化學(xué)發(fā)光酶標(biāo)儀的原理和分析流程你知道嗎?
化學(xué)發(fā)光酶標(biāo)儀廣泛用于腫瘤標(biāo)志物、激素等免疫類項(xiàng)目的檢測,采用*的磁性微粒子技術(shù)、超靈敏度光電倍增管及穩(wěn)定的放大系統(tǒng),具有高靈敏度、高穩(wěn)定性、高準(zhǔn)確性的特點(diǎn)。
化學(xué)免疫發(fā)光分析又稱化學(xué)發(fā)光免疫分析(CL IA ) ,是用化學(xué)發(fā)光劑直接標(biāo)記抗原或抗體的免疫分析方法?;瘜W(xué)發(fā)光免疫分析儀包含兩個部分, 即免疫反應(yīng)系統(tǒng)和化學(xué)發(fā)光分析系統(tǒng)?;瘜W(xué)發(fā)光分析系統(tǒng)是利用化學(xué)發(fā)光物質(zhì)經(jīng)催化劑的催化和氧化劑的氧化, 形成一個激發(fā)態(tài)的中間體, 當(dāng)這種激發(fā)態(tài)中間體回到穩(wěn)定的基態(tài)時, 同時發(fā)射出光子(hM) , 利用發(fā)光信號測量儀器測量光量子產(chǎn)額。免疫反應(yīng)系統(tǒng)是將發(fā)光物質(zhì)(在反應(yīng)劑激發(fā)下生成激發(fā)態(tài)中間體) 直接標(biāo)記在抗原(化學(xué)發(fā)光免疫分析) 或抗體(免疫化學(xué)發(fā)光分析) 上, 或酶作用于發(fā)光底物。
化學(xué)發(fā)光酶標(biāo)儀工作原理:
化學(xué)發(fā)光免疫分析儀以磁性微粒子為載體,以堿性磷酸酶為標(biāo)記物,采用夾心法或競爭結(jié)合法,以發(fā)光底物AMPPD為基礎(chǔ)進(jìn)行免疫檢測。
化學(xué)發(fā)光酶標(biāo)儀的工作流程:
主探針吸取標(biāo)本、試劑和磁性微粒并注入RV(反應(yīng))管中。稀釋混合后的RV管被傳送入孵育帶進(jìn)行孵育,以加速抗原與抗體的結(jié)合,并終形成固相包被(即抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合體),接著RV管被送入清洗轉(zhuǎn)盤洗滌2~3次,此期間磁性微粒包被在電磁場的作用下被吸附在RV管一側(cè)以進(jìn)行清洗,其未結(jié)合多余成分被吸出并排走。
清洗好后,由基質(zhì)液泵和基質(zhì)液閥吸入發(fā)光底物AMPPD,并分配到RV管中,再次孵育以加強(qiáng)信號,此期間磁性粒子表面的堿性磷酸酶在催化作用下產(chǎn)生處于激發(fā)態(tài)的間氧苯甲酸甲酯陰離子,當(dāng)該陰離子回到基態(tài)時會產(chǎn)生470nm的光,并被光電管檢測而終產(chǎn)生結(jié)果。