詳細介紹
商品介紹:
AKP是指在堿性條件下催化蛋白質(zhì)肽鍵水解的酶類,屬于絲氨酸蛋白酶。此外,該酶還能夠水解酯鍵、酰胺鍵,具有轉(zhuǎn)酯及轉(zhuǎn)肽的功能。該酶是主要工業(yè)用酶之一,廣泛應用于制藥、絲綢、食品、制革等行業(yè)。
測定原理:
在堿性條件下,AKP水解酪蛋白生成酪氨酸;在堿性條件下,酪氨酸還原磷鉬酸生成鎢藍;鎢藍在680nm有特征吸收峰,測定680nm吸光度增加速率,來計算AKP活性。
自備儀器和用品:
可見分光光度計/酶標儀、微量玻璃比色皿/96孔板、水浴鍋、磁力攪拌器、可調(diào)式移液槍、0.5 mL EP管和蒸餾水。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 測試方法 | 貨號 |
堿性蛋白酶微量法測試盒 | 100管/48樣 | 微量法 | GOY-01S6622 |
劑組成和配制:
提取液:液體100mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:液體20mL×1瓶,4℃保存。
試劑二:粉劑×1瓶,4℃避光保存。臨用前加1mL蒸餾水溶解;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復凍融。
試劑三:粉劑×1瓶,4℃避光保存。臨用前加1mL蒸餾水溶解;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復凍融。
試劑四:粉劑×1瓶,4℃避光保存。臨用前加1mL蒸餾水溶解;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復凍融。
測定操作表:
酶活性計算公式:
a. 用微量石英比色皿測定的計算公式如下
(1)按樣本蛋白濃度計算:
酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每毫克組織蛋白每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量為一個酶活力單位(U)。
DAO活性(nmol/min/mg prot)= ×V反總÷(V樣×Cpr)÷T= 18×A460÷Cpr
(2)按樣本質(zhì)量計算:
酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每克組織每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個酶活力單位。
DAO活性(nmol/min/g 鮮重)= ×V反總÷(V樣÷V樣總×W)÷T= 18×A460÷W
(3)按細胞數(shù)量計算:
酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每104個細胞每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個酶活力單位。
DAO活性(nmol/min/104cell)= ×V反總÷(V樣÷V樣總×細胞數(shù)量)÷T= 18×A460÷細胞數(shù)量
(4) 按液體體積計算
酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每毫升血清每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個酶活力單位。
DAO活性(nmol/min/mL)= ×V反總÷V樣÷T= 18×A460
ε:氧化型鄰聯(lián)茴香胺毫摩爾消光系數(shù):7.5 L/mmol/cm;d:比色皿光徑,1cm;V反總:反應總體積,0.2mL;V樣:反應中樣本體積,0.05mL;V樣總:加入提取液體積,1mL;Cpr:樣本蛋白濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g;T:反應時間,30min
b. 用96孔板測定的計算公式如下
(1)按樣本蛋白濃度計算:
酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每毫克組織蛋白每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量為一個酶活力單位(U)。
DAO活性(nmol/min/mg prot)= ×V反總÷(V樣×Cpr)÷T= 36×A460÷Cpr
(2)按樣本質(zhì)量計算:
酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每克組織每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個酶活力單位。
DAO活性(nmol/min/g 鮮重)= ×V反總÷(V樣÷V樣總×W)÷T= 36×A460÷W
(3)按細胞數(shù)量計算:
酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每104個細胞每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個酶活力單位。
烯脂酰A水解酶抗體 內(nèi)皮細胞受體蛋白激酶A2+A3+A4抗體
三羥酰A脫氫酶抗體 內(nèi)皮細胞凝集素HL1抗體
泛素交聯(lián)酶抗體 內(nèi)皮細胞活化蛋白受體抗體
內(nèi)皮細胞特異性分子1抗體 內(nèi)皮細胞和平滑肌細胞衍生的神經(jīng)纖毛蛋白抗體
真核翻譯起始因子3F抗體 內(nèi)皮細胞分化鞘脂G蛋白偶聯(lián)受體1抗體
肌酐酶 10 KU/瓶
肌紅蛋白Mb試劑盒 R1:30ml×1 R2:10ml×1 膠乳增強
肌酸激酶CK測試盒 50管/24樣 比色法
肌酸激酶MB同工酶CK-MB試劑盒 R1:40ml×1 免疫抑制法
肌酸激酶測試盒
堿性蛋白酶微量法測試盒地生翅孢殼 貝雷絲孢酵母
生孢梭菌凍干粉 平展米曲霉(米曲霉平展變種)
放射性根瘤菌 科恩根霉
腸膜明串珠菌 戴爾根霉
球孢鏈霉菌 日本根霉
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