改良番紅0-固綠軟骨染色液說明書

基本信息

 產(chǎn)品簡介：

      軟骨組織由軟骨細胞、軟骨基質(zhì)和纖維組成，軟骨組織及其周圍的軟骨膜構(gòu)成軟骨。軟骨根據(jù)基質(zhì)內(nèi)所含纖維素成分不同分為透明軟骨、彈性軟骨、纖維軟骨。軟骨染色方法有很多種，例如甲苯胺藍法、阿利新藍法、番紅O 法等。
       改良番紅 0-固綠軟骨染色法的染色原理在于嗜堿性的軟骨與堿性染料番紅O 結(jié)合呈現(xiàn)紅色，嗜酸性的骨和酸性染料固綠結(jié)合而成綠色或藍色，與呈現(xiàn)紅色的軟骨對比鮮明，從而將軟骨組織和骨組織區(qū)分開。番紅O 是一種結(jié)合多陰離子的陽離子染料，其顯示軟骨組織是基于陽離子染料與多糖中陰離子基團（硫酸軟骨素或硫酸角質(zhì)素） 結(jié)合。番紅O 著色與陰離子的濃度近似成正比關(guān)系，間接反映了基質(zhì)中蛋白多糖的含量和分布。當軟骨受到損傷時，軟骨中的糖蛋白會釋放出來，使基質(zhì)成分分布不均勻，從而導(dǎo)致番紅O 淡染或不著色。通過圖像分析軟件可對番紅O 染色的軟骨基質(zhì)進行定量分析。固綠與膠原纖維結(jié)合，不宜褪色。番紅 O-固綠染色的分化很關(guān)鍵，分化過度易導(dǎo)致切片不著色，分化不足易導(dǎo)致切片著色過深。

 產(chǎn)品組成：

規(guī)格：5*50ml

有效期：6個月有效

 自備材料：

10%福爾馬林固定液，脫鈣液，蒸餾水，系列乙醇。

 操作步驟（僅供參考）：

 1、 標本的處理：10%福爾馬林固定、脫鈣、石蠟切片。
2、 常規(guī)脫蠟至水。
3、 入新鮮配制的Weigert 染液染色 3-5min，水洗。

4、 酸性分化液分化 15s。

 5、 蒸餾水洗 10min。
6、 在固綠染色液內(nèi)浸染 5min。
7、 快速用弱酸溶液洗滌切片 10-15s，以便去除殘留的固綠。8、 入Safranin O stain 內(nèi)浸染 5min。
9、 分別用 95%乙醇、無水乙醇脫水。
10、二甲苯透明，光學(xué)樹脂封固。

 染色結(jié)果：

 軟骨基質(zhì)                                                 深紅色 
軟骨細胞核                                             藍色 
細胞漿、肌肉、膠原纖維及骨組織           灰綠色 
軟骨細胞漿                                              紅色 
細胞核                                                     灰黑色 

 改良番紅0-固綠軟骨染色液注意事項：

 1、 需要顯示細胞核時，盡量采用鐵蘇木素染色，其著色力強色調(diào)濃，一般的蘇木素著色力不強。
2、 Weigert 蘇木素染液不可預(yù)先配制后放置，配制好后一般 24h 失去染色能力。
3、 切片在 Safranin O stain 中染色不宜過長，否則易導(dǎo)致背景的深紅色不易分化掉。
4、 切片分化時間應(yīng)恰當，以背景呈綠色為宜。
5、 Safranin O stain 染色后，不宜在低濃度乙醇脫水，否則易褪色。
6、 95%乙醇脫水時間不宜過長。
7、 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。