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當(dāng)前位置:上海領(lǐng)駿生物科技有限公司>>技術(shù)文章>>全血、血清、血漿樣本在DNA提取過程中的區(qū)別
在核酸提取中,很多的血液類DNA提取試劑盒對于全血、血漿、血清均可使用,所以有些人認(rèn)為這三種樣本可以隨意選擇試劑盒來進(jìn)行核酸檢測,但是得到的結(jié)果卻達(dá)不到預(yù)期,那么這三種樣本有什么區(qū)別,對核酸診斷實(shí)驗(yàn)有什么影響呢?
血漿包括血清和纖維蛋白原。血清與血漿從表面上看似乎沒有什么不同,血漿是未經(jīng)抗凝處理過的血液凝固后得到的。血液的抗凝處理需要抗凝劑,選用什么抗凝劑應(yīng)根據(jù)具體的實(shí)驗(yàn)要求進(jìn)行選擇。血液由液體成分血漿和有形成分血細(xì)胞兩部分組成,而血清是血凝后析出的淡黃色澄清液體,較之血漿少了某些凝血因子和纖維蛋白原。
從核酸診斷的角度來講,人的基因組DNA更多的存在于白細(xì)胞中,而只有少量游離DNA存在于血清中,但如果白細(xì)胞大量凋亡,血清中的游離DNA量會有所增加。而具有致病性的病原體核酸大量存在于血清中,幾乎不存在于血細(xì)胞中。
所以,如果是以人的核酸為檢驗(yàn)?zāi)繕?biāo),如篩查白化病,篩查血友病等,應(yīng)該以全血作為實(shí)驗(yàn)樣本,因?yàn)檠搴脱獫{中所含有的人的核酸數(shù)量遠(yuǎn)遠(yuǎn)少于全血,檢測靈敏度會降低很多。
而如果是以病原體核酸為檢驗(yàn)?zāi)繕?biāo),如檢測乙肝感染情況,檢測感冒病毒等,則以血清或血漿為實(shí)驗(yàn)樣本,這會天然地剔除血細(xì)胞這種雜質(zhì),明顯降低核酸提取過程中的難度,有利于提高核酸純凈度,增加檢測反應(yīng)靈敏性和穩(wěn)定性。
而血清和血漿相比,一方面血清中含有更少的纖維蛋白原,一方面血清中的DNA是循環(huán)DNA,主要來源于病變組織,所以使用血清作為實(shí)驗(yàn)樣本,可以更進(jìn)一步提高樣本純凈度,減少蛋白雜質(zhì),提高病原體濃度,獲得更為靈敏的檢測結(jié)果。
對于試劑盒而言,在相同體系下,樣本雜質(zhì)越少,DNA的提取質(zhì)量就越高。因此要通過實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮蛯?shí)驗(yàn)材料來慎重選擇試劑盒。
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