L半乳糖酸1,4內(nèi)酯脫氫酶(Gal LDH)微量法

產(chǎn)品名稱：L半乳糖酸1,4內(nèi)酯脫氫酶(Gal LDH)微量法測(cè)試盒
規(guī)格 : 100管/96樣
測(cè)試方法: 微量法
貨號(hào)：GOY-01S6392
分類：維生素代謝系列
商品介紹：
L-半乳糖途徑是合成AsA的主要途徑。Gal LDH位于線粒體內(nèi)膜，負(fù)責(zé)催化植物體內(nèi)AsA生物合成的最后一步，也是該途徑的關(guān)鍵酶之一，對(duì)植物體內(nèi)AsA含量的積累起著至關(guān)重要的作用。

測(cè)定原理：

Gal LDH催化L-半乳糖內(nèi)酯還原(Cyt c)，還原型Cyt c在550nm有吸收峰；測(cè)定還原型Cyt c增加速率，來(lái)計(jì)算Gal LDH活性。

自備儀器和用品：

臺(tái)式離心機(jī)、紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、可調(diào)式移液器、研缽、冰和蒸餾水。
試劑的組成和配制
提取液一：液體50mL×1瓶，4℃保存。
提取液二：液體50mL×1瓶，4℃保存。
試劑一：粉劑×1瓶，-20℃保存；臨用前加入40mL試劑四充分溶解待用，用不完的試劑4℃保存；
試劑二：液體18μL×1瓶，4℃保存；臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用，用不完的試劑4℃保存；
試劑三：粉劑×1瓶，-20℃保存；臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用，用不完的試劑4℃保存；
試劑四：液體50mL×1瓶， 4℃保存；
測(cè)定步驟
1、 分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至340nm，蒸餾水調(diào)零。
2、 將試劑一、二、三37℃(哺乳動(dòng)物)或25℃(其它物種)預(yù)熱10分鐘。
3、 加樣表：

樣本的前處理
①總FBP酶提取：建議稱取約0.1g樣本，加入1mL提取液一，冰浴勻漿后超聲破碎（冰浴，200W，破碎3s，間歇7s，總時(shí)間1min），然后4℃，8000g離心10min，取上清測(cè)定。
②胞漿和葉綠體FBP酶的分離：按照植物組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為1：5～10的比例（建議稱取約0.1g樣本，加入1mL提取液一），冰浴勻漿后于4℃，200g離心5min，棄沉淀，取上清在4℃，8000g離心10min，取上清用于測(cè)定胞漿FBP酶活性，取沉淀加1mL提取液二，震蕩溶解后超聲破碎（冰浴，200W，破碎3s，間歇7s，總時(shí)間1min），然后4℃，8000g離心10min，取上清測(cè)定葉綠體中FBP酶活性。
建議測(cè)定總FBP酶活性，按照步驟①提取粗酶液，若需要分別測(cè)定胞漿和葉綠體中的FBP，則按照步驟②提取粗酶液。
FBP活性計(jì)算：
（1）按樣本蛋白濃度計(jì)算
單位的定義：每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個(gè)酶活力單位。
FBP（nmol/min/mg prot）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
（2）按樣本鮮重計(jì)算
單位的定義：每g組織每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個(gè)酶活力單位。
FBP（nmol/min/g 鮮重）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(W ×V樣÷V樣總) ÷T=321.5×ΔA÷W
V反總：反應(yīng)體系總體積，1×10-3 L；ε：NADPH摩爾消光系數(shù)，6.22×103 L / mol /cm；d：比色皿光徑，1cm；V樣：加入樣本體積，0.1 mL；V樣總：加入提取液體積，1mL；T：反應(yīng)時(shí)間，5 min；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g。
BEN結(jié)構(gòu)域蛋白5抗體     胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白7抗體

半乳糖轉(zhuǎn)移酶7亞基β1,4抗體     胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白6抗體

Bcl2相關(guān)抗凋亡基因6抗體     胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白5抗體

組蛋白相關(guān)Bmi1抗體     胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白4抗體

溴脫氧尿苷單克隆抗體（增殖標(biāo)志物）     胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白3抗體
大鼠紅藻氨酸離子能受體2(GRIK2)elisa檢測(cè)試劑盒

大鼠花生四烯酸(AA)elisa分析檢測(cè)試劑盒

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大鼠花生四烯酸-12-脂加氧酶(ALOX12)elisa檢測(cè)試劑盒

大鼠花生四烯酸12-脂氧合酶,白細(xì)胞型(Alox12l/Alox12/Alox15)elisa分析檢測(cè)試劑盒
L半乳糖酸1,4內(nèi)酯脫氫酶(Gal LDH)微量法測(cè)試盒一站式乙酸 - 尿素 PAGE 電泳套裝30 次  lambda(λ)DNA5μg

Tricine-SDS-PAGE 配膠液250mL  lambda(λ)DNA5μg

Tricine-SDS-PAGE 配膠液1000mL  lambda(λ)DNA5μg

Tricine-SDS-PAGE 上樣液1mL  L- 甘肽 ( 還原型 )5g

Tricine-SDS-PAGE 上樣液5mL  KT5823(PKG 抑制劑 )50μg
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