γ谷氨酰半胱氨酸連接酶（GCL）微量法

劑組成和配制：
提取液：液體100mL×1瓶，4℃保存。
試劑一：液體20mL×1瓶，4℃保存。
試劑二：粉劑×1瓶，4℃避光保存。臨用前加1mL蒸餾水溶解；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復(fù)凍融。
試劑三：粉劑×1瓶，4℃避光保存。臨用前加1mL蒸餾水溶解；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復(fù)凍融。
試劑四：粉劑×1瓶，4℃避光保存。臨用前加1mL蒸餾水溶解；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復(fù)凍融。

商品介紹：
GCL 是 GSH 合成的限速酶，GSH 對(duì) GCL 有反饋抑制作用。GCL基因表達(dá)受多種因素調(diào)節(jié)，如氧化劑、抗氧化劑、生長(zhǎng)因子和炎癥因子等。GCL活性高低對(duì)GSH含量和GSH/GSSG比值有重要影響。

測(cè)定原理：

在ATP和Mg2+存在下，GCL催化谷氨酸和半胱氨酸合成γ-谷氨酰半胱氨酸；同時(shí)ATP去磷酸化產(chǎn)生無(wú)機(jī)磷分子，通過(guò)測(cè)定無(wú)機(jī)磷增加速率，即可計(jì)算出GCL活性。

自備儀器和用品：

冷凍離心機(jī)、水浴鍋、移液器、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量玻璃比色皿/96孔板、濃硫酸和蒸餾水。
測(cè)定操作表：

酶活性計(jì)算公式：
a. 用微量石英比色皿測(cè)定的計(jì)算公式如下
（1）按樣本蛋白濃度計(jì)算：
酶活性定義：在pH7.2，溫度為37℃條件下，每毫克組織蛋白每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量為一個(gè)酶活力單位（U）。
DAO活性（nmol/min/mg prot）= ×V反總÷（V樣×Cpr）÷T= 18×A460÷Cpr
（2）按樣本質(zhì)量計(jì)算：
酶活性定義：在pH7.2，溫度為37℃條件下，每克組織每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個(gè)酶活力單位。
DAO活性（nmol/min/g 鮮重）= ×V反總÷（V樣÷V樣總×W）÷T= 18×A460÷W
（3）按細(xì)胞數(shù)量計(jì)算：
酶活性定義：在pH7.2，溫度為37℃條件下，每104個(gè)細(xì)胞每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個(gè)酶活力單位。
DAO活性（nmol/min/104cell）= ×V反總÷（V樣÷V樣總×細(xì)胞數(shù)量）÷T= 18×A460÷細(xì)胞數(shù)量
(4) 按液體體積計(jì)算
酶活性定義：在pH7.2，溫度為37℃條件下，每毫升血清每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個(gè)酶活力單位。
DAO活性（nmol/min/mL）= ×V反總÷V樣÷T= 18×A460
ε：氧化型鄰聯(lián)茴香胺毫摩爾消光系數(shù)：7.5 L/mmol/cm；d：比色皿光徑，1cm；V反總：反應(yīng)總體積，0.2mL；V樣：反應(yīng)中樣本體積，0.05mL；V樣總：加入提取液體積，1mL；Cpr：樣本蛋白濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g；T：反應(yīng)時(shí)間，30min
b. 用96孔板測(cè)定的計(jì)算公式如下
（1）按樣本蛋白濃度計(jì)算：
酶活性定義：在pH7.2，溫度為37℃條件下，每毫克組織蛋白每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量為一個(gè)酶活力單位（U）。
DAO活性（nmol/min/mg prot）= ×V反總÷（V樣×Cpr）÷T= 36×A460÷Cpr
（2）按樣本質(zhì)量計(jì)算：
酶活性定義：在pH7.2，溫度為37℃條件下，每克組織每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個(gè)酶活力單位。
DAO活性（nmol/min/g 鮮重）= ×V反總÷（V樣÷V樣總×W）÷T= 36×A460÷W
（3）按細(xì)胞數(shù)量計(jì)算：
酶活性定義：在pH7.2，溫度為37℃條件下，每104個(gè)細(xì)胞每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個(gè)酶活力單位。
20號(hào)染色體開放閱讀框7抗體     鋅指蛋白103抗體

20號(hào)染色體開放閱讀框78抗體     鋅指FYVE結(jié)構(gòu)域蛋白27抗體

21號(hào)染色體開放閱讀框59抗體     鋅指/環(huán)指蛋白4抗體

20號(hào)染色體開放閱讀框79抗體     鋅指/環(huán)指蛋白2抗體

20號(hào)染色體開放閱讀框94抗體     鋅指/環(huán)指蛋白1抗體
大鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgA(EMA IgA)elisa檢測(cè)試劑盒

大鼠抗甲狀腺過(guò)氧化物酶抗體(TPO-Ab)elisa分析檢測(cè)試劑盒

大鼠抗甲狀腺過(guò)氧化物酶抗體(TPO-Ab)elisa檢測(cè)試劑盒

大鼠抗甲狀腺球蛋白抗體(ATGA/TGAB)elisa分析檢測(cè)試劑盒

大鼠抗甲狀腺球蛋白抗體(ATGA/TGAB)elisa檢測(cè)試劑盒
γ谷氨酰半胱氨酸連接酶（GCL）微量法測(cè)試盒預(yù)稀釋 BSA 蛋白標(biāo)準(zhǔn)品7×1mL  RNA 級(jí) CTAB ( 十六烷基基化銨 )100g

預(yù)稀釋 BGG 蛋白標(biāo)準(zhǔn)品7×1mL  RNA 級(jí) b-Mercaptoethanol(2-  )50mL

SDS-PAGE 制備試劑盒50 次  RNA 電泳液 ,10×250mL

考馬斯亮藍(lán) R-25010g  RNA 電泳液 ,10×100mL

考馬斯亮藍(lán) G-25010g  RIPA 裂解液 ( 中 )100mL

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