TGW16離心機(jī)是利用旋轉(zhuǎn)運(yùn)動(dòng)的離心力以及物質(zhì)的沉降系數(shù)或浮力密度的差異進(jìn)行分離、濃縮和提純生物樣品的一種方法。懸浮液在高速旋轉(zhuǎn)下,由于巨大的離心力作用,使懸浮的微小顆粒 ( 細(xì)胞器、生物大分子的沉淀等 ) 以一定的速度沉降,從而使溶液得以分離、濃縮和提純,顆粒的沉降速度取決于離心機(jī)的轉(zhuǎn)速、顆粒的質(zhì)量、大小和密度,離心機(jī)就是利用離心機(jī)轉(zhuǎn)子高速旋轉(zhuǎn)產(chǎn)生的強(qiáng)大的離心力,迫使液體中微粒克服擴(kuò)散加快沉降速度,把樣品中具有不同沉降系數(shù)和浮力密度的物質(zhì)分離開(kāi)。
高速離心機(jī)的結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單,由電動(dòng)機(jī)、離心轉(zhuǎn)盤(pán)、調(diào)速器、定時(shí)器、離心套管與底座等部件構(gòu)成。電動(dòng)機(jī) :是離心機(jī)的主件,多為串激式。它包括定子和轉(zhuǎn)子兩部分。串激式電動(dòng)機(jī)有很大的啟動(dòng)轉(zhuǎn)矩,隨著負(fù)載的增加,轉(zhuǎn)速急速下降,空載時(shí)轉(zhuǎn)速很高。離心轉(zhuǎn)盤(pán) ( 轉(zhuǎn)頭 ) :離心轉(zhuǎn)盤(pán)常用鑄鋁制成,平頂錐形,中間有一圓孔,套在電動(dòng)機(jī)上端的轉(zhuǎn)軸上,然后用螺帽旋緊固定,轉(zhuǎn)盤(pán)上有 6-12 個(gè)對(duì)稱(chēng)的 45°角的斜孔,以放試管。調(diào)速裝置 :( 控制電動(dòng)機(jī) ) 有多種 , 如多抽頭變阻器、瓷盤(pán)可變電阻器等多種形式。在電源與電動(dòng)機(jī)之間串聯(lián)一只多抽頭扼流圈或瓷盤(pán)可變電阻器,改變電動(dòng)機(jī)的電流和電壓,通過(guò)旋轉(zhuǎn)或觸摸面板自動(dòng)控制系統(tǒng),達(dá)到轉(zhuǎn)速調(diào)節(jié)。離心套管 : 主要用塑料和不銹鋼制成。塑料離心管透明 ( 或半透明 ),常用性能較好的材料,如聚丙烯(PP),其硬度小,可用穿刺法取出梯度層,但易變形,抗有機(jī)溶劑腐蝕性差,使用壽命短。塑料離心管都有管蓋,在臺(tái)式高速微量離心機(jī)TGW16離心前管蓋必須蓋嚴(yán),防止倒置時(shí)漏液。不銹鋼離心管強(qiáng)度大,不變形,能抗熱、抗凍、抗化學(xué)腐蝕。
離心分離的效果除了與離心機(jī)種類(lèi)、離心方法、離心介質(zhì)及密度梯度等因素有關(guān)以外,實(shí)際操作時(shí),主離心機(jī)轉(zhuǎn)速和離心時(shí)間的確定、離心介質(zhì)的PH值和溫度等條件也至關(guān)重要。離心加速度的大小取決于轉(zhuǎn)子的轉(zhuǎn)速和顆粒的旋轉(zhuǎn)半徑。在說(shuō)明離心條件時(shí),往往也用相對(duì)離心力場(chǎng)來(lái)表示。實(shí)際工作中,離心力場(chǎng)的數(shù)據(jù)是指其平均值。即是指在離心溶液中點(diǎn)處顆粒所受的離心力場(chǎng)。離心時(shí)間依據(jù)離心方法的不同而有所差別。對(duì)于差速離心來(lái)說(shuō),是指某種顆粒*沉降到離心管底的時(shí)間;對(duì)等密度梯度離心而言,離心時(shí)間是指顆粒*到達(dá)等密度點(diǎn)的平衡時(shí)間;而密度梯度離心所需的時(shí)間則是指形成界限分明的區(qū)帶的時(shí)間。對(duì)于密度梯度離心和等密度梯度離心所需的區(qū)帶形成時(shí)間或平衡時(shí)間,影響因素很復(fù)雜,可通過(guò)試驗(yàn)后確定。顆粒的沉降時(shí)間又稱(chēng)澄清時(shí)間,是指顆粒從離心樣品液液面*沉降到離心管底所需的時(shí)間。沉降時(shí)間決定于顆粒沉降速度和沉降距離。
溫度和PH值:為了防止分離物質(zhì)的凝集、變性和失活,除了在離心介質(zhì)的選擇方面加以注意外,還必須控制好溫度及介質(zhì)溶液的PH值等離心條件。離心溫度一般控制在4度左右,對(duì)于某些熱穩(wěn)定性較好的酶等,離心也可在室溫下進(jìn)行。但在超速或高速離心時(shí),轉(zhuǎn)子高速旋轉(zhuǎn)會(huì)發(fā)熱從而引起溫度升高。故必須采用冷凍系統(tǒng),使溫度保持在一定范圍內(nèi)。
離心介質(zhì)溶液的PH值應(yīng)該是處于酶穩(wěn)定的PH范圍內(nèi),必要時(shí)可采用緩沖液。另外,過(guò)酸或過(guò)堿還可能引起轉(zhuǎn)子和離心機(jī)的其他部件的腐蝕,應(yīng)盡量避免。
臺(tái)式高速微量離心機(jī)TGW16技術(shù)參數(shù):