產(chǎn)品簡(jiǎn)介
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
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貨號(hào) | GOY-01D115 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) | 英文名稱 | Recombinant Galactosidase Alpha (GLa) |
物種 | Mus musculus (Mouse,小鼠) |
上海谷研實(shí)業(yè)有限公司 |
—— 銷售熱線 ——
15026555973 |
參考價(jià) | 面議 |
更新時(shí)間:2023-03-02 14:43:50瀏覽次數(shù):196
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
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貨號(hào) | GOY-01D115 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) | 英文名稱 | Recombinant Galactosidase Alpha (GLa) |
物種 | Mus musculus (Mouse,小鼠) |
以下是相關(guān)產(chǎn)品:
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英文名稱:Recombinant Creatine Kinase B (CK-BB) 產(chǎn)品名稱:肌酸激酶B(CK-BB)重組蛋白物種:Homo sapiens (Human,人)
英文名稱:Recombinant Creatine Kinase B (CK-BB) 產(chǎn)品名稱:肌酸激酶B(CK-BB)重組蛋白物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)
英文名稱:Recombinant Phospholipase B (PLB) 產(chǎn)品名稱:磷脂酶B(PLB)重組蛋白物種:Homo sapiens (Human,人)
英文名稱:Recombinant Phospholipase D (PLD) 產(chǎn)品名稱:磷脂酶D(PLD)重組蛋白物種:Homo sapiens (