右(可用NaOH將水的pH值調(diào)此范圍),pH 值低于7.0會(huì)降低洗脫效率。DNA產(chǎn)物應(yīng)保存在-20℃,以防DNA降解。
5、DNA濃度及純度檢測(cè):得到的基因組DNA片段的大小與病毒的保存條件和種類(lèi)等因素有關(guān)。D 260 值為 1.0 相當(dāng)于大約 50 ug/ml雙鏈DNA、40 ug/ml單鏈DNA。OD 260 /OD 280 比值應(yīng)為 1.7-1.9,如果洗脫時(shí)不使用洗脫緩沖液,而使用去離子水,比值會(huì)偏低,因?yàn)閜H值和離子存在會(huì)影響光吸收值,但并不表示純度低。
6、如果病毒含量過(guò)低,后提取的基因組DAN電泳可能無(wú)法檢測(cè)到,但PCR等其他實(shí)驗(yàn)還會(huì)有結(jié)果。
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基因組提取試劑盒 DNA病毒基因組提取試劑盒訂購(gòu)說(shuō)明:
1、絕大部分產(chǎn)品備有現(xiàn)貨,一般情況下都能訂貨當(dāng)日發(fā)貨。
2、部分非常用產(chǎn)品,需提前1-2日預(yù)訂,海外期貨則需要提前3-6周預(yù)訂。
3、部分產(chǎn)品價(jià)格會(huì)因貨期、批次等因素發(fā)生變化,若有變動(dòng)以訂貨當(dāng)日新價(jià)格為準(zhǔn)。
4、每日訂單截止時(shí)間為16點(diǎn)整,部分城市可到17點(diǎn)整,因超過(guò)截止時(shí)間造成當(dāng)日不能發(fā)貨的將于次日安排發(fā)貨。
5、請(qǐng)辦理完貨款后,將收據(jù)、底單等連同收貨人的地址、姓名、等以傳真、、短信、等形式通知我們。
運(yùn)輸說(shuō)明:
1、極低溫產(chǎn)品:極低溫產(chǎn)品運(yùn)輸過(guò)程中加裝干冰運(yùn)輸。用干冰把產(chǎn)品包裹起來(lái),再用泡沫盒密封,膠帶層層粘住泡沫盒,放入索萊寶的箱子,然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送客戶的手中,保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一,為您的實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航。
2、低溫產(chǎn)品:低溫產(chǎn)品運(yùn)輸過(guò)程中加裝索萊寶冰袋運(yùn)輸。事先用冰袋把產(chǎn)品包裹起來(lái),再使用泡沫盒密封,用膠帶嚴(yán)實(shí)密封泡沫盒,再放入索萊寶的箱子(保溫效果少可以持續(xù)一周),然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送客戶的手中,保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一,為您的實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航。
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