谷胱甘肽S轉移酶（GST）微量法測試盒

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商品介紹：
GST是一種具有多種生理功能的蛋白質(zhì)家族，主要存在于細胞質(zhì)內(nèi)。GST是體內(nèi)解毒酶系統(tǒng)的重要組成部分，主要催化各種化學物質(zhì)及其代謝產(chǎn)物與GSH的巰基共價結合，使親電化合物變?yōu)橛H水物質(zhì)，易于從膽汁或尿液中排泄，達到將體內(nèi)各種潛在或具備毒性的物質(zhì)降解并排出體外的目的。因此，GST在保護細胞免受親電子化合物的損傷中發(fā)揮著重要的生物學功能。此外，因為GST具有GSH-Px活性，亦稱為non-Se GSH-Px，具有修復氧化破壞的大分子如DNA、蛋白質(zhì)等的功能。注意，GST催化的反應減少GSH含量，但是不增加GSSG含量。

測定原理：

GST催化GSH與CDNB結合，其結合產(chǎn)物的光吸收峰波長為340nm；通過測定340nm波長處吸光度上升速率，即可計算出GST活性。

需自備的儀器和用品：

紫外-可見分光光度計、低溫離心機、水浴鍋、可調(diào)節(jié)移液器、1ml石英比色皿、雙蒸水。

劑組成和配制：
提取液：液體100mL×1瓶，4℃保存。
試劑一：液體20mL×1瓶，4℃保存。
試劑二：粉劑×1瓶，4℃避光保存。臨用前加1mL蒸餾水溶解；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復凍融。
試劑三：粉劑×1瓶，4℃避光保存。臨用前加1mL蒸餾水溶解；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復凍融。
試劑四：粉劑×1瓶，4℃避光保存。臨用前加1mL蒸餾水溶解；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復凍融。
測定操作表：

酶活性計算公式：
a. 用微量石英比色皿測定的計算公式如下
（1）按樣本蛋白濃度計算：
酶活性定義：在pH7.2，溫度為37℃條件下，每毫克組織蛋白每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量為一個酶活力單位（U）。
DAO活性（nmol/min/mg prot）= ×V反總÷（V樣×Cpr）÷T= 18×A460÷Cpr
（2）按樣本質(zhì)量計算：
酶活性定義：在pH7.2，溫度為37℃條件下，每克組織每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個酶活力單位。
DAO活性（nmol/min/g 鮮重）= ×V反總÷（V樣÷V樣總×W）÷T= 18×A460÷W
（3）按細胞數(shù)量計算：
酶活性定義：在pH7.2，溫度為37℃條件下，每104個細胞每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個酶活力單位。
DAO活性（nmol/min/104cell）= ×V反總÷（V樣÷V樣總×細胞數(shù)量）÷T= 18×A460÷細胞數(shù)量
(4) 按液體體積計算
酶活性定義：在pH7.2，溫度為37℃條件下，每毫升血清每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個酶活力單位。
DAO活性（nmol/min/mL）= ×V反總÷V樣÷T= 18×A460
ε：氧化型鄰聯(lián)茴香胺毫摩爾消光系數(shù)：7.5 L/mmol/cm；d：比色皿光徑，1cm；V反總：反應總體積，0.2mL；V樣：反應中樣本體積，0.05mL；V樣總：加入提取液體積，1mL；Cpr：樣本蛋白濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g；T：反應時間，30min
b. 用96孔板測定的計算公式如下
（1）按樣本蛋白濃度計算：
酶活性定義：在pH7.2，溫度為37℃條件下，每毫克組織蛋白每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量為一個酶活力單位（U）。
DAO活性（nmol/min/mg prot）= ×V反總÷（V樣×Cpr）÷T= 36×A460÷Cpr
（2）按樣本質(zhì)量計算：
酶活性定義：在pH7.2，溫度為37℃條件下，每克組織每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個酶活力單位。
DAO活性（nmol/min/g 鮮重）= ×V反總÷（V樣÷V樣總×W）÷T= 36×A460÷W
（3）按細胞數(shù)量計算：
酶活性定義：在pH7.2，溫度為37℃條件下，每104個細胞每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個酶活力單位。
Dihydrorhodamine 123 10mg  DNA 電泳分子量標準 (2)（50-400 bp）50 次

DiI( 細胞膜紅色熒光探針 )10mg  DNA 電泳分子量標準 (2)（300-5000 bp）50 次

DiIC1(5) 碘化物100mg  DNA 電泳分子量標準 (100-600 bp)50 次

DiIC12(3) 高氯酸化物100mg  DNA 電泳分子量標準 (100-5000 bp)50 次

DiO( 細胞膜綠色熒光探針 )10mg  DNA 電泳分子量標準 (100-200 bp)50 次

DMSO，PCR 級1.5mL  固相 RNase 清除劑100mL

海藻糖溶液，1.5M，PCR 級1.5mL  鈷柱介質(zhì)10mL

甜菜堿溶液，5M，PCR 級1.5mL  骨骼肌細胞生長因子5mL

綠如藍染料，PCR 級0.1mL  甘肽瓊脂糖2mL

綠如藍染料，PCR 級1mL  甘肽 S 轉移酶1mg
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谷胱甘肽S轉移酶（GST）微量法測試盒預稀釋 BSA 蛋白標準品7×1mL  RNA 級 CTAB ( 十六烷基基化銨 )100g

預稀釋 BGG 蛋白標準品7×1mL  RNA 級 b-Mercaptoethanol(2-  )50mL

SDS-PAGE 制備試劑盒50 次  RNA 電泳液 ,10×250mL

考馬斯亮藍 R-25010g  RNA 電泳液 ,10×100mL

考馬斯亮藍 G-25010g  RIPA 裂解液 ( 中 )100mL

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