核糖核酸酶A12(RNASE12)重組蛋白人

核糖核酸酶A12(RNASE12)重組蛋白人公司正在出售的產(chǎn)品：人血管生成素樣蛋白3(ANGPTL3)ELISA試劑盒96T 0.235-15 ng/mL人血管緊張素Ⅱ1A型受體(Type-1A angiotensin II receptor)ELISA試劑盒96T 1.56-100 ng/mL人錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白30A ELISA試劑盒96T 0.156-10 ng/mL

產(chǎn)品屬性：

 

 

產(chǎn)品名稱：核糖核酸酶A12(RNASE12)重組蛋白人

英文名稱：Recombinant Ribonuclease A12 (RNASE12)

Probable inactive ribonuclease-like protein 12

型號：GOY-01D38

酶與激酶

物種：Homo sapiens (Human，人)

來源：原核表達

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位：：分泌

預(yù)測分子量：16.0kDa

實際分子量：18kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標簽：Glu21~Lys147 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 97%

等電點：7.7

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

蛋白表達及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細胞中，通過瞬時表達產(chǎn)生目標蛋白。

2.收集含有目標蛋白的部分（細胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標蛋白及純化報告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶撕灒?/span>Tag）或切除純化標簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達90%以上。
以下是相關(guān)產(chǎn)品：

英文名稱：Recombinant Lipoprotein lipase (LPL)  產(chǎn)品名稱：脂蛋白脂酶(LPL)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Lipoprotein lipase (LPL)  產(chǎn)品名稱：脂蛋白脂酶(LPL)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名稱：Recombinant Lipoprotein lipase (LPL)  產(chǎn)品名稱：脂蛋白脂酶(LPL)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名稱：Recombinant Matrix Metalloproteinase 12 (MMP12)  產(chǎn)品名稱：基質(zhì)金屬12(MMP12)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Matrix Metalloproteinase 12 (MMP12)  產(chǎn)品名稱：基質(zhì)金屬12(MMP12)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名稱：Recombinant Matrix Metalloproteinase 12 (MMP12)  產(chǎn)品名稱：中文名稱188基質(zhì)金屬12(MMP12)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

操作步驟：

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞，將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

 

 

 

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

凋亡蛋白活性因子-1抗體（C端） APAF1(CT)

銜接蛋白α-Adaptin抗體 alpha Adaptin

凋亡蛋白活性因子-1抗體（N端） APAF1(NT)

三結(jié)合轉(zhuǎn)運蛋白G超家族成員2抗體 ABCG2

載脂蛋白E抗體 APOE

淀粉樣肽前體蛋白抗體 Amyloid Precursor Protein

水通道蛋白-2抗體 Aquaporin 2

血管緊張素原抗體 AGT

細胞死亡調(diào)節(jié)蛋白抗體(凋亡、半胱胺酸激活抑制劑) AVEN

軸蛋白1抗體 Axin1

雄激素受體抗體 Androgen receptor

自噬相關(guān)蛋白9B抗體 ATG9B

核糖核酸酶A12(RNASE12)重組蛋白人傘枝犁霉 Absidia corymbiferarEPC，大鼠內(nèi)皮祖細胞-骨髓

北方梭囊孔菌鏈-青(100X)

豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vignaRBL-1(大鼠嗜堿性粒細胞性白血病細胞)

串珠菌 Leuconostoc lactisCFPAC-1(人胰腺細胞)

哈茨木霉 Mesorhizobium huakuii酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp. lactis

三葉草根瘤菌 Rhizobium trifolii土壤桿菌屬 Agrobacterium sp.

大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti

亞利桑納沙門氏菌 Salmonella arizona釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

醋酸鈣不動桿菌 Acinetobacter calcoaceticus人甲狀腺濾泡上皮細胞培養(yǎng)基

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiaeBIU-87(人膀胱細胞)

樹狀假絲酵母 Candida cerevisiaeLX-2, 人肝星形細胞株

苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

丘狀菌落桿菌 Lactobacillus collinoides雙孢蘑菇 Agaricus bisporus