羥脯氨酸（HYP）可見分光光度法測試盒 返回列表頁

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商品介紹：
HYP是機(jī)體膠原蛋白主要成分之一，膠原蛋白大多分布于皮膚、腱、軟骨和血管等，因此HYP含量是反映膠原組織代謝及纖維化程度的一項(xiàng)重要指標(biāo)。

測定原理

樣品經(jīng)酸水解產(chǎn)生游離的HYP，進(jìn)一步被氯胺T氧化，氧化產(chǎn)物與對二甲氨基反應(yīng)，產(chǎn)生紅色化合物，在560nm處有特征吸收峰。通過測定樣品水解液560nm吸光

值，可計算HYP含量。

自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器

天平、烘箱、玻璃管、離心機(jī)、水浴鍋、可見分光光度計、1 mL玻璃比色皿、6mol/L鹽酸和蒸餾水。
測定操作表：

劑組成和配制：
提取液：液體100mL×1瓶，4℃保存。
試劑一：液體20mL×1瓶，4℃保存。
試劑二：粉劑×1瓶，4℃避光保存。臨用前加1mL蒸餾水溶解；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復(fù)凍融。
試劑三：粉劑×1瓶，4℃避光保存。臨用前加1mL蒸餾水溶解；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復(fù)凍融。
試劑四：粉劑×1瓶，4℃避光保存。臨用前加1mL蒸餾水溶解；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復(fù)凍融。
酶活性計算公式：
a. 用微量石英比色皿測定的計算公式如下
（1）按樣本蛋白濃度計算：
酶活性定義：在pH7.2，溫度為37℃條件下，每毫克組織蛋白每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量為一個酶活力單位（U）。
DAO活性（nmol/min/mg prot）= ×V反總÷（V樣×Cpr）÷T= 18×A460÷Cpr
（2）按樣本質(zhì)量計算：
酶活性定義：在pH7.2，溫度為37℃條件下，每克組織每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個酶活力單位。
DAO活性（nmol/min/g 鮮重）= ×V反總÷（V樣÷V樣總×W）÷T= 18×A460÷W
（3）按細(xì)胞數(shù)量計算：
酶活性定義：在pH7.2，溫度為37℃條件下，每104個細(xì)胞每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個酶活力單位。
DAO活性（nmol/min/104cell）= ×V反總÷（V樣÷V樣總×細(xì)胞數(shù)量）÷T= 18×A460÷細(xì)胞數(shù)量
(4) 按液體體積計算
酶活性定義：在pH7.2，溫度為37℃條件下，每毫升血清每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個酶活力單位。
DAO活性（nmol/min/mL）= ×V反總÷V樣÷T= 18×A460
ε：氧化型鄰聯(lián)茴香胺毫摩爾消光系數(shù)：7.5 L/mmol/cm；d：比色皿光徑，1cm；V反總：反應(yīng)總體積，0.2mL；V樣：反應(yīng)中樣本體積，0.05mL；V樣總：加入提取液體積，1mL；Cpr：樣本蛋白濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g；T：反應(yīng)時間，30min
b. 用96孔板測定的計算公式如下
（1）按樣本蛋白濃度計算：
酶活性定義：在pH7.2，溫度為37℃條件下，每毫克組織蛋白每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量為一個酶活力單位（U）。
DAO活性（nmol/min/mg prot）= ×V反總÷（V樣×Cpr）÷T= 36×A460÷Cpr
（2）按樣本質(zhì)量計算：
酶活性定義：在pH7.2，溫度為37℃條件下，每克組織每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個酶活力單位。
DAO活性（nmol/min/g 鮮重）= ×V反總÷（V樣÷V樣總×W）÷T= 36×A460÷W
（3）按細(xì)胞數(shù)量計算：
酶活性定義：在pH7.2，溫度為37℃條件下，每104個細(xì)胞每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個酶活力單位。
β-肌動蛋白/β-Actin 抗體（內(nèi)參抗體）     整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶8型抗體

β淀粉樣肽1-42 (C端)抗體     整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶4型抗體

β淀粉樣肽1-16/Aβ1-16抗體     整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶2型抗體

β淀粉樣肽（1-28）抗體     整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶1型抗體

水通道蛋白5抗體     整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶1型-7抗體 (N端抗體)
大鼠兒茶酚抑素elisa檢測試劑盒

大鼠二胺氧化酶(DAO)elisa分析檢測試劑盒

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羥脯氨酸（HYP）可見分光光度法測試盒高 GC DNA 清除劑，PCR 級1.5mL  硅膠膜 DNA 離心吸附柱 ( 大提 )1套

MnCl2溶液，25mM，PCR 級5mL  硅基磁珠2mL

甲酰胺，PCR 級5mL  固相內(nèi)毒素清除劑500g

MgSO4溶液，10mM，PCR 級5mL  固相內(nèi)毒素清除劑100g

石蠟油，PCR 級10mL  固相 RNase 清除劑250mL