原卟啉（FEP）檢測(cè)試劑盒（熒光比色法）

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

原卟啉(Protoporphyrin IX)分子量為 562.66，CAS 號(hào)為 553-12-8，在生物體內(nèi)原卟啉的含量可間接反應(yīng)鐵的缺乏與否。原卟啉(FEP)檢測(cè)試劑盒(熒光比色法)是利用酸化液破壞紅細(xì)胞并提取原卟啉(FEP)，后者在紫外線照射下會(huì)發(fā)出熒光，可通過熒光分光光度計(jì)等測(cè)定 FEP 含量，該試劑盒主要用于檢測(cè)人、動(dòng)物血液的紅細(xì)胞內(nèi)游離原卟啉(FEP)的測(cè)定，反映缺鐵性貧血的程度，但應(yīng)事先或者事后檢測(cè)相應(yīng)的紅細(xì)胞比容。該試劑盒僅用于科研領(lǐng)域，不宜用于臨床診斷或其他用途。

產(chǎn)品組成：

試劑(A): 肝素鈉溶液(125U/ml) 0.5ml -20℃

試劑(B): 原卟啉Ⅸ標(biāo)準(zhǔn)(5mg/L) 1ml  -20℃ 避光

試劑(C): FEP 酸化液               2×100ml  RT

使用說(shuō)明書                       1 份

自備材料：

1、 生理鹽水

2、漩渦振蕩器、離心機(jī)

3、熒光分光光度計(jì)

操作步驟(僅供參考)：

1、配制肝素抗凝全血：按新鮮全血：肝素鈉溶液(125U/ml)=9：1 配制。

2、配制原卟啉Ⅸ標(biāo)準(zhǔn)工作液(50μg/L)： 室溫溶解原卟啉Ⅸ標(biāo)準(zhǔn)(5mg/L)，取 10μl 加至990μl 的 FEP 酸化液，混勻，即為原卟啉Ⅸ標(biāo)準(zhǔn)工作液(50μg/L)，4℃可保存 1 周。

3、按下表進(jìn)行操作，并以生理鹽水作為空白對(duì)照

                           空白管     標(biāo)準(zhǔn)管   待測(cè)管

肝素抗凝全血                                      —            —          0.05

原卟啉Ⅸ標(biāo)準(zhǔn)工作液(50μg/L)        —           0.05       —

生理鹽水                                                 0.05           —      —

FEP 酸化液(ml)                                 3.5          3.5     3.5

4、置于漩渦振蕩器上振蕩 2～3min，3000 r/min 離心 6min，取上清。

5、熒光分光度計(jì)進(jìn)行熒光度測(cè)定(激發(fā)濾片 400nm，發(fā)射濾片 600nm)，以空白管作為調(diào)零點(diǎn)，標(biāo)準(zhǔn)管校熒光強(qiáng)度并調(diào)至 100，讀取待測(cè)管的熒光強(qiáng)度讀數(shù)(Fu )。

6、另用該肝素抗凝全血測(cè)紅細(xì)胞比容(PCV )，紅細(xì)胞比容常采用臨床檢驗(yàn)科的血細(xì)胞自動(dòng)分析儀進(jìn)行測(cè)定。

結(jié)果計(jì)算：FEP(μg/L,RBC)=35×(Fu/PCV )

參考區(qū)間： 正常人: (398.4±131.7)ug/L RBC

注意事項(xiàng)：

1、 整個(gè)操作均應(yīng)在避光條件下進(jìn)行，并盡快完成。

2、 原卟啉在強(qiáng)光下易分解，收集好的血液樣本應(yīng)立即 4℃避光保存，24h 以內(nèi)用完。

3、 熒光強(qiáng)度會(huì)隨著時(shí)間的延長(zhǎng)而逐漸衰退，但 2h 以內(nèi)基本穩(wěn)定。

4、 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

有效期：6 個(gè)月有效。