詳細(xì)介紹
商品介紹:
磷脂酶C(EC 3.1.4.3)是一種水解甘油磷酸酯C3位點(diǎn)甘油磷酸酯鍵的脂類水解酶,廣泛存在于微生物及動(dòng)植物的組織和細(xì)胞中,在細(xì)胞代謝、細(xì)胞傳遞、生長(zhǎng)發(fā)育等方面具有重要作用。
測(cè)定原理
磷脂酶C催化水解NPPC產(chǎn)生對(duì)硝基苯酚,在410nm處有特征吸收峰。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器
天平、研缽、超速冷凍離心機(jī)、可見分光光度計(jì)、1 mL玻璃比色皿、恒溫水浴鍋。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 測(cè)試方法 | 貨號(hào) |
磷脂酶C(PLC)可見分光光度法測(cè)試盒 | 50管/48樣 | 可見分光光度法 | GOY-01S6651 |
劑組成和配制:
提取液:液體100mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:液體20mL×1瓶,4℃保存。
試劑二:粉劑×1瓶,4℃避光保存。臨用前加1mL蒸餾水溶解;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融。
試劑三:粉劑×1瓶,4℃避光保存。臨用前加1mL蒸餾水溶解;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融。
試劑四:粉劑×1瓶,4℃避光保存。臨用前加1mL蒸餾水溶解;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融。
測(cè)定操作表:
酶活性計(jì)算公式:
a. 用微量石英比色皿測(cè)定的計(jì)算公式如下
(1)按樣本蛋白濃度計(jì)算:
酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每毫克組織蛋白每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量為一個(gè)酶活力單位(U)。
DAO活性(nmol/min/mg prot)= ×V反總÷(V樣×Cpr)÷T= 18×A460÷Cpr
(2)按樣本質(zhì)量計(jì)算:
酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每克組織每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個(gè)酶活力單位。
DAO活性(nmol/min/g 鮮重)= ×V反總÷(V樣÷V樣總×W)÷T= 18×A460÷W
(3)按細(xì)胞數(shù)量計(jì)算:
酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每104個(gè)細(xì)胞每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個(gè)酶活力單位。
DAO活性(nmol/min/104cell)= ×V反總÷(V樣÷V樣總×細(xì)胞數(shù)量)÷T= 18×A460÷細(xì)胞數(shù)量
(4) 按液體體積計(jì)算
酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每毫升血清每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個(gè)酶活力單位。
DAO活性(nmol/min/mL)= ×V反總÷V樣÷T= 18×A460
ε:氧化型鄰聯(lián)茴香胺毫摩爾消光系數(shù):7.5 L/mmol/cm;d:比色皿光徑,1cm;V反總:反應(yīng)總體積,0.2mL;V樣:反應(yīng)中樣本體積,0.05mL;V樣總:加入提取液體積,1mL;Cpr:樣本蛋白濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g;T:反應(yīng)時(shí)間,30min
b. 用96孔板測(cè)定的計(jì)算公式如下
(1)按樣本蛋白濃度計(jì)算:
酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每毫克組織蛋白每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量為一個(gè)酶活力單位(U)。
DAO活性(nmol/min/mg prot)= ×V反總÷(V樣×Cpr)÷T= 36×A460÷Cpr
(2)按樣本質(zhì)量計(jì)算:
酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每克組織每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個(gè)酶活力單位。
DAO活性(nmol/min/g 鮮重)= ×V反總÷(V樣÷V樣總×W)÷T= 36×A460÷W
(3)按細(xì)胞數(shù)量計(jì)算:
酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每104個(gè)細(xì)胞每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個(gè)酶活力單位。
暗盒 (5×7 英寸 )1個(gè) 素溶液 ,100mg/mL10mL
暗盒 (8×10 英寸 )1個(gè) 黑色素細(xì)胞生長(zhǎng)因子5mL
DNA 包被溶液100mL 黑色素細(xì)胞生長(zhǎng)因子 - 不含 TPA5mL
X 光片 (5×7 英寸 )1盒 核酸印跡膜染液100mL
X 光片 (8×10 英寸 )1盒 核酸稀釋液,測(cè) OD 專用100mL
高 GC DNA 清除劑,PCR 級(jí)1.5mL 硅膠膜 DNA 離心吸附柱 ( 大提 )1套
MnCl2溶液,25mM,PCR 級(jí)5mL 硅基磁珠2mL
甲酰胺,PCR 級(jí)5mL 固相內(nèi)毒素清除劑500g
MgSO4溶液,10mM,PCR 級(jí)5mL 固相內(nèi)毒素清除劑100g
石蠟油,PCR 級(jí)10mL 固相 RNase 清除劑250mL
大鼠3-O-甲基多巴(3-OMD)elisa分析檢測(cè)試劑盒
大鼠3-O-甲基多巴(3-OMD)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠3-羥基3-甲基戊二酰A還原酶(HMGCR)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠3-羥基-3-甲基戊二酰A合酶(HMGCS)elisa分析檢測(cè)試劑盒
大鼠3-羥基-3-甲基戊二酰A合酶(HMGCS)elisa檢測(cè)試劑盒
磷脂酶C(PLC)可見分光光度法測(cè)試盒大片段 DNA 分子量標(biāo)準(zhǔn)50μg 凝固血液 DNAout30 次
脈沖電泳 Marker( 酵母染色體 PFG)50 次 凝固血液 DNAout100 次
脈沖電泳 Marker(Lambda LadderPFG)50 次 鎳柱介質(zhì)2mL
脈沖電泳 Marker( 低范圍 PFG)50 次 鎳柱介質(zhì)10mL
超螺旋 DNA 分子量標(biāo)準(zhǔn)100uL 尿道上皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子5mL
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