腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)時注意事項

腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)時注意事項
1.    玻璃吸管和玻璃培養(yǎng)瓶的消毒:1)高壓蒸汽滅菌15分鐘以上;2)干烤消毒140度2小時以上;
2.    無菌工作臺先清洗后用75%酒精擦拭干凈，紫外線照射40分鐘以上;各種培養(yǎng)板照射3小時以上;
3.    培養(yǎng)基(pH7.2)和血清配制好后要做無菌試驗:將血清按10%加入培養(yǎng)基內(nèi)，用無菌的玻璃離心管或玻璃瓶取*培養(yǎng)基5-10ml置培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)2-3天，肉眼見無渾濁或沉淀等異物。分裝后置4度保存;
4.    消化液(pH7.8)或其它加入液，應(yīng)用高壓蒸汽滅菌或一次性無菌濾器過濾除菌，分裝成支置-20度保存;
5.    培養(yǎng)箱應(yīng)先用清水清洗后用75%酒精擦拭一遍(如有紫外線的應(yīng)照射1小時以上，如有高溫滅菌的應(yīng)按程序來菌)。至少每月一次。
6.    進(jìn)入操作時應(yīng)注意先清洗雙手及手腕，然后用75%酒精擦拭，操作時注意無菌臺內(nèi)空間層次。手及物品不要在暴露的瓶口上方來往，如果數(shù)量較多，培養(yǎng)瓶應(yīng)放在與酒精燈平行地方便于操作，瓶與瓶之間應(yīng)相隔一定的距離，開瓶(蓋)時應(yīng)先用75%酒精反復(fù)擦拭或用燈燒，打開后應(yīng)用燈先燒口，然后燒蓋。用完后同樣操作。腫瘤細(xì)胞整個操作過程盡量在無菌臺靠里面一點。
Ana-1(小鼠巨噬細(xì)胞)    5×106cells/瓶×2
Anglne(人卵巢癌細(xì)胞)    5×106cells/瓶×2
AR42J(大鼠胰腺外分泌細(xì)胞)    5×106cells/瓶×2
ARPE-19(人視網(wǎng)膜上皮細(xì)胞)    5×106cells/瓶×2
AsPC-1(人胰腺癌細(xì)胞)    5×106cells/瓶×2
AtT-20(小鼠垂體瘤細(xì)胞)    5×106cells/瓶×2
B16(小鼠黑色素瘤細(xì)胞)    5×106cells/瓶×2
Bcap-37(人乳腺癌細(xì)胞)    5×106cells/瓶×2
BEL-7402(人肝癌細(xì)胞)    5×106cells/瓶×2
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