商品介紹:
FDA水解反應(yīng)能很好的反應(yīng)土壤中微生物活性和土壤質(zhì)量的變化以及生態(tài)系統(tǒng)中有機(jī)質(zhì)的轉(zhuǎn)化,是土壤質(zhì)量研究中的重要生物學(xué)指標(biāo)之一。
測(cè)定原理
FDA是一種無(wú)色化合物,在介質(zhì)中能被許多土壤酶所催化水解,并經(jīng)脫水反應(yīng),產(chǎn)生酶解終產(chǎn)物熒光素,穩(wěn)定不易被分解,并在490nm處有強(qiáng)吸收峰,通過(guò)檢測(cè)490nm處的吸光值變化可計(jì)算得FDA水解酶活性。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器
天平、低溫離心機(jī)、可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、恒溫水浴鍋。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 測(cè)試方法 | 貨號(hào) |
土壤熒光素二乙酸酯(FDA)水解酶微量法測(cè)試盒 | 100管/48樣 | 微量法 | GOY-01S6865 |
劑組成和配制:
提取液:液體100mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:液體20mL×1瓶,4℃保存。
試劑二:粉劑×1瓶,4℃避光保存。臨用前加1mL蒸餾水溶解;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融。
試劑三:粉劑×1瓶,4℃避光保存。臨用前加1mL蒸餾水溶解;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融。
試劑四:粉劑×1瓶,4℃避光保存。臨用前加1mL蒸餾水溶解;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融。
測(cè)定操作表:
酶活性計(jì)算公式:
a. 用微量石英比色皿測(cè)定的計(jì)算公式如下
(1)按樣本蛋白濃度計(jì)算:
酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每毫克組織蛋白每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量為一個(gè)酶活力單位(U)。
DAO活性(nmol/min/mg prot)= ×V反總÷(V樣×Cpr)÷T= 18×A460÷Cpr
(2)按樣本質(zhì)量計(jì)算:
酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每克組織每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個(gè)酶活力單位。
DAO活性(nmol/min/g 鮮重)= ×V反總÷(V樣÷V樣總×W)÷T= 18×A460÷W
(3)按細(xì)胞數(shù)量計(jì)算:
酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每104個(gè)細(xì)胞每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個(gè)酶活力單位。
DAO活性(nmol/min/104cell)= ×V反總÷(V樣÷V樣總×細(xì)胞數(shù)量)÷T= 18×A460÷細(xì)胞數(shù)量
(4) 按液體體積計(jì)算
酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每毫升血清每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個(gè)酶活力單位。
DAO活性(nmol/min/mL)= ×V反總÷V樣÷T= 18×A460
ε:氧化型鄰聯(lián)茴香胺毫摩爾消光系數(shù):7.5 L/mmol/cm;d:比色皿光徑,1cm;V反總:反應(yīng)總體積,0.2mL;V樣:反應(yīng)中樣本體積,0.05mL;V樣總:加入提取液體積,1mL;Cpr:樣本蛋白濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g;T:反應(yīng)時(shí)間,30min
b. 用96孔板測(cè)定的計(jì)算公式如下
(1)按樣本蛋白濃度計(jì)算:
酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每毫克組織蛋白每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量為一個(gè)酶活力單位(U)。
DAO活性(nmol/min/mg prot)= ×V反總÷(V樣×Cpr)÷T= 36×A460÷Cpr
(2)按樣本質(zhì)量計(jì)算:
酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每克組織每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個(gè)酶活力單位。
DAO活性(nmol/min/g 鮮重)= ×V反總÷(V樣÷V樣總×W)÷T= 36×A460÷W
(3)按細(xì)胞數(shù)量計(jì)算:
酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每104個(gè)細(xì)胞每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個(gè)酶活力單位。
大提柱式質(zhì)粒 DNAout 10 次 微型離心管專(zhuān)用研磨杵 ( 無(wú)離心管 ) 50 只
大提無(wú)內(nèi)毒素質(zhì)粒 DNAout5次 微量雙鏈 DNA 定量試劑盒1mL
大提無(wú)內(nèi)毒素質(zhì)粒 DNAout10 次 微量核酸提取試劑盒50 次
96 孔板質(zhì)粒 DNAout( 離心法 )1次 微量核酸提取試劑盒200 次
96 孔板質(zhì)粒 DNAout( 真空法 )1次 微量核酸沉淀劑10mL
兔抗 GST 標(biāo)簽多抗20μL RNA 級(jí) Tris Base( 三羥甲基氨基 )100g
HRP 標(biāo)記的兔抗 GST 標(biāo)簽多抗20μL RNA 級(jí) SDS( 十二烷基硫酸 )100g
一站式 MBP 標(biāo)簽蛋白純化套裝20 次 RNA 級(jí) Sarkosyl( 月桂酰 -N- 甲基氨基乙酸 ) 100g
小鼠抗 His 標(biāo)簽單抗100μL RNA 級(jí) PVP K30( 聚乙烯基烷酮 K30) 100g
小鼠抗 His 標(biāo)簽單抗1000μL RNA 級(jí) Oligo(dT) 纖維素25mg
α-亞麻酸含量試劑盒(HPLC)
β-1,3葡聚糖酶(β-1,3-GA)測(cè)試盒
β2微球蛋白β2-MG試劑盒 R1:40ml×1 R2:10ml×1 膠乳增強(qiáng)
β-Actin 100ul
β-半乳糖苷酶 EC 3.2.1.23 1 KU/瓶
土壤熒光素二乙酸酯(FDA)水解酶微量法測(cè)試盒LPS(TLR4 激活劑 )0.5mg ATP 溶液,100mM0.25mL
LY294002(PI3K 抑制劑 )1mg APMSF 溶液,10mg/mL1mL
Metformin(LKB1-AMPK 激活劑 )1g AP 標(biāo)記的抗抗體10μL
MG-132(Proteasome 抑制劑 )1mg AMV cDNA 第一鏈合成試劑盒30 次
Monensin ( 蛋白轉(zhuǎn)運(yùn)抑制劑 )100mg Aminoally-dUTP 溶液,10mM100μL
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