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廣州誠(chéng)技商貿(mào)有限公司
主營(yíng)產(chǎn)品： DNA合成儀，寡核苷酸脫保護(hù)基微波高壓反應(yīng)器，生物標(biāo)記物成像系統(tǒng)，蛋白質(zhì)成像系統(tǒng)，腫瘤標(biāo)記物成像系統(tǒng)，瓶厚度測(cè)量?jī)x，瓶胚尺寸測(cè)量?jī)x，瓶尺寸和厚度測(cè)量?jī)x |
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主營(yíng)產(chǎn)品： DNA合成儀，寡核苷酸脫保護(hù)基微波高壓反應(yīng)器，生物標(biāo)記物成像系統(tǒng)，蛋白質(zhì)成像系統(tǒng)，腫瘤標(biāo)記物成像系統(tǒng)，瓶厚度測(cè)量?jī)x，瓶胚尺寸測(cè)量?jī)x，瓶尺寸和厚度測(cè)量?jī)x |
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DNA合成氨氣氨解儀是為有效制備生物樣品而設(shè)計(jì)的，用于PCR引物、探針和組分生產(chǎn)，DNA測(cè)序、DNA和RNA合成、隨機(jī)啟動(dòng)、載體設(shè)計(jì)、DNA指紋和人工基因合成。是DNA/RNA/寡核苷酸脫保護(hù)基快捷高效穩(wěn)定的解決方案。
DNA合成氨氣氨解儀特點(diǎn)：
反應(yīng)器容量：10升容量
樣品數(shù)量：6至10個(gè)，每個(gè)樣品有96位。
溫度范圍:*200°C
功率輸出：1200瓦
符合CE標(biāo)志
保修12個(gè)月
電源：220 V至240 V/50/60 Hz
*功耗：2500瓦
顯示屏：彩色觸摸屏
尺寸:W x D x H 52 x 73 x 123厘米（無(wú)終端）
重量：180公斤
采用Oligo高壓微波氨解儀，一次性可以氨解960個(gè)樣品并直接得到干燥的樣品，氨解時(shí)間也大大縮短。
傳統(tǒng)的氨解步驟如下，費(fèi)時(shí)費(fèi)力：
一． 氨解前的準(zhǔn)備
1. 檢查純化所需材料及試劑是否充足。、
2. 活化C18板（柱） 向C18板加滿0.5M NaCl，抽干，重復(fù)平衡3次，再加滿分析純，抽干5次以上，后以洗脫速度離心。洗脫后再向C18板內(nèi)加滿0.5M NaCl，抽干，重復(fù)3次，完畢再向C18板內(nèi)加滿0.5M NaCl以待用。C18柱活化，首先用20ml分析純活化C18一次，吹干甲醇，然后用10ml NaCl平衡1次以待用。
3.制板灌膠 計(jì)算好預(yù)用分析板及電泳板數(shù)量以灌膠。膠液制作，每塊板需50ml左右的16%的膠（短鏈，16%；長(zhǎng)鏈，12%），每塊板平均加入過(guò)硫酸銨100ul，TEMED 30ul(依情況而定，可適量增減)，搖晃，混勻，倒入板中，水平放置，使膠凝固。注意板中不能有氣泡，并注意補(bǔ)膠。
注意事項(xiàng)：①所用C18板需定期進(jìn)行維護(hù)與檢測(cè)。
②每一瓶新制膠使用之前需對(duì)膠跑Marker以保能正常使用。
二． 氨解
原理：切割—將合成好的寡核苷酸鏈從支持物上化學(xué)切割下來(lái)。用冰氨水來(lái)裂解CPG
連接化合物與初始核苷間的酯鍵。斷裂下來(lái)的寡核苷酸帶有自由的3‘羥基。
脫保護(hù)基—用冰氨水處理較長(zhǎng)時(shí)間以脫掉堿基環(huán)上的氰乙基、苯甲?；?、異丙基等保護(hù)基團(tuán)。
1. 單管氨解
① 將合成好的柱子用注射器針頭將CPG或樹脂粉末全部倒入氨解瓶中，并將對(duì)應(yīng)的標(biāo)簽貼在氨解瓶上。
② 加入冰三乙胺100ul，冰氨水1.5ml，蓋緊瓶蓋，放入80度烘箱氨解2小時(shí)。對(duì)用快速氨解單體合成的序列直接加氨水后55度2小時(shí)即可。在生產(chǎn)操作表上準(zhǔn)確記錄開始氨解的時(shí)間。
注意事項(xiàng):①在將引物放入氨解瓶時(shí),要核對(duì)清楚標(biāo)簽,要一一對(duì)應(yīng)。
②三乙胺與氨水順序要防止加反。(加反后會(huì)出現(xiàn)分層現(xiàn)象)
③氨解中使用的氨水必須是冰凍狀態(tài)中的氨水。
2. 96孔板氨解
①55度氨解
對(duì)好標(biāo)簽，向合成板內(nèi)加入適量的乙氰放在墊板上，重量平衡，高速離心。（對(duì)于3900，離心完后需用注射器針頭將砂芯勾出）離心完后，將墊板換成正面貼有對(duì)應(yīng)輪次標(biāo)簽的氨解板上。放入通風(fēng)櫥。先向合成板每孔加入50ul三乙胺，再向每孔加入250ul氨水，用膠帶封好放入氨解盒中，在操作單上登記好時(shí)間和氨解人，放入55度烘箱氨解40min。
②80度氨解
40min后取出，放入通風(fēng)櫥趕氨1min，高速離心。拿去合成板用20ul小槍取小樣20ul；在向氨解板每孔內(nèi)加入冰氨水200ul，封好膠帶，用夾板夾好，登記好時(shí)間，放入80度烘箱氨解2h。
注意事項(xiàng):①務(wù)必在氨解板正面貼上該輪次標(biāo)簽,然后再位置一一對(duì)應(yīng)墊再合成板下面,一起氨解,離心。
②三乙胺與氨水順序要防止加反。(加反后會(huì)出現(xiàn)分層現(xiàn)象)
③氨解中使用的氨水必須是冰凍狀態(tài)中的氨水。
④夾板密封時(shí)要注意擰緊,防止出現(xiàn)漏氨。
