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人前列腺素D合成酶(PGDS)ELISA試劑盒實(shí)際應(yīng)用中，通過不同的設(shè)計(jì)，具體的方法步驟可有多種。即：用于檢測(cè)抗體的間接法、用于檢測(cè)抗原的雙抗體夾心法以及用于檢測(cè)小分子抗原或半抗原的抗原競(jìng)爭(zhēng)法等等。目前我們對(duì)客戶提供比較常用的ELISA雙抗體夾心法及ELISA間接法服務(wù)。

雙抗體夾心法(檢測(cè)未知抗原)

間接法(檢測(cè)未知抗體)

1、用緩沖液將抗體稀釋至1-10ug/ml。在反應(yīng)孔中加0.1ml，4℃ 一晚。次日，棄去孔內(nèi)溶液，用洗滌緩沖液洗3次。
2、加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中，置37℃ 孵育1小時(shí)。然后洗滌(同時(shí)做空白孔，陰性對(duì)照孔及陽性對(duì)照孔)。
3、加酶標(biāo)抗體：于各反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5～1小時(shí)，洗滌。
4、加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鐘。
5、終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽性程度越強(qiáng)，陰性反應(yīng)為無色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+"、“-"號(hào)表示。也可測(cè)OD值：在ELISA檢測(cè)儀上，于450nm(若以ABTS顯色，則410nm)處，以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值，若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍，即為陽性。

1、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1-10ug/ml，每孔加0.1ml，4℃一晚。次日洗滌3次。
2、加樣：加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí),洗滌。(同時(shí)做空白、陰性及陽性孔對(duì)照)
3、加酶標(biāo)抗體：于反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.05ml，37℃孵育30-60分鐘，洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。
4、加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鐘。
5、終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽性程度越強(qiáng)，陰性反應(yīng)為無色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+"、“-"號(hào)表示。也可測(cè)OD值：在ELISA檢測(cè)儀上，于450nm(若以ABTS顯色，則410nm)處，以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值，若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍，即為陽性。

1。人前列腺素D合成酶(PGDS)ELISA試劑盒的測(cè)定應(yīng)進(jìn)行對(duì)EDTA血漿。

2。對(duì)樣品進(jìn)行檢測(cè)，重復(fù)400毫升EDTA血漿是必需的。

3。在一個(gè)薰衣草[ EDTA管收集全血]。

4。應(yīng)及時(shí)將血漿分離，優(yōu)選地在冷藏的離心機(jī)，并儲(chǔ)存在20°C或更低。

5。EDTA血漿樣品可以存儲(chǔ)長(zhǎng)達(dá)8小時(shí)在2，8°

6。EDTA血漿樣品冷凍在–20°C穩(wěn)定長(zhǎng)達(dá)4個(gè)月。

人前列腺素D合成酶(PGDS)ELISA試劑盒除了非零校準(zhǔn)所有的試劑，試劑盒控制，洗精準(zhǔn)備使用。非標(biāo)準(zhǔn)/校準(zhǔn)器的制備對(duì)于每個(gè)非零校準(zhǔn)（校準(zhǔn)B通過F）和試劑盒對(duì)照1和2，使每個(gè)用蒸餾水或去離子水混合2毫升小瓶。

讓瓶子站立10分鐘，然后混合*的溫柔的反演，以確保完成重組。使用校準(zhǔn)和控制等盡可能重建。凍結(jié)（20攝氏度）剩余的校準(zhǔn)和控制盡快使用后。校準(zhǔn)和控制在–20°C穩(wěn)定6周后重建與3次凍融建議在程序中處理時(shí)的周期。洗滌濃縮液混洗濃縮物。如果沉淀是由于在洗滌濃縮物低溫貯藏，如4°C，溶解放置在一個(gè)37°C水浴或烤箱的小瓶旋轉(zhuǎn)或攪拌。增加洗滌濃縮液（30毫升）570毫升蒸餾水或去離子水混合。人前列腺素D合成酶(PGDS)ELISA試劑盒的稀釋液穩(wěn)定90天在室溫下儲(chǔ)存（18－26攝氏度）。儲(chǔ)存/穩(wěn)定性儲(chǔ)存所有的試劑在2，8°C，除了洗滌集中，應(yīng)保持在室溫下直到稀釋，以避免沉淀。

