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人尿蛋白(UP)ELISA試劑盒實(shí)際應(yīng)用中，通過(guò)不同的設(shè)計(jì)，具體的方法步驟可有多種。即：用于檢測(cè)抗體的間接法、用于檢測(cè)抗原的雙抗體夾心法以及用于檢測(cè)小分子抗原或半抗原的抗原競(jìng)爭(zhēng)法等等。目前我們對(duì)客戶提供比較常用的ELISA雙抗體夾心法及ELISA間接法服務(wù)。

雙抗體夾心法(檢測(cè)未知抗原)

間接法(檢測(cè)未知抗體)

1、用緩沖液將抗體稀釋至1-10ug/ml。在反應(yīng)孔中加0.1ml，4℃ 一晚。次日，棄去孔內(nèi)溶液，用洗滌緩沖液洗3次。
2、加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中，置37℃ 孵育1小時(shí)。然后洗滌(同時(shí)做空白孔，陰性對(duì)照孔及陽(yáng)性對(duì)照孔)。
3、加酶標(biāo)抗體：于各反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5～1小時(shí)，洗滌。
4、加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鐘。
5、終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽(yáng)性程度越強(qiáng)，陰性反應(yīng)為無(wú)色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+"、“-"號(hào)表示。也可測(cè)OD值：在ELISA檢測(cè)儀上，于450nm(若以ABTS顯色，則410nm)處，以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值，若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍，即為陽(yáng)性。

1、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1-10ug/ml，每孔加0.1ml，4℃一晚。次日洗滌3次。
2、加樣：加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí),洗滌。(同時(shí)做空白、陰性及陽(yáng)性孔對(duì)照)
3、加酶標(biāo)抗體：于反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.05ml，37℃孵育30-60分鐘，洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。
4、加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鐘。
5、終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽(yáng)性程度越強(qiáng)，陰性反應(yīng)為無(wú)色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+"、“-"號(hào)表示。也可測(cè)OD值：在ELISA檢測(cè)儀上，于450nm(若以ABTS顯色，則410nm)處，以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值，若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍，即為陽(yáng)性。

1。人尿蛋白(UP)ELISA試劑盒的測(cè)定應(yīng)進(jìn)行對(duì)EDTA血漿。

2。對(duì)樣品進(jìn)行檢測(cè)，重復(fù)400毫升EDTA血漿是必需的。

3。在一個(gè)薰衣草[ EDTA管收集全血]。

4。應(yīng)及時(shí)將血漿分離，優(yōu)選地在冷藏的離心機(jī)，并儲(chǔ)存在20°C或更低。

5。EDTA血漿樣品可以存儲(chǔ)長(zhǎng)達(dá)8小時(shí)在2，8°

6。EDTA血漿樣品冷凍在–20°C穩(wěn)定長(zhǎng)達(dá)4個(gè)月。

人尿蛋白(UP)ELISA試劑盒除了非零校準(zhǔn)所有的試劑，試劑盒控制，洗精準(zhǔn)備使用。非標(biāo)準(zhǔn)/校準(zhǔn)器的制備對(duì)于每個(gè)非零校準(zhǔn)（校準(zhǔn)B通過(guò)F）和試劑盒對(duì)照1和2，使每個(gè)用蒸餾水或去離子水混合2毫升小瓶。

讓瓶子站立10分鐘，然后混合*的溫柔的反演，以確保完成重組。使用校準(zhǔn)和控制等盡可能重建。凍結(jié)（20攝氏度）剩余的校準(zhǔn)和控制盡快使用后。校準(zhǔn)和控制在–20°C穩(wěn)定6周后重建與3次凍融建議在程序中處理時(shí)的周期。洗滌濃縮液混洗濃縮物。如果沉淀是由于在洗滌濃縮物低溫貯藏，如4°C，溶解放置在一個(gè)37°C水浴或烤箱的小瓶旋轉(zhuǎn)或攪拌。增加洗滌濃縮液（30毫升）570毫升蒸餾水或去離子水混合。人尿蛋白(UP)ELISA試劑盒的稀釋液穩(wěn)定90天在室溫下儲(chǔ)存（18－26攝氏度）。儲(chǔ)存/穩(wěn)定性儲(chǔ)存所有的試劑在2，8°C，除了洗滌集中，應(yīng)保持在室溫下直到稀釋，以避免沉淀。

