鴨病毒性腸炎病毒（DEV）elisa試劑盒實驗方法

鴨病毒性腸炎病毒(DEV)elisa試劑盒實驗方法     英文名稱：Duck virus enteritis,DEV ELISA Kit       檢測方法：elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗是一種敏感性高，特異性強，重復(fù)性好的實驗方法。其試劑穩(wěn)定、易保存，操作簡便。凡購買本公司試劑盒非人為質(zhì)量問題，收貨后十五個工作日內(nèi)包退換。 
英文名稱：Duck virus enteritis,DEV ELISA Kit   
規(guī)格：96T/48T
主要成分:酶標板,試劑,標準品等
性狀：盒裝液體
人白介素2受體（IL-2R)Elisa測定試劑盒用途：科研與實驗試劑，不得用于臨床診斷。
標本：血清、血漿、細胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
種屬：人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
鴨病毒性腸炎病毒(DEV)elisa試劑盒實驗方法實驗材料與試劑配制：
1. 儀器與材料：酶標儀（使用前預(yù)熱30分鐘），微量加液器、吸頭、蒸餾水或去離子水，濾紙。
2. 緩沖液使用：加5ul 的緩沖液于50ul 的樣品中，如果樣品量不夠或者不確定，緩沖液和樣品的混合比例不要小于1:10即可。 混勻，靜置1小時備用（如果標本是血清或者血漿，此步驟忽略）。
3. 洗液的配制：按1:100的比例配制洗液備用。
鴨病毒性腸炎病毒(DEV)elisa試劑盒實驗方法樣品收集、處理及保存
1. 細胞培養(yǎng)上清：適用于檢測體外培養(yǎng)的細胞分泌性成份。用無菌管收集細胞上清液，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
2. 細胞：用PBS反復(fù)洗滌細胞3次，調(diào)整細胞濃度達到104 -106 /ml 左右，通過反復(fù)凍融，使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份，或 者細胞超聲粉碎，離心取上清液檢測。
3. 血清：在室溫下，血液自然凝固，以1000×g離心15分鐘，取上清待測。
4. 血漿：應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合后靜置10-20 分鐘后，以1000×g離心15分鐘，收集上 清。
5. 體液：包括胸腹水、腦脊液，分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
6. 組織標本：切取組織標本，稱取重量0.5mg，加入500ul 的PBS，用手工或勻漿器，或超聲破碎儀將標本勻漿，以2000-3000 rmp離心20 分鐘，收集上清進行檢測。
7. 樣品中不能含有NaN3，因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
8. 保存：如果樣品不能立即檢測，應(yīng)將其分裝，-70 ℃保存，避免反復(fù)冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。血液標 本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解 凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
鴨病毒性腸炎病毒(DEV)elisa試劑盒實驗方法操作步驟：
1. 取出試劑盒，室溫（20-25℃）放置 30 分鐘。
2. 分組：取出 96 孔板，根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)，把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。分別設(shè)標準 品組（6 個濃度）、空白孔、待測樣品組。 注：為減少實驗誤差，保證準確性，建議設(shè)置復(fù)孔。
3. 加樣：依照標準品的順序分別加入 50ul 的標準品溶液于空白微孔中；空白對照孔加入 50ul 的蒸餾水；其余微孔中加入 50ul 的待測樣本。
4. 加酶標溶液：標準品組、待測樣本組各孔中加入 100ul 的酶標溶液（空白對照孔除外）。
5. 溫育：酶標板用封板紙密封后，放入濕盒內(nèi)于 37℃恒溫孵育 1 小時。
6. 洗板：用稀釋后的洗滌液注滿每孔，靜置 15-30s，充分清洗酶標板 5 次，用吸水紙*拍干。
7. 顯色：各孔加入顯色劑 A 液 50ul 后，再加入顯色劑 B 液 50ul。
8. 終止：25-37℃下避光反應(yīng) 10-15 分鐘，加入 50ul 終止液。 9. 讀板：在 450nm 波長讀取各孔的 OD 值。 
注意事項：
1. 實驗操作中必須使用一次性吸頭，避免交叉污染。
2. 加樣：加樣時，要控制加樣速度，避免*孔與zui后一孔間的時間間隔過大，否則將會導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時間，從而影響 實驗的準確性以及重復(fù)性。
3. 孵育：嚴格按照說明書上規(guī)定的孵育時間和溫度進行。
4. 反應(yīng)時間的控制：加入底物后請定時觀察反應(yīng)孔的顏色變化，如果顏色較深，請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)。
5. 建議實驗前預(yù)測樣品含量，如樣品濃度過高，應(yīng)對樣品進行稀釋，計算結(jié)果時乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
6. 建議使用本試劑盒時先做預(yù)實驗（即先做標準曲線，試用幾個標本），如果對本試劑盒有任何疑問，可和所購經(jīng)銷商， 如果因運輸過程導(dǎo)致試劑盒失效，可要求調(diào)換，但概不承擔產(chǎn)品本身以外的任何損失。
鴨病毒性腸炎病毒(DEV)elisa試劑盒實驗方法安全性
1． 避免人體直接接觸顯色劑A、B和終止液。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。
2． 實驗中不要進食、抽煙或使用化妝品。
3． 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

