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α葡萄糖苷酶(α GC)微量法測試盒

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更新時間:2022-03-15 09:41:58瀏覽次數(shù):307

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 100管/48樣
貨號 GOY-01S6736 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅用于科研    
α葡萄糖苷酶(α GC)微量法測試盒公司各類熱銷產(chǎn)品大鼠白介素10(IL10)elisa檢測試劑盒
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詳細(xì)介紹

產(chǎn)品名稱:α葡萄糖苷酶(α  GC)微量法測試盒
規(guī)格100/48
測試方法微量法
貨號:GOY-01S6736
分類:糖代謝系列
商品介紹:
α-GC(EC 3.2.1.20)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,催化水解芳基或烴基與糖基之間的α-糖苷鍵生成葡萄糖,不僅與細(xì)胞壁的松弛或加固有關(guān),而且與細(xì)胞識別和一些信號分子產(chǎn)生密切相關(guān)。

測定原理:

α-GC分解對-硝基苯-α-D吡喃葡萄糖苷生成對-硝基苯酚,后者在400nm有最大吸收峰,通過測定吸光值升高速率來計算α-GC活性。

自備用品:

可見分光光度計/酶標(biāo)儀、臺式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
試劑的組成和配制
提取液一:液體50mL×1瓶,4保存。
提取液二:液體50mL×1瓶,4保存。
試劑一:粉劑×1瓶,-20保存;臨用前加入40mL試劑四充分溶解待用,用不完的試劑4保存;
試劑二:液體18μL×1瓶,4保存;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑4保存;
試劑三:粉劑×1瓶,-20保存;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑4保存;
試劑四:液體50mL×1瓶, 4保存;
測定步驟
1
、 分光光度計預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至340nm,蒸餾水調(diào)零。
2
、 將試劑一、二、三37(哺乳動物)25(其它物種)預(yù)熱10分鐘。
3
、 加樣表:

圖1.jpg

樣本的前處理
FBP酶提?。航ㄗh稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液一,冰浴勻漿后超聲破碎(冰浴,200W,破碎3s,間歇7s,總時間1min),然后4,8000g離心10min,取上清測定。
胞漿和葉綠體FBP酶的分離:按照植物組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)1510的比例(建議稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液一),冰浴勻漿后于4200g離心5min,棄沉淀,取上清在4,8000g離心10min,取上清用于測定胞漿FBP酶活性,取沉淀加1mL提取液二,震蕩溶解后超聲破碎(冰浴,200W,破碎3s,間歇7s,總時間1min),然后4,8000g離心10min,取上清測定葉綠體中FBP酶活性。
建議測定總FBP酶活性,按照步驟提取粗酶液,若需要分別測定胞漿和葉綠體中的FBP,則按照步驟提取粗酶液。
FBP活性計算:
1)按樣本蛋白濃度計算
單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmolNADPH定義為一個酶活力單位。
FBP
nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反總÷ε×d×109]÷(V×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
2)按樣本鮮重計算
單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmolNADPH定義為一個酶活力單位。
FBP
nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V反總÷ε×d×109]÷(W ×V÷V樣總) ÷T=321.5×ΔA÷W
V
反總:反應(yīng)體系總體積,1×10-3 L;εNADPH摩爾消光系數(shù),6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體積,0.1 mLV樣總:加入提取液體積,1mL;T:反應(yīng)時間,5 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mLW:樣本質(zhì)量,g
信號淋巴細(xì)胞活化分子CD150抗體     上皮細(xì)胞有絲分裂蛋白抗體

巨噬細(xì)胞炎性蛋白16抗體     上皮細(xì)胞微管相關(guān)蛋白7抗體

果蠅CG6856-PA抗體     上皮細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)錄因子1抗體

氧化酶COX7A2抗體     上皮細(xì)胞特異性蛋白1抗體

剪切和多聚腺苷酸化特異性因子4抗體     上皮細(xì)胞膜蛋白3抗體
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