土壤酸性磷酸酶(SACP)熒光法測試盒 返回列表頁

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商品介紹：

土壤磷酸酶是一類催化土壤有機磷化合物礦化的酶，其活性的高低直接影響著土壤中有機磷的分解轉化及其生物有效性，是評價土壤磷素生物轉化方向與強度的指標。土壤磷酸酶受到土壤碳、氮含量、有效磷含量和pH顯著影響。通常按照其最適pH范圍，分為堿性、中性和酸性三種類型磷酸酶。

測定原理：

堿性環(huán)境中，S-AKP/ALP催化磷酸苯二鈉水解生成，通過測定酚的生成量即可計算出S-AKP/ALP活性。

自備儀器和用品：

紫外分光光度計/酶標儀、微量玻璃比色皿/96孔板、臺式離心機、37℃恒溫培養(yǎng)箱、分析天平、可調式移液器、冰、蒸餾水、無水乙醇和甲苯。
測定操作表：

劑組成和配制：

提取液：液體100mL×1瓶，4℃保存。

試劑一：液體20mL×1瓶，4℃保存。

試劑二：粉劑×1瓶，4℃避光保存。臨用前加1mL蒸餾水溶解；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復凍融。

試劑三：粉劑×1瓶，4℃避光保存。臨用前加1mL蒸餾水溶解；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復凍融。

試劑四：粉劑×1瓶，4℃避光保存。臨用前加1mL蒸餾水溶解；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復凍融。

酶活性計算公式：
a. 用微量石英比色皿測定的計算公式如下
（1）按樣本蛋白濃度計算：
酶活性定義：在pH7.2，溫度為37℃條件下，每毫克組織蛋白每分鐘催化產生1nmol H2O2所需的酶量為一個酶活力單位（U）。
DAO活性（nmol/min/mg prot）= ×V反總÷（V樣×Cpr）÷T= 18×A460÷Cpr
（2）按樣本質量計算：
酶活性定義：在pH7.2，溫度為37℃條件下，每克組織每分鐘催化產生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個酶活力單位。
DAO活性（nmol/min/g鮮重）= ×V反總÷（V樣÷V樣總×W）÷T= 18×A460÷W
（3）按細胞數量計算：
酶活性定義：在pH7.2，溫度為37℃條件下，每104個細胞每分鐘催化產生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個酶活力單位。
DAO活性（nmol/min/104cell）= ×V反總÷（V樣÷V樣總×細胞數量）÷T= 18×A460÷細胞數量
(4) 按液體體積計算
酶活性定義：在pH7.2，溫度為37℃條件下，每毫升血清每分鐘催化產生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個酶活力單位。
DAO活性（nmol/min/mL）= ×V反總÷V樣÷T= 18×A460
ε：氧化型鄰聯(lián)茴香胺毫摩爾消光系數：7.5L/mmol/cm；d：比色皿光徑，1cm；V反總：反應總體積，0.2mL；V樣：反應中樣本體積，0.05mL；V樣總：加入提取液體積，1mL；Cpr：樣本蛋白濃度，mg/mL；W：樣本質量，g；T：反應時間，30min
b. 用96孔板測定的計算公式如下
（1）按樣本蛋白濃度計算：
酶活性定義：在pH7.2，溫度為37℃條件下，每毫克組織蛋白每分鐘催化產生1nmol H2O2所需的酶量為一個酶活力單位（U）。
DAO活性（nmol/min/mg prot）= ×V反總÷（V樣×Cpr）÷T= 36×A460÷Cpr
（2）按樣本質量計算：
酶活性定義：在pH7.2，溫度為37℃條件下，每克組織每分鐘催化產生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個酶活力單位。
DAO活性（nmol/min/g 鮮重）= ×V反總÷（V樣÷V樣總×W）÷T= 36×A460÷W
（3）按細胞數量計算：
酶活性定義：在pH7.2，溫度為37℃條件下，每104個細胞每分鐘催化產生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個酶活力單位。
0酸化自噬相關蛋白4C抗體     轉移生長因子β受體3抗體（TGF-βRⅢ，TGFβRⅢ）

自噬相關蛋白16A抗體     轉移生長因子β受體2抗體（TGF-βRⅡ，TGFβRⅡ）

0酸化自噬相關蛋白4D抗體     轉移生長因子β受體1抗體（TGF-βRⅠ，TGFβRⅠ）

0酸化自噬相關蛋白4A抗體     轉移生長因子β5抗體

0酸化自噬相關蛋白7抗體     轉移生長因子β3抗體（TGFβ3）
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