Raji，人Burkitt's淋巴瘤細胞gersion

E.G7-OVA(小鼠T淋巴瘤細胞)5×106cells/瓶×2

MTT細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒規(guī)格：500次gersion

RKO(人結(jié)腸腺細胞)5×106cells/瓶×2

II型膠原酶(含10mL酶解緩沖液)1mL

CHO(倉鼠卵巢細胞)5×106cells/瓶×2

Flag標簽蛋白裂解液20 ug20μg、100μg

小鼠視網(wǎng)膜muller細胞*培養(yǎng)基100mL

BC-020(人腺細胞)5×106cells/瓶×2

小鼠腸微血管細胞*培養(yǎng)基100mL

L-Glutamine (100X)規(guī)格：100ml

人胎盤羊膜細胞*培養(yǎng)基100mL

MCPC培養(yǎng)基/MCPC Medium弧菌的分離培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進口

人卵巢細胞英文名稱：COC1

醋酸鹽瓊脂/乙酸鹽瓊脂/Acetate Agar細菌醋酸鹽試驗250克國產(chǎn)/進口

牛腎細胞英文名稱：MDBK (NBL-1)

賴氨酸鐵瓊脂/LIA瓊脂/Lysine Iron Agar食品中沙門氏菌生試驗250克國產(chǎn)/進口

大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞（高分）英文名稱：PC-12（高分）

肉湯瓊脂培養(yǎng)基/Broth Agar Medium藥品衛(wèi)生檢驗，細菌數(shù)測定，無菌試驗250克國產(chǎn)/進口

V5標簽免疫親和介質(zhì)125ul國產(chǎn)

胰酪胨大豆酵母浸膏肉湯/胰酶大豆酵母浸膏肉湯/LE肉湯/TSB-YE/TSYEB用于單核細胞和李斯特菌增菌培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進口

RS1(大鼠膚成纖維樣細胞)5×106cells/瓶×2

IAR20(大鼠肝細胞)5×106cells/瓶×2

NCI-H295R(人腎上腺質(zhì)腺細胞)5×106cells/瓶×2gersion

T-47D(人腺管細胞)5×106cells/瓶×2

Cary-Blair氏運送培養(yǎng)基/Cary-Blair Transfort Medium運送腸道致病菌標本250克國產(chǎn)/進口

Tissue Protein Extraction Kit/組織蛋白抽提試劑盒25次、100次國產(chǎn)

羊IgG1 ml國產(chǎn)

Myc標簽蛋白裂解液20 ug20μg、100μggersion Caffeine （5 g） 3，7-dihydro-1，3，7-trimethyl-1H-purine-2，6-dione； Methyltheobromine|NSC 5036； Caffeine

HMA （hydrochloride） （10 mg） 4-（2-aminopropyl）-2-methoxy-phenol， monohydrochloride； 4-hydroxy-3-Methoxyamphetamine|NSC 172191； HMA （hydrochloride）

4-hydroxy DET （25 mg） 3-[2-（diethylamino）ethyl]-1H-indol-4-ol； 4-OH DET|4-hydroxy Diethyltryptamine|CZ 74|Ethocin； 4-hydroxy DET

UR- N-pentanoic acid metabolite-d5 （1 mg） 5-（3-（2，2，3，3-tetramethyl-cyclopropanecarbonyl）-1H-indol-1-yl）pentanoic acid-2，4，5，6，7-d5； XLR11 N-pentanoic acid metabolite-d5； UR- N-pentanoic acid metabolite-d5

4’-fluoro-α-Pyrrolidinopropiophenone （hydrochloride） （5 mg）   1-（4-fluorophenyl）-2-（1-pyrrolidinyl）-1-propanone， monohydrochloride； 4’F-α-PPP； 4’-fluoro-α-Pyrrolidinopropiophenone （hydrochloride）

PB-22 5-hydroxyquinoline isomer （10 mg）   quinolin-5-yl 1-pentyl-1H-indole-3-carboxylate； PB-22 5-hydroxyquinoline isomer

A-438079 （hydrochloride） （10 mg）    3-[[5-（2，3-dichlorophenyl）-1H-tetrazol-1-yl]methyl]-pyridine， monohydrochloride； A-438079 （hydrochloride）

Aloesin （5 mg）    8-β-D-glucopyranosyl-7-hydroxy-5-methyl-2-（2-oxopropyl）-4H-1-benzopyran-4-one； Aloesin

鴨病毒性腸炎病毒(DEV)elisa試劑盒實驗方法Cysmethynil （5 mg）    5-（3-methylphenyl）-1-octyl-1H-indole-3-acetamide； Icmt Inhibitor； Cysmethynil

Nafamostat （mesylate） （50 mg）   4-[（aminoiminomethyl）amino]-6-（aminoiminomethyl）-2-naphthalenyl ester-benzoic acid， dimethanesulfonate； Coahibitor|FUT 175|Nafamastat； Nafamostat （mesylate）

NSC 87877 （10 mg） 8-hydroxy-7-[2-（6-sulfo-2-naphthalenyl）diazenyl]-5-quinolinesulfonic acid； NSC 87877