E118Mu   小鼠肝配蛋白B受體3(EPHB3)ELISA試劑盒*   ELISA Kit for Ephrin Type B Receptor 3 (EPHB3)
klF834Mu   小鼠轉(zhuǎn)化受體電位陽離子通道亞家族M成員4(TRPM4)ELISA試劑盒*   ELISA Kit for Transient Receptor Potential Cation Channel Subfamily M, Member 4 (TRPM4)
klH756Mu   小鼠Klothoβ蛋白(KLβ)ELISA試劑盒*   ELISA Kit for Klotho Beta (KLb)
klF609Mu   小鼠肌微管素相關(guān)蛋白9(MTMR9)ELISA試劑盒*   ELISA Kit for Myotubularin Related Protein 9 (MTMR9)
klC432Mu   小鼠皮膚橋蛋白(DPT)ELISA試劑盒*   ELISA Kit for Dermatopontin (DPT)
klC442Mu   小鼠雙腎上腺皮質(zhì)激素(DCX)ELISA試劑盒*   ELISA Kit for Doublecortin (DCX)
klR758Mu   小鼠序列相似家族135成員B(FAM135B)ELISA試劑盒*   ELISA Kit for Family With Sequence Similarity 135, Member B (FAM135B)
klB932Mu   小鼠甘油醛-3-磷酸脫氫酶(GAPDH)ELISA試劑盒*   ELISA Kit for Glyceraldehyde-3-Phosphate Dehydrogenase (GAPDH)
klB728Mu   小鼠生長(zhǎng)分化因子2(GDF2)ELISA試劑盒*   ELISA Kit for Growth Differentiation Factor 2 (GDF2)
klL231Mu   小鼠鋅結(jié)合α2-糖蛋白1(αZGP1)ELISA試劑盒*   ELISA Kit for Alpha-2-Glycoprotein 1, Zinc Binding (aZGP1)
klE149Mu   小鼠母系蛋白2(MATN2)ELISA試劑盒*   ELISA Kit for Matrilin 2 (MATN2)
klB139Mu   小鼠抗利尿激素(ADH)ELISA試劑盒*   ELISA Kit for Antidiuretic Hormone (ADH)
klD766Mu   小鼠精氨酸加壓素原(VP)ELISA試劑盒*   ELISA Kit for Preprovasopressin (VP)
klB510Mu   小鼠白介素5受體α(IL5Rα)ELISA試劑盒*   ELISA Kit for Interleukin 5 Receptor Alpha (IL5Ra)
klK310Mu   小鼠Nodal同源物(NODAL)ELISA試劑盒*   ELISA Kit for Nodal Homolog (NODAL)
klB670Mu   小鼠黑素瘤細(xì)胞黏附分子(MCAM)ELISA試劑盒*   ELISA Kit for Melanoma Cell Adhesion Molecule (MCAM)
klB886Mu   小鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶2(ACE2)ELISA試劑盒*   ELISA Kit for Angiotensin I Converting Enzyme 2 (ACE2)
klR142Mu   小鼠環(huán)氧化合物水解酶4(EPHX4)ELISA試劑盒*   ELISA Kit for Epoxide Hydrolase 4 (EPHX4)
klF390Mu   小鼠雙腎上腺皮質(zhì)激素樣激酶1(DCLK1)ELISA試劑盒*   ELISA Kit for Doublecortin Like Kinase 1 (DCLK1)
klB040Mu   小鼠波形蛋白(VIM)ELISA試劑盒*   ELISA Kit for Vimentin (VIM)
klC605Mu   小鼠X-框結(jié)合蛋白1(XBP1)ELISA試劑盒*   ELISA Kit for X-Box Binding Protein 1 (XBP1)
klE824Mu   小鼠醛脫氫酶1家族成員A1(ALDH1A1)ELISA試劑盒*   ELISA Kit for Aldehyde Dehydrogenase 1 Family, Member A1 (ALDH1A1)