檸檬酸（CA）可見(jiàn)分光光度法測(cè)試盒

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產(chǎn)品名稱：檸檬酸（CA）可見(jiàn)分光光度法測(cè)試盒
規(guī)格 : 50管/48樣
測(cè)試方法: 可見(jiàn)分光光度法
貨號(hào)：GOY-01S6569
分類：三羧酸循環(huán)系列
商品介紹：
CA又稱枸櫞酸，廣泛存在于各種生物胞質(zhì)中，是生物體內(nèi)重要的有機(jī)酸。CA也存在于線粒體基質(zhì)中，是三羧酸循環(huán)第一步反應(yīng)的產(chǎn)物，與脂肪、蛋白質(zhì)和糖最終轉(zhuǎn)化為二氧化碳密切相關(guān)。

測(cè)定原理

酸性條件下，檸檬酸可將Cr6+還原成Cr3+，在545nm處有特征吸收峰；通過(guò)測(cè)定545nm吸光值的增加，即可計(jì)算出樣品中檸檬酸含量。

實(shí)驗(yàn)中所需儀器及設(shè)備

可見(jiàn)分光光度計(jì)、低溫離心機(jī)、掌上離心機(jī)、可調(diào)式移液槍、1ml玻璃比色皿、雙蒸水
試劑的組成和配制
提取液一：液體50mL×1瓶，4℃保存。
提取液二：液體50mL×1瓶，4℃保存。
試劑一：粉劑×1瓶，-20℃保存；臨用前加入40mL試劑四充分溶解待用，用不完的試劑4℃保存；
試劑二：液體18μL×1瓶，4℃保存；臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用，用不完的試劑4℃保存；
試劑三：粉劑×1瓶，-20℃保存；臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用，用不完的試劑4℃保存；
試劑四：液體50mL×1瓶， 4℃保存；
測(cè)定步驟
1、 分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至340nm，蒸餾水調(diào)零。
2、 將試劑一、二、三37℃(哺乳動(dòng)物)或25℃(其它物種)預(yù)熱10分鐘。
3、 加樣表：

樣本的前處理
①總FBP酶提取：建議稱取約0.1g樣本，加入1mL提取液一，冰浴勻漿后超聲破碎（冰浴，200W，破碎3s，間歇7s，總時(shí)間1min），然后4℃，8000g離心10min，取上清測(cè)定。
②胞漿和葉綠體FBP酶的分離：按照植物組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為1：5～10的比例（建議稱取約0.1g樣本，加入1mL提取液一），冰浴勻漿后于4℃，200g離心5min，棄沉淀，取上清在4℃，8000g離心10min，取上清用于測(cè)定胞漿FBP酶活性，取沉淀加1mL提取液二，震蕩溶解后超聲破碎（冰浴，200W，破碎3s，間歇7s，總時(shí)間1min），然后4℃，8000g離心10min，取上清測(cè)定葉綠體中FBP酶活性。
建議測(cè)定總FBP酶活性，按照步驟①提取粗酶液，若需要分別測(cè)定胞漿和葉綠體中的FBP，則按照步驟②提取粗酶液。
前列腺素E受體3抗體     錨蛋白重復(fù)域28抗體

埃茲蛋白抗體     錨蛋白重復(fù)序列-細(xì)胞因子信號(hào)抑制物盒蛋白家族3抗體

轉(zhuǎn)錄因子E2F-4抗體     錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白9抗體

細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子ELK1抗體     錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白50抗體

內(nèi)皮素-1單克隆抗體     錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白42抗體
錦葵色素-O-葡萄糖苷含量測(cè)試盒

進(jìn)行凝集（aggregation）采用典型的夾心法酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定。所提供的elisa檢測(cè)試劑盒是典型的夾心法酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定elisa檢測(cè)試劑盒（ELISA）。預(yù)先包被的抗體為多克隆抗體。檢測(cè)相抗體也為多克隆抗體，經(jīng)（biotin）標(biāo)記。樣品和標(biāo)記抗體先后加入酶標(biāo)板孔反應(yīng)后，PBS或TBS洗滌。隨后加入過(guò)氧化物酶標(biāo)記的親和素反應(yīng)；經(jīng)過(guò)PBS或TBS的*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測(cè)因
檸檬酸（CA）可見(jiàn)分光光度法測(cè)試盒發(fā)酵性酵母   草菇

天藍(lán)色鏈霉菌   福氏志賀氏菌

田菁根瘤菌   杜鵑盤(pán)多毛孢霉 Pestalotia rhododendri

木醋桿菌   石刁柏(蘆筍)擬莖點(diǎn)霉 Phomopsis asparagi

肺炎鏈球菌ATCC49619凍干粉   煙草疫霉* Phytophthora nicotianae
FBP活性計(jì)算：
（1）按樣本蛋白濃度計(jì)算
單位的定義：每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個(gè)酶活力單位。
FBP（nmol/min/mg prot）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
（2）按樣本鮮重計(jì)算
單位的定義：每g組織每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個(gè)酶活力單位。
FBP（nmol/min/g 鮮重）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(W ×V樣÷V樣總) ÷T=321.5×ΔA÷W
V反總：反應(yīng)體系總體積，1×10-3 L；ε：NADPH摩爾消光系數(shù)，6.22×103 L / mol /cm；d：比色皿光徑，1cm；V樣：加入樣本體積，0.1 mL；V樣總：加入提取液體積，1mL；T：反應(yīng)時(shí)間，5 min；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g。