總RNA提取試劑盒（trizol）

產(chǎn)品描述

總RNA提取試劑（trizol）（下文簡(jiǎn)稱“trizol"）的主要成分是異硫氰酸胍，它可以破壞細(xì)胞，使細(xì)胞RNA釋放出來(lái)，同時(shí)保護(hù)RNA的完整性，因此，常用于動(dòng)植物細(xì)胞RNA的提取。

訂購(gòu)信息

運(yùn)輸與保存

常溫運(yùn)輸。4℃避光保存，有效期12個(gè)月。

使用方法

1.    準(zhǔn)備樣品

l  組織樣品：液氮研磨組織法，組織塊直接放入研缽中，加入少量液氮，迅速研磨，待組織變軟，再加少量液氮，再研磨，如此三次后，按組織樣品質(zhì)量與trizol體積按照50~100 mg/mL加入，勻漿。【注】：組織體積不能超過(guò)trizol體積的10%， 否則勻漿效果不好，用電動(dòng)勻漿器勻漿約需1~2 min 。

l  細(xì)胞：培養(yǎng)貼壁細(xì)胞不須消化，可直接用trizol進(jìn)行消化及裂解，trizol體積按10 cm2/mL比例加入；懸浮細(xì)胞可直接收集，消化裂解，每1 mL trizol可裂解 5×106動(dòng)物、植物或酵母細(xì)胞，或1×107細(xì)菌細(xì)胞。

2.    細(xì)胞或組織加trizol后，室溫放置5 min,使其充分裂解?！咀ⅰ浚捍藭r(shí)可放入﹣70℃ 長(zhǎng)期保持。

3.    12,000g離心5 min,棄沉淀。

4.    按200 μL氯仿/mL trizol加入氯仿，振蕩混勻后室溫放置15 min?！咀ⅰ浚航娩鰷u振蕩器，以免基因組DNA斷裂。

5.    4℃ 12,000g離心15 min 。

6.    吸取上層水相，至另一離心管中?！咀ⅰ浚呵f(wàn)不要吸取中間界面:若同時(shí)提取DNA和蛋白質(zhì)，則保留下層酚相存于4℃ 冰箱，若只提RNA,則棄下層酚相。

7.    0.5mL異丙醇/mL trizol加入異丙醇混勻，室溫放置5~10 min 。

8.    4℃ 12,000g離心10 min, 棄上清，RNA沉于管底。

9.    按1 mL 75%乙醇/mL trizol加入75% 乙醇，溫和振蕩離心管，懸浮沉淀。

10.  4℃ 8,000g 離心5 min, 盡量棄上清液。

11.  室溫晾干或真空干燥5~10 min?！咀ⅰ浚篟NA樣品不要過(guò)于干燥，否則很難溶解。

12. 可用50 μL H₂O、TE buffer或0.5% SDS溶解RNA樣品，55~60℃ ,5~10 min?！咀ⅰ浚篐₂O、TE buffer或0.5% SDS均須用DEPC處理并高壓。

注意事項(xiàng)

1.    本產(chǎn)品于科學(xué)實(shí)驗(yàn)研究使用，不得用于臨床診斷、治療等領(lǐng)域。

2.    操作人員應(yīng)經(jīng)過(guò)專門培訓(xùn)，嚴(yán)格遵守操作規(guī)程。

3.    操作處置應(yīng)在具備局部通風(fēng)或全面通風(fēng)換氣設(shè)施的場(chǎng)所進(jìn)行。

4.    避免眼和皮膚的接觸，避免吸入蒸汽。

5.    遠(yuǎn)離火種、熱源，工作場(chǎng)所嚴(yán)禁吸煙。

6.    整個(gè)提RNA過(guò)程需要無(wú)RNase的實(shí)驗(yàn)用具。

相關(guān)產(chǎn)品推薦

RNA提取輔助試劑（氯仿替代物）（貨號(hào)：AN51L675）

總RNA柱式提取試劑盒（貨號(hào)：AN51L517）

本產(chǎn)品于科學(xué)實(shí)驗(yàn)研究使用，不得用于臨床診斷、治療等領(lǐng)域。