氨基比林N去甲基化酶（AND）可見分光光度

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產(chǎn)品名稱：氨基比林N去甲基化酶（AND）可見分光光度法測試盒
規(guī)格 : 50管/24樣
測試方法: 可見分光光度法
貨號：GOY-01S6779
分類：P454系列
商品介紹：
細胞色素P450酶是一組在外源物質代謝中，尤其是藥物和毒物，具有重要作用的酶系。AND作為P450酶系的重要一員，相當于CYP3A4亞型，與藥物的去甲基化反應密切相關。

測定原理：

AND催化氨基比林釋放甲醛，通過Nash比色法測定甲醛含量，即可計算出AND活性。

自備儀器和用品：

普通離心機，超速離心機、水浴鍋、可調式移液槍、紫外分光光度計/酶標儀、1 mL玻璃比色皿/96孔板、蒸餾水、無水乙醇和冰。
試劑的組成和配制
提取液一：液體50mL×1瓶，4℃保存。
提取液二：液體50mL×1瓶，4℃保存。
試劑一：粉劑×1瓶，-20℃保存；臨用前加入40mL試劑四充分溶解待用，用不完的試劑4℃保存；
試劑二：液體18μL×1瓶，4℃保存；臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用，用不完的試劑4℃保存；
試劑三：粉劑×1瓶，-20℃保存；臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用，用不完的試劑4℃保存；
試劑四：液體50mL×1瓶， 4℃保存；
測定步驟
1、 分光光度計預熱30min以上，調節(jié)波長至340nm，蒸餾水調零。
2、 將試劑一、二、三37℃(哺乳動物)或25℃(其它物種)預熱10分鐘。
3、 加樣表：

樣本的前處理
①總FBP酶提取：建議稱取約0.1g樣本，加入1mL提取液一，冰浴勻漿后超聲破碎（冰浴，200W，破碎3s，間歇7s，總時間1min），然后4℃，8000g離心10min，取上清測定。
②胞漿和葉綠體FBP酶的分離：按照植物組織質量（g）：提取液體積(mL)為1：5～10的比例（建議稱取約0.1g樣本，加入1mL提取液一），冰浴勻漿后于4℃，200g離心5min，棄沉淀，取上清在4℃，8000g離心10min，取上清用于測定胞漿FBP酶活性，取沉淀加1mL提取液二，震蕩溶解后超聲破碎（冰浴，200W，破碎3s，間歇7s，總時間1min），然后4℃，8000g離心10min，取上清測定葉綠體中FBP酶活性。
建議測定總FBP酶活性，按照步驟①提取粗酶液，若需要分別測定胞漿和葉綠體中的FBP，則按照步驟②提取粗酶液。
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氨基比林N去甲基化酶（AND）可見分光光度法測試盒暗盒 (5×7 英寸 )1個  素溶液 ,100mg/mL10mL

暗盒 (8×10 英寸 )1個  黑色素細胞生長因子5mL

DNA 包被溶液100mL  黑色素細胞生長因子 - 不含 TPA5mL

X 光片 (5×7 英寸 )1盒  核酸印跡膜染液100mL

X 光片 (8×10 英寸 )1盒  核酸稀釋液，測 OD 專用100mL
FBP活性計算：
（1）按樣本蛋白濃度計算
單位的定義：每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個酶活力單位。
FBP（nmol/min/mg prot）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
（2）按樣本鮮重計算
單位的定義：每g組織每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個酶活力單位。
FBP（nmol/min/g 鮮重）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(W ×V樣÷V樣總) ÷T=321.5×ΔA÷W
V反總：反應體系總體積，1×10-3 L；ε：NADPH摩爾消光系數(shù)，6.22×103 L / mol /cm；d：比色皿光徑，1cm；V樣：加入樣本體積，0.1 mL；V樣總：加入提取液體積，1mL；T：反應時間，5 min；Cpr：樣本蛋白質濃度，mg/mL；W：樣本質量，g。