為你解說(shuō)ELISA試劑盒在實(shí)驗(yàn)中的常見問題

為你解說(shuō)ELISA試劑盒在實(shí)驗(yàn)中的常見問題

1 質(zhì)控血清的運(yùn)用
衛(wèi)生部臨床查驗(yàn)基地制備的乙肝標(biāo)志物質(zhì)控血清，能夠在-20℃保持半年定值不變。冰凍狀態(tài)融化運(yùn)用時(shí)，應(yīng)先混勻，未用完有些可在4℃保留5天。不宜重復(fù)冰融或自行分裝。展開某項(xiàng)查驗(yàn)的室內(nèi)質(zhì)控工作需要的質(zhì)控血清，通常按3-6個(gè)月用量預(yù)備。自制的不定值質(zhì)控血清，在一批質(zhì)控血清將用完之前，需預(yù)備下一批質(zhì)控血清。質(zhì)控血清請(qǐng)求功能安穩(wěn)，較長(zhǎng)期內(nèi)效價(jià)不變，其理化性質(zhì)應(yīng)與患者樣本附近，這么才干有效地起到監(jiān)測(cè)效果。
2 臨界值質(zhì)控血清
質(zhì)操控血清分定值和不決值兩種。如只用一份質(zhì)控血清定值，通常定在正常值與異常值交界點(diǎn)上，定性測(cè)守時(shí)處于弱陽(yáng)性水平，稱為臨界值。乙肝標(biāo)志物臨界值的擬定，應(yīng)按臨床請(qǐng)求，為臨床供給一致的判別弱陽(yáng)性的規(guī)范。
臨界值質(zhì)控血清能夠作為試劑盒中的陽(yáng)性對(duì)照品和陰性對(duì)照品以外的第三個(gè)對(duì)照品，它能夠活絡(luò)地反映出試劑盒的檢出水平，確保弱陽(yáng)性反響的標(biāo)本不漏檢。
3 質(zhì)控血清的制備
每個(gè)實(shí)驗(yàn)室能夠根據(jù)自己的條件，選用臨床基地供給的質(zhì)控血清，或按以下辦法自己制備本室運(yùn)用的質(zhì)控血清（以乙肝質(zhì)控血清為例）。
1） 搜集新鮮的無(wú)溶血、無(wú)黃疸、無(wú)細(xì)菌污染的陽(yáng)性血清。
2） 56℃加熱10小時(shí)來(lái)活。
3） 離心或過(guò)濾除掉沉淀。
4） 用10%的小牛血清或正常人血清（PBS緩沖液）將搜集的血清稀釋至所需的濃度。如能用正常的人血清稀釋更好，因其成份更接近于檢測(cè)標(biāo)本。
5） 抽濾除菌。按一次運(yùn)用的量分裝小安瓿，封口，20℃保留備用。不行重復(fù)凍融。
被檢物請(qǐng)求檢出的水平常被認(rèn)為是質(zhì)控血清應(yīng)挑選的水平。如果該實(shí)驗(yàn)還有其它請(qǐng)求，則應(yīng)加所請(qǐng)求濃度的質(zhì)控物。
6） 標(biāo)定含量。20-30次測(cè)定成果刪去>±2SD數(shù)據(jù)的均值作為靶值，并與已知定值血清對(duì)比測(cè)定。