DNA重組技術(shù)的基本過程

蛋白質(zhì)工程介紹：

    1982年，Palmiter等人將大白鼠的 生長激素基因放在小白鼠金屬疏基蛋白啟動子之后的質(zhì)粒中。

    這個啟動子通常在染色體上，并控制金屬疏基蛋白的轉(zhuǎn)錄。金屬疏基蛋白富含半肽氨酸，對重金屬有很高的親和力。肝臟在合成這種保護性蛋白時要依靠重金屬，如鎘的誘導(dǎo)。

   將重組好的這種質(zhì)粒（幾百個拷貝）用特制的微量注射器注入小白鼠受精卵植入小白鼠子宮。結(jié)果發(fā)育生成的小鼠經(jīng)DNA印跡法證明，許多小鼠中都含有大白鼠的生長激素基因，而且成熟的小鼠體重比對照大兩倍，成為“碩鼠”或“超級鼠”。這些小鼠中的生長激素水平相當于對照的500倍。試驗證明，外源基因在新的啟動子控制下，可以整合到哺乳類細胞核內(nèi)，并在其中實現(xiàn)有效表達。這是一項重大的突破。

    隨后轉(zhuǎn)基因動物在各國興起。北京農(nóng)業(yè)大學也制備出轉(zhuǎn)基因豬和羊。然而轉(zhuǎn)生長激素基因的豬的繁殖能力明顯下降，不能繁殖擴群。國內(nèi)轉(zhuǎn)基因動物也出現(xiàn)了畸形等。這些問題的出現(xiàn)表明轉(zhuǎn)基因技術(shù)中有關(guān)外源基因與染色體的定位重組、表達調(diào)控等，還有待深入研究。

    但轉(zhuǎn)基因技術(shù)仍然是有用的。1991年，蘇格蘭人首先將a1-抗胰蛋白酶基因置于綿羊的乳球蛋白基因的調(diào)控成分之下，制成轉(zhuǎn)基因綿羊。當這種綿羊長大繁殖，乳腺內(nèi)基因開發(fā)表達奶中各種蛋白時，a1-抗胰蛋白酶基因在球蛋白調(diào)控成分調(diào)控下也開發(fā)，結(jié)果表達出a1-抗胰蛋白酶（一種藥物），奶中含量高達35g/L，產(chǎn)量十分可觀。這種轉(zhuǎn)基因的動物稱為“生物反應(yīng)器”，它潛在的經(jīng)濟效應(yīng)將促進這項技術(shù)的發(fā)展。