參考價(jià)	￥198-￥898

蛋白與免疫

免疫磁珠

蛋白制備

蛋白定量

蛋白電泳

轉(zhuǎn)模&封閉

抗體孵育

顯色成像

免疫組化

供貨周期	現(xiàn)貨	規(guī)格	100mL
貨號(hào)	AP34L024/AP34L025	應(yīng)用領(lǐng)域	環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),綜合

EZ ECL pico化學(xué)發(fā)光液（超敏型）是一款增強(qiáng)型化學(xué)發(fā)光（ECL）HRP底物，可幫助用戶在免疫印跡分析過程中實(shí)現(xiàn)低皮克級(jí)的蛋白檢測（<10-12g），極其節(jié)省抗體。本產(chǎn)品一抗?jié)舛确秶?.2-0.1μg/ml（以1 µg/mL儲(chǔ)存液稀釋1:1,000至1:5,000倍）；二抗?jié)舛?0-50ng/ml（以1 mg/mL儲(chǔ)存液稀釋1:20,000至1:100,000倍）。

詳細(xì)介紹

EZ ECL pico化學(xué)發(fā)光液（超敏型）?

產(chǎn)品描述
EZ ECL pico化學(xué)發(fā)光液是一款高靈敏度的增強(qiáng)型化學(xué)發(fā)光(ECL)HRP底物，可幫助用戶在免疫印跡分析過程中實(shí)現(xiàn)低于皮克級(jí)的蛋白檢測(<1×10^-¹²g)，極其節(jié)省抗體。EZ ECL pico底物可為使用辣根過氧化物酶(HRP)偶聯(lián)物的免疫印跡實(shí)驗(yàn)提供明亮的信號(hào)和低皮克級(jí)檢測靈敏度。該ECL底物能夠兼容各種膜、封閉液和寬范圍抗體稀釋液，以出色性能、通用性和高性價(jià)比，滿足用戶的免疫印跡應(yīng)用需求。
EZ ECL pico底物的特點(diǎn)：
• 靈敏度高：檢測硝化纖維素膜或PVDF膜上低皮克級(jí)的蛋白條帶。
• 長信號(hào)持續(xù)時(shí)間：在條件優(yōu)化情況下，經(jīng)底物孵育的印跡條帶能夠持續(xù)輸出 6~8 h 的可檢測光信號(hào)。
• 試劑穩(wěn)定：試劑盒在室溫下可穩(wěn)定放置長達(dá)6個(gè)月，4℃條件下存放1年不影響使用。
建議稀釋濃度：
• 一抗?jié)舛?/span>：建議以1mg/mL儲(chǔ)備液起1:1,000-1:5,000 或 0.2-1ug/mL
• 二抗?jié)舛?/span>：建議以1mg/mL儲(chǔ)備液起1:20,000-1:100,000或10-50ng/mL
訂購信息

產(chǎn)品名稱	貨號(hào)	規(guī)格
EZ ECL pico化學(xué)發(fā)光液（超敏型）	AP34L024	100 mL
EZ ECL pico化學(xué)發(fā)光液（超敏型）	AP34L025	500 mL

產(chǎn)品組分

組分名稱	A液	B液
AP34L024（100 mL）	50 mL	50 mL
AP34L025（500 mL）	250 mL	250 mL

運(yùn)輸與保存
藍(lán)冰運(yùn)輸。4℃避光保存，有效期12個(gè)月。
使用方法

取出印記膜，加入合適的封閉液在溫室下孵育20~60 min，同時(shí)振蕩，以封閉膜上非特異性蛋白結(jié)合位點(diǎn)。
將膜從封閉液中取出，與一抗工作液在溫室孵育1 h，同時(shí)振蕩；或在28℃孵育過夜，不振蕩。
將足量的洗滌緩沖液加至膜上，保證緩沖液將膜*覆蓋。振蕩孵育≥5 min，更換洗滌緩沖液并重復(fù)該步驟4~6次。增加洗滌緩沖液體積，洗滌次數(shù)和洗滌時(shí)間有助于降低背景信號(hào)。
【注】：①孵育前，膜在洗滌緩沖液中的短暫淋洗會(huì)提高洗滌效率。②按前文建議的HRP標(biāo)記二抗稀釋度非常重要的。
將HRP標(biāo)記的二抗工作液與膜在溫室孵育1 h，同時(shí)振蕩。
重復(fù)步驟3，以除去未結(jié)合的HRP標(biāo)記二抗。【注】：膜與HRP標(biāo)記二抗孵育后必須進(jìn)行*洗滌。
將A溶液與B液等比例混合，制備成工作液。每cm²膜使用0.01~0.1 mL工作液，工作液可以在溫室下穩(wěn)定8 h。
【注】：暴露于日光或其他強(qiáng)光下可能損害工作液，為獲得最佳結(jié)果，請(qǐng)將此工作液保存在琥珀色瓶中光；實(shí)驗(yàn)室的常見照明不會(huì)損害工作液。
將印記膜在工作液中孵育5 min。從工作液中取出印記膜，并置于一個(gè)塑料片或清潔的塑料紙（膜）中，用一張吸水紙吸除多余的液體，并從印記和塑料紙之間小心地壓出氣泡。
將包在塑料紙（膜）中的印記膜置于膠片暗盒中，蛋白質(zhì)面朝上，除適用于膠片曝光的燈（如紅色安全燈）之外，關(guān)閉所有的燈。
【注】：①膠片必須在曝光期間保持干燥；②確保將多余的底物從膜和塑料紙上*去除；③在整個(gè)膠片處理期間，使用手套。
將X光膠片置于膜的上面。建議第一次曝光60 s。之后可調(diào)整曝光時(shí)間以達(dá)到最佳結(jié)果?；瘜W(xué)發(fā)光反應(yīng)在底物孵育后的前5~30 min期間是強(qiáng)烈的。這一反應(yīng)可以持續(xù)幾個(gè)小時(shí)，但強(qiáng)度會(huì)隨時(shí)間下降，如有底物孵育后較長時(shí)間后曝光，曝光時(shí)間可能需要延長以獲得較強(qiáng)信號(hào)。如果使用磷光存儲(chǔ)成像設(shè)備（如Bio-Rad的分子成像儀系統(tǒng)）或CCD照相機(jī)可能需要較長的曝光時(shí)間。
【注】：膠片與膜之間的任何移動(dòng)可能在膠片上造成人為的非特異信號(hào)。
使用合適的顯影劑和定影劑對(duì)膠片進(jìn)行顯影。如果信號(hào)太強(qiáng)，則縮短曝光時(shí)間或?qū)⒂∮浤みM(jìn)行剝離并降低抗體濃度重新檢測。

注意事項(xiàng)

本產(chǎn)品僅限于科學(xué)實(shí)驗(yàn)研究使用，不得用于臨床診斷、治療等領(lǐng)域。
為獲得最佳效果，必須優(yōu)化該系統(tǒng)的全部組分，包括樣品量、一抗和二抗?jié)舛纫约澳ず头忾]試劑的類型。
使用本產(chǎn)品比使用沉淀比色HRP底物檢測所需的抗體濃度低。為優(yōu)化抗體濃度，請(qǐng)進(jìn)行一次系統(tǒng)的點(diǎn)印跡分析。
沒有一種封閉試劑對(duì)所有系統(tǒng)而言都是最佳的，所以為每一個(gè)免疫印跡檢測系統(tǒng)找到最合適的封閉緩沖液非常必需。封閉試劑有可能與抗體產(chǎn)生交叉反應(yīng)，導(dǎo)致出現(xiàn)非特異性信號(hào)。封閉緩沖液同時(shí)也會(huì)影響系統(tǒng)的靈敏性。當(dāng)從一種底物轉(zhuǎn)換為另一種底物時(shí)，有時(shí)會(huì)出現(xiàn)信號(hào)衰減或背景增加的現(xiàn)象，原因可能是封閉緩沖液不適合新的檢測系統(tǒng)。
使用親和素/生*素檢測系統(tǒng)時(shí)，避免使用牛奶作為封閉試劑，因?yàn)榕Ｄ讨泻胁欢康膬?nèi)源性生*素，會(huì)導(dǎo)致高背景信號(hào)。
保證洗滌緩沖液、封閉緩沖液、抗體溶液和底物工作液的使用體積，以確保在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中印跡膜*被液體覆蓋，避免膜變干。增大封閉緩沖液及洗滌緩沖液的使用量可以降低非特異性的信號(hào)。
為獲得最佳效果，在孵育步驟請(qǐng)使用搖床。
將Tween20(終濃度0.05~0.1%)加入封閉緩沖液和稀釋的抗體溶液，以降低非特異信號(hào)。使用高品質(zhì)的產(chǎn)品，如去污劑。它保存在安瓿中，過氧化物和其他雜質(zhì)含量很低。
不要使用diedanna作為緩沖液的防腐劑。diedanna是HRP的抑制。
避免手與膜直接接觸，實(shí)驗(yàn)過程應(yīng)戴手套或使用干凈的鑷子。
所有設(shè)備必須清潔且不沾染外來物質(zhì)。金屬器械（如剪刀）不得具有可見的銹跡。銹跡可能導(dǎo)致斑點(diǎn)形成和高背景。
底物工作液在室溫下可穩(wěn)定8 h。日光或任何其他強(qiáng)光下可能損害底物，為獲得最佳結(jié)果，將底物工作液保存在琥珀色瓶中，并避免長期暴漏在任何強(qiáng)光下，短時(shí)間暴漏于實(shí)驗(yàn)室常規(guī)照明不會(huì)損害該工作液。