E1L)
klB028Hu   人白蛋白(ALB)ELISA試劑盒*   ELISA Kit for Albumin (ALB)
klB031Hu   人粘蛋白3(MUC3)ELISA試劑盒*   ELISA Kit for Mucin 3 (MUC3)
klB032Hu   人磷脂酰肌醇蛋白聚糖1(GPC1)ELISA試劑盒*   ELISA Kit for Glypican 1 (GPC1)
klB033Hu   人Dickkopf相關(guān)蛋白2(DKK2)ELISA試劑盒*   ELISA Kit for Dickkopf Related Protein 2 (DKK2)
klB034Hu   人粘蛋白4(MUC4)ELISA試劑盒*   ELISA Kit for Mucin 4 (MUC4)
klB036Hu   人生長(zhǎng)激素受體(GHR)ELISA試劑盒*   ELISA Kit for Growth Hormone ReHZptor (GHR)
klB037Ge   人吡啶酚(PYD)ELISA試劑盒*   ELISA Kit for Pyridinoline (PYD)
klB038Hu   人谷氨酸半胱氨酸連接酶(GCLM)ELISA試劑盒*   ELISA Kit for Glutamate Cysteine Ligase, Modifier Subunit (GCLM)
klB039Hu   人表面活性物質(zhì)關(guān)聯(lián)蛋白D(SPD)ELISA試劑盒*   ELISA Kit for Surfactant Associated Protein D (SPD)
klB040Hu   人波形蛋白(VIM)ELISA試劑盒*   ELISA Kit for Vimentin (VIM)
klB041Hu   人玻連蛋白(VTN)ELISA試劑盒*   ELISA Kit for Vitronectin (VTN)
klB044Hu   人膽囊收縮素八肽(CCK8)ELISA試劑盒*   ELISA Kit for Cholecystokinin 8, Octapeptide (CCK8)
klB045Hu   人蛋白激酶Cβ1(PKCβ1)ELISA試劑盒*   ELISA Kit for Protein Kinase C Beta 1 (PKCb1)
klB046Ge   人1,5-脫水葡萄糖醇(1,5-AG)ELISA試劑盒*   ELISA Kit for 1,5-Anhydroglucitol (1,5-AG)
klB049Hu   人三葉因子1(TFF1)ELISA試劑盒*   ELISA Kit for Trefoil Factor 1 (TFF1)
klB050Hu   人雌激素受體α(ERα)ELISA試劑盒*   ELISA Kit for Estrogen ReHZptor Alpha (ERa)
klB051Hu   人膽囊收縮素B受體(CCKBR)ELISA試劑盒*   ELISA Kit for Cholecystokinin B ReHZptor (CCKBR)
klB052Ge   人催產(chǎn)素(OT)ELISA試劑盒*   ELISA Kit for Oxytocin (OT)
klB054Hu   人凋亡蛋白酶激活因子1(APAF1)ELISA試劑盒*   ELISA Kit for Apoptotic Peptidase Activating Factor 1 (APAF1)
klB072Hu   人泛素連接酶E3A(UBE3A)ELISA試劑盒*   ELISA Kit for Ubiquitin Protein Ligase E3A (UBE3A)
klB074Hu   人多聚免疫球蛋白受體(PIGR)ELISA試劑盒*   ELISA Kit for Polymeric Immunoglobulin ReHZptor (PIGR)
klB075Hu   人促胰液素(SCT)ELISA試劑盒*   ELISA Kit for Secretin (SCT)
klB077Hu   人ⅡD組磷脂酶A2(PLA2G2D)ELISA試劑盒*   ELISA Kit for Phospholipase A2, Group IID (PLA2G2D)
klB080Hu   人S100鈣結(jié)合蛋白A12(S100A12)ELISA試劑盒*   ELISA Kit for S100 Calcium Binding Protein A12 (S100A12)
klB081Hu   人70kDa熱休克蛋白1A(HSPA1A)ELISA試劑盒*   ELISA Kit for Heat Shock 70kDa Protein 1A (HSPA1A)
klB084Hu   人甘丙肽(GAL)ELISA試劑盒*   ELISA Kit for Galanin (GAL)
klB083Hu   人線粒體超氧化物歧化