總抗氧化能力（ABTS法）可見分光光度法

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產(chǎn)品名稱：總抗氧化能力（ABTS法）可見分光光度法測試盒
規(guī)格 : 50管/48樣
測試方法: 可見分光光度法
貨號：GOY-01S6441
分類：氧化與抗氧化系列
商品介紹：
測定對象中各種抗氧化物質(zhì)和抗氧化酶等構(gòu)成總抗氧化水平。在生物學(xué)、醫(yī)學(xué)和藥學(xué)研究中常常檢測血漿、血清、唾液、尿液等各種體液，細(xì)胞或組織等裂解液、植物或中草藥抽提液及各種抗氧化物(antioxidant)溶液的總抗氧化能力。

測定原理：

ABTS法是使用*泛的間接檢測方法，可用于親水性和親脂性物質(zhì)抗氧化能力測定。ABTS經(jīng)氧化后生成穩(wěn)定的藍(lán)綠色陽離子自由基 ABTS+，能溶于水相或酸性乙醇介質(zhì)中，在734nm處有最大吸收。被測物質(zhì)加入ABTS+溶液后，所含抗氧化成分能與ABTS+發(fā)生反應(yīng)而使反應(yīng)體系褪色。在734nm檢測吸光度的變化，并以Trolox作為對照體系量化抗氧化物質(zhì)的抗氧化能力。

自備實驗用品：

恒溫水浴鍋、低溫離心機(jī)、分光光度計、1mL玻璃比色皿和蒸餾水。
試劑的組成和配制
提取液一：液體50mL×1瓶，4℃保存。
提取液二：液體50mL×1瓶，4℃保存。
試劑一：粉劑×1瓶，-20℃保存；臨用前加入40mL試劑四充分溶解待用，用不完的試劑4℃保存；
試劑二：液體18μL×1瓶，4℃保存；臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用，用不完的試劑4℃保存；
試劑三：粉劑×1瓶，-20℃保存；臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用，用不完的試劑4℃保存；
試劑四：液體50mL×1瓶， 4℃保存；
測定步驟
1、 分光光度計預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長至340nm，蒸餾水調(diào)零。
2、 將試劑一、二、三37℃(哺乳動物)或25℃(其它物種)預(yù)熱10分鐘。
3、 加樣表：

樣本的前處理
①總FBP酶提?。航ㄗh稱取約0.1g樣本，加入1mL提取液一，冰浴勻漿后超聲破碎（冰浴，200W，破碎3s，間歇7s，總時間1min），然后4℃，8000g離心10min，取上清測定。
②胞漿和葉綠體FBP酶的分離：按照植物組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為1：5～10的比例（建議稱取約0.1g樣本，加入1mL提取液一），冰浴勻漿后于4℃，200g離心5min，棄沉淀，取上清在4℃，8000g離心10min，取上清用于測定胞漿FBP酶活性，取沉淀加1mL提取液二，震蕩溶解后超聲破碎（冰浴，200W，破碎3s，間歇7s，總時間1min），然后4℃，8000g離心10min，取上清測定葉綠體中FBP酶活性。
建議測定總FBP酶活性，按照步驟①提取粗酶液，若需要分別測定胞漿和葉綠體中的FBP，則按照步驟②提取粗酶液。
酵母蛋白酶抑制劑1mL  PAGE 膠長加樣槍頭1盒

His 標(biāo)簽蛋白專用蛋白酶抑制劑10mL  Paclitaxel(TAXOL)(  )100μL

組織培養(yǎng)基蛋白酶抑制劑1mL  OrigamiB(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞10×100μL

α2巨球蛋白25Inh.U  Origami(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞0.1mL×10

AEBSF 溶液，10mg/mL5mL  Origami B(DE3)plysS 感受態(tài)細(xì)胞 0.1mL×10

miRNA 電泳分子量標(biāo)準(zhǔn)30 次  鳥類種屬鑒定 PCR Mix100 次

微量 RNA 助沉劑0.1mL  尼龍膜，13×20cm1張

微量 DNA 助沉劑0.1mL  內(nèi)皮細(xì)胞生長因子5mL

DNA 級 Acryl 助沉劑1mL  內(nèi)毒素清除專用親和介質(zhì)5mL

彩色 Acryl 助沉劑1g  內(nèi)毒素清除專用親和介質(zhì)50mL
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總抗氧化能力（ABTS法）可見分光光度法測試盒填入法 DNA 末端標(biāo)記試劑盒 C5次  接頭 DNA(Sal I-Sma I)5nmol

DNA 5’末端標(biāo)記試劑盒10 次  接頭 DNA(pSma I)5nmol

dNTP 溶液 ( 標(biāo)記專用 )0.5mL  接頭 DNA(Hind Ⅲ -Sma I)5nmol

標(biāo)記 dUTP 溶液50μL  接頭 DNA(EcoR I-Sma I)5nmol

Aminoally-dUTP 溶液，10mM100μL  接頭 DNA(BamH I(Bgl II)-Sma I)5nmol
FBP活性計算：
（1）按樣本蛋白濃度計算
單位的定義：每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個酶活力單位。
FBP（nmol/min/mg prot）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
（2）按樣本鮮重計算
單位的定義：每g組織每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個酶活力單位。
FBP（nmol/min/g 鮮重）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(W ×V樣÷V樣總) ÷T=321.5×ΔA÷W
V反總：反應(yīng)體系總體積，1×10-3 L；ε：NADPH摩爾消光系數(shù)，6.22×103 L / mol /cm；d：比色皿光徑，1cm；V樣：加入樣本體積，0.1 mL；V樣總：加入提取液體積，1mL；T：反應(yīng)時間，5 min；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g。