植物總酚微量法測(cè)試盒

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產(chǎn)品名稱(chēng)：植物總酚微量法測(cè)試盒
規(guī)格 : 100管/48樣
測(cè)試方法: 微量法
貨號(hào)：GOY-01S6446
分類(lèi)：氧化與抗氧化系列
商品介紹：
植物酚類(lèi)物質(zhì)具有清除自由基，抗氧化抗衰老的作用，具有較高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和醫(yī)療保健作用而廣泛應(yīng)用于化妝品、食品、醫(yī)藥等領(lǐng)域。

測(cè)定原理：

在堿性條件下，酚類(lèi)物質(zhì)將鎢鉬酸還原，產(chǎn)生藍(lán)色化合物，在760nm處有特征吸收峰，測(cè)760nm處的吸光值，即可得樣品總酚含量。

需自備的儀器和用品：

天平、烘箱、粉碎儀、篩子、超聲破碎儀、60%乙醇、離心機(jī)、可見(jiàn)分光光度計(jì)、微量石英比色皿、蒸餾水。
試劑的組成和配制
提取液一：液體50mL×1瓶，4℃保存。
提取液二：液體50mL×1瓶，4℃保存。
試劑一：粉劑×1瓶，-20℃保存；臨用前加入40mL試劑四充分溶解待用，用不完的試劑4℃保存；
試劑二：液體18μL×1瓶，4℃保存；臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用，用不完的試劑4℃保存；
試劑三：粉劑×1瓶，-20℃保存；臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用，用不完的試劑4℃保存；
試劑四：液體50mL×1瓶， 4℃保存；
測(cè)定步驟
1、 分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至340nm，蒸餾水調(diào)零。
2、 將試劑一、二、三37℃(哺乳動(dòng)物)或25℃(其它物種)預(yù)熱10分鐘。
3、 加樣表：

樣本的前處理
①總FBP酶提取：建議稱(chēng)取約0.1g樣本，加入1mL提取液一，冰浴勻漿后超聲破碎（冰浴，200W，破碎3s，間歇7s，總時(shí)間1min），然后4℃，8000g離心10min，取上清測(cè)定。
②胞漿和葉綠體FBP酶的分離：按照植物組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為1：5～10的比例（建議稱(chēng)取約0.1g樣本，加入1mL提取液一），冰浴勻漿后于4℃，200g離心5min，棄沉淀，取上清在4℃，8000g離心10min，取上清用于測(cè)定胞漿FBP酶活性，取沉淀加1mL提取液二，震蕩溶解后超聲破碎（冰浴，200W，破碎3s，間歇7s，總時(shí)間1min），然后4℃，8000g離心10min，取上清測(cè)定葉綠體中FBP酶活性。
建議測(cè)定總FBP酶活性，按照步驟①提取粗酶液，若需要分別測(cè)定胞漿和葉綠體中的FBP，則按照步驟②提取粗酶液。
網(wǎng)格蛋白重鏈抗體     ?；?/span>A結(jié)合結(jié)構(gòu)域蛋白4抗體

碳酸酐酶相關(guān)蛋白/腦蛋白15抗體     酰基A合成酶家族4抗體

0酸化接頭蛋白CrkL抗體     ?；?/span>A合成酶4抗體

細(xì)胞粘附分子3抗體     纖維狀肌動(dòng)蛋白抗體

整合素相關(guān)蛋白CD47     纖維性鞘結(jié)合蛋白1抗體
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植物總酚微量法測(cè)試盒天然蛋白 A1mg  RIPA 裂解液 ( 弱 )100mL

重組蛋白 A1mg  RIPA 裂解液 ( 強(qiáng) )100mL

重組蛋白 G1mg  Rhodamine1235mg

重組蛋白 A/G1mg  Rhod-2，三鹽1mg

重組蛋白 L1mg  Real-Time PCR 稀釋液1mL
FBP活性計(jì)算：
（1）按樣本蛋白濃度計(jì)算
單位的定義：每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個(gè)酶活力單位。
FBP（nmol/min/mg prot）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
（2）按樣本鮮重計(jì)算
單位的定義：每g組織每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個(gè)酶活力單位。
FBP（nmol/min/g 鮮重）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(W ×V樣÷V樣總) ÷T=321.5×ΔA÷W
V反總：反應(yīng)體系總體積，1×10-3 L；ε：NADPH摩爾消光系數(shù)，6.22×103 L / mol /cm；d：比色皿光徑，1cm；V樣：加入樣本體積，0.1 mL；V樣總：加入提取液體積，1mL；T：反應(yīng)時(shí)間，5 min；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g。