土壤過氧化氫酶 SCAT 紫外分光光度法

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產(chǎn)品名稱：土壤過氧化氫酶（SCAT）紫外分光光度法測試盒
規(guī)格 : 50管/24樣
測試方法: 紫外分光光度法
貨號：GOY-01S6824
分類：土壤系列
商品介紹：
S-CAT是土壤微生物代謝的重要酶類，在H2O2清除系統(tǒng)中具有重要作用。

測定原理：

H2O2在240nm下有特征吸收峰，通過測定與土壤反應(yīng)后溶液在此波長下吸光度的變化，即可反應(yīng)S-CAT活性的高低。

需自備的儀器和用品：

紫外分光光度計/酶標儀、臺式離心機、可調(diào)式移液器、1mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水
試劑的組成和配制
提取液一：液體50mL×1瓶，4℃保存。
提取液二：液體50mL×1瓶，4℃保存。
試劑一：粉劑×1瓶，-20℃保存；臨用前加入40mL試劑四充分溶解待用，用不完的試劑4℃保存；
試劑二：液體18μL×1瓶，4℃保存；臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用，用不完的試劑4℃保存；
試劑三：粉劑×1瓶，-20℃保存；臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用，用不完的試劑4℃保存；
試劑四：液體50mL×1瓶， 4℃保存；
測定步驟
1、 分光光度計預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長至340nm，蒸餾水調(diào)零。
2、 將試劑一、二、三37℃(哺乳動物)或25℃(其它物種)預(yù)熱10分鐘。
3、 加樣表：

樣本的前處理
①總FBP酶提?。航ㄗh稱取約0.1g樣本，加入1mL提取液一，冰浴勻漿后超聲破碎（冰浴，200W，破碎3s，間歇7s，總時間1min），然后4℃，8000g離心10min，取上清測定。
②胞漿和葉綠體FBP酶的分離：按照植物組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為1：5～10的比例（建議稱取約0.1g樣本，加入1mL提取液一），冰浴勻漿后于4℃，200g離心5min，棄沉淀，取上清在4℃，8000g離心10min，取上清用于測定胞漿FBP酶活性，取沉淀加1mL提取液二，震蕩溶解后超聲破碎（冰浴，200W，破碎3s，間歇7s，總時間1min），然后4℃，8000g離心10min，取上清測定葉綠體中FBP酶活性。
建議測定總FBP酶活性，按照步驟①提取粗酶液，若需要分別測定胞漿和葉綠體中的FBP，則按照步驟②提取粗酶液。
DNA 電泳分子量標準 (100-1500 bp)50 次   G 鉀鹽溶液 ,200mg/mL1 Mu

DNA 電泳分子量標準 (100-5000 bp)50 次  親和硅烷 25mL

DNA 電泳分子量標準 (300-10000 bp)50 次  親和層析柱6 mL

DNA 電泳分子量標準 (2)（50-400 bp）50 次  親和層析柱50 mL

DNA 電泳分子量標準 (2)（300-5000 bp）50 次  親和層析柱30 mL

人白細胞分離液 1.078200mL  0.5mL DNA 離心超濾管 (90-150 KD)1個

人中性粒細胞分離液 1.085200mL  0.5mL DNA 離心超濾管 (30-50 KD)1個

人粒細胞分離液 1.113200mL  0.5mL DNA 離心超濾管 (150-250 KD)1個

小鼠腫瘤細胞分離液 1.070200mL 

小鼠內(nèi)皮細胞分離液 1.071200mL
倉鼠白介素1β(IL-1β)elisa檢測試劑盒

倉鼠白介素2(IL-2)elisa分析檢測試劑盒

倉鼠白介素2(IL-2)elisa檢測試劑盒

倉鼠白介素3(IL-3)elisa分析檢測試劑盒

倉鼠白介素3(IL-3)elisa檢測試劑盒
土壤過氧化氫酶（SCAT）紫外分光光度法測試盒RNase 抑制劑 ( 人源 )400U  柱式 miRNA PAGE 膠回收試劑盒50 次

RNase 抑制劑 ( 人源 )2500U  柱式 G+細菌 RNAout50 次

RNase 抑制劑 ( 小鼠源 )3000U  柱式 DNA 清除劑50 次

RNase 抑制劑 ( 豬源 )500U  柱式 DNA 膠回收試劑盒50 次

非酶 DNA 清除劑1.5mL  柱式 DNA 膠回收試劑盒100 次
FBP活性計算：
（1）按樣本蛋白濃度計算
單位的定義：每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個酶活力單位。
FBP（nmol/min/mg prot）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
（2）按樣本鮮重計算
單位的定義：每g組織每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個酶活力單位。
FBP（nmol/min/g 鮮重）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(W ×V樣÷V樣總) ÷T=321.5×ΔA÷W
V反總：反應(yīng)體系總體積，1×10-3 L；ε：NADPH摩爾消光系數(shù)，6.22×103 L / mol /cm；d：比色皿光徑，1cm；V樣：加入樣本體積，0.1 mL；V樣總：加入提取液體積，1mL；T：反應(yīng)時間，5 min；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g。