詳細介紹
【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,請仔細閱讀購買說明!
產(chǎn)品名稱:總膽固醇(TC)可見分光光度法測試盒
規(guī)格 : 50管/48樣
測試方法: 可見分光光度法
貨號:GOY-01S6643
分類:脂肪酸代謝系列
商品介紹:
血清TC是指血液中所有脂蛋白所含膽固醇之總和。總膽固醇包括游離膽固醇和膽固醇酯。肝臟是TC合成和貯存的主要器官。膽固醇是合成腎上腺皮質(zhì)激素、性激素、膽汁酸等生理活性物質(zhì)的重要原料,也是構(gòu)成細胞膜的主要成分,其血清濃度可作為脂代謝的指標。臨床上將血總膽固醇增高稱為高膽固醇血癥。
測定原理
酯酶催化膽固醇酯作用下水解成游離膽固醇(FC)和游離脂肪酸(FFA),FC在膽固醇氧化酶作用下生成△4-膽甾烯酮和H2O2,H2O2在4-氨基安替比林和酚存在下,經(jīng)過氧化物酶作用下生成紅色醌類化合物,其顏色深淺與TC含量成正比
自備用品
可見分光光度計、水浴鍋、可調(diào)式移液槍、1ml玻璃比色皿、雙蒸水
試劑的組成和配制
提取液一:液體50mL×1瓶,4℃保存。
提取液二:液體50mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:粉劑×1瓶,-20℃保存;臨用前加入40mL試劑四充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑二:液體18μL×1瓶,4℃保存;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑三:粉劑×1瓶,-20℃保存;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑四:液體50mL×1瓶, 4℃保存;
測定步驟
1、 分光光度計預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至340nm,蒸餾水調(diào)零。
2、 將試劑一、二、三37℃(哺乳動物)或25℃(其它物種)預(yù)熱10分鐘。
3、 加樣表:
樣本的前處理
①總FBP酶提?。航ㄗh稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液一,冰浴勻漿后超聲破碎(冰浴,200W,破碎3s,間歇7s,總時間1min),然后4℃,8000g離心10min,取上清測定。
②胞漿和葉綠體FBP酶的分離:按照植物組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液一),冰浴勻漿后于4℃,200g離心5min,棄沉淀,取上清在4℃,8000g離心10min,取上清用于測定胞漿FBP酶活性,取沉淀加1mL提取液二,震蕩溶解后超聲破碎(冰浴,200W,破碎3s,間歇7s,總時間1min),然后4℃,8000g離心10min,取上清測定葉綠體中FBP酶活性。
建議測定總FBP酶活性,按照步驟①提取粗酶液,若需要分別測定胞漿和葉綠體中的FBP,則按照步驟②提取粗酶液。
神經(jīng)細胞蠟樣質(zhì)脂褐質(zhì)沉積病蛋白CLN3抗體 胃泌素/蛙皮素抗體
趨化素樣因子超家族成員3抗體 胃動素受體抗體
染色質(zhì)修飾蛋白1B抗體 胃動素抗體
冷誘導(dǎo)RNA結(jié)合蛋白抗體 胃蛋白酶原C抗體
細胞連接相關(guān)蛋白1抗體 胃腸道相關(guān)激酶抗體(蛋白激酶5)
大鼠三碘甲腺原氨酸(TT3)elisa檢測試劑盒
大鼠三碘甲腺原氨酸(TT3)elisa檢測試劑盒
大鼠三碘甲狀腺原氨酸(T3)elisa檢測試劑盒
大鼠三磷酸肌醇(IP3)elisa檢測試劑盒
大鼠三磷酸腺苷(ATP)elisa檢測試劑盒
總膽固醇(TC)可見分光光度法測試盒大提柱式植物 RNAout5次 柱式細菌 RNAout50 次
柱式植物 RNA-DNA 雙提試劑盒50 次 柱式細菌 RNA-DNA 雙提試劑盒50 次
柱式藻類 RNAout50 次 柱式細菌 DNAout50 次
大提柱式藻類 RNAout5次 柱式細菌 DNAout( 含 )50 次
土壤 RNAout50 次 柱式無內(nèi)毒素質(zhì)粒 DNAout50 次
FBP活性計算:
(1)按樣本蛋白濃度計算
單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個酶活力單位。
FBP(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
(2)按樣本鮮重計算
單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個酶活力單位。
FBP(nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W ×V樣÷V樣總) ÷T=321.5×ΔA÷W
V反總:反應(yīng)體系總體積,1×10-3 L;ε:NADPH摩爾消光系數(shù),6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體積,0.1 mL;V樣總:加入提取液體積,1mL;T:反應(yīng)時間,5 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g。