堿性蛋白酶可見分光光度法測(cè)試盒

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產(chǎn)品名稱：堿性蛋白酶可見分光光度法測(cè)試盒
規(guī)格 : 50管/24樣
測(cè)試方法: 可見分光光度法
貨號(hào)：GOY-01S6623
分類：蛋白酶系列
商品介紹：
AKP是指在堿性條件下催化蛋白質(zhì)肽鍵水解的酶類，屬于絲氨酸蛋白酶。此外，該酶還能夠水解酯鍵、酰胺鍵，具有轉(zhuǎn)酯及轉(zhuǎn)肽的功能。該酶是主要工業(yè)用酶之一，廣泛應(yīng)用于制藥、絲綢、食品、制革等行業(yè)。

測(cè)定原理：

在堿性條件下，AKP水解酪蛋白生成酪氨酸；在堿性條件下，酪氨酸還原磷鉬酸生成鎢藍(lán)；鎢藍(lán)在680nm有特征吸收峰，測(cè)定680nm吸光度增加速率，來計(jì)算AKP活性。

自備儀器和用品：

可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量玻璃比色皿/96孔板、水浴鍋、磁力攪拌器、可調(diào)式移液槍、0.5 mL EP管和蒸餾水。
試劑的組成和配制
提取液一：液體50mL×1瓶，4℃保存。
提取液二：液體50mL×1瓶，4℃保存。
試劑一：粉劑×1瓶，-20℃保存；臨用前加入40mL試劑四充分溶解待用，用不完的試劑4℃保存；
試劑二：液體18μL×1瓶，4℃保存；臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用，用不完的試劑4℃保存；
試劑三：粉劑×1瓶，-20℃保存；臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用，用不完的試劑4℃保存；
試劑四：液體50mL×1瓶， 4℃保存；
測(cè)定步驟
1、 分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至340nm，蒸餾水調(diào)零。
2、 將試劑一、二、三37℃(哺乳動(dòng)物)或25℃(其它物種)預(yù)熱10分鐘。
3、 加樣表：

樣本的前處理
①總FBP酶提?。航ㄗh稱取約0.1g樣本，加入1mL提取液一，冰浴勻漿后超聲破碎（冰浴，200W，破碎3s，間歇7s，總時(shí)間1min），然后4℃，8000g離心10min，取上清測(cè)定。
②胞漿和葉綠體FBP酶的分離：按照植物組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為1：5～10的比例（建議稱取約0.1g樣本，加入1mL提取液一），冰浴勻漿后于4℃，200g離心5min，棄沉淀，取上清在4℃，8000g離心10min，取上清用于測(cè)定胞漿FBP酶活性，取沉淀加1mL提取液二，震蕩溶解后超聲破碎（冰浴，200W，破碎3s，間歇7s，總時(shí)間1min），然后4℃，8000g離心10min，取上清測(cè)定葉綠體中FBP酶活性。
建議測(cè)定總FBP酶活性，按照步驟①提取粗酶液，若需要分別測(cè)定胞漿和葉綠體中的FBP，則按照步驟②提取粗酶液。
0酸化驅(qū)動(dòng)蛋白樣蛋白1抗體     內(nèi)皮細(xì)胞纖溶酶原激活抑制蛋白1抗體

EB病毒核抗原-3B抗體     內(nèi)皮細(xì)胞特異性分子1抗體

內(nèi)皮素B受體抗體     內(nèi)皮細(xì)胞受體蛋白激酶抗體

附睪蛋白酶抑制蛋白     內(nèi)皮細(xì)胞受體蛋白激酶B3抗體

外生性骨疣樣蛋白2抗體     內(nèi)皮細(xì)胞受體蛋白激酶A抗體（腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)蛋白4）
活性氧檢測(cè)試劑盒DCFHDA200T

肌氨酸氧化酶 10 KU/瓶

肌鈣蛋白cTnl試劑盒 R1：30ml×1 R2：10ml×1 膠乳增強(qiáng)

肌酐Cr測(cè)試盒化學(xué)法，除蛋白 100管/96樣 比色法

肌酐Cr測(cè)試盒肌氨酸氧化酶法 96T 微板法
堿性蛋白酶可見分光光度法測(cè)試盒地霉屬   雪白根霉

戊糖乳桿菌   絲球毛霉

光滑念珠菌KTCC0001凍干粉   巧克力微桿菌

頭狀絲孢酵母   卷枝毛霉

抗輻射鏈霉菌   沙保羅瓊脂平板70mm
FBP活性計(jì)算：
（1）按樣本蛋白濃度計(jì)算
單位的定義：每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個(gè)酶活力單位。
FBP（nmol/min/mg prot）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
（2）按樣本鮮重計(jì)算
單位的定義：每g組織每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個(gè)酶活力單位。
FBP（nmol/min/g 鮮重）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(W ×V樣÷V樣總) ÷T=321.5×ΔA÷W
V反總：反應(yīng)體系總體積，1×10-3 L；ε：NADPH摩爾消光系數(shù)，6.22×103 L / mol /cm；d：比色皿光徑，1cm；V樣：加入樣本體積，0.1 mL；V樣總：加入提取液體積，1mL；T：反應(yīng)時(shí)間，5 min；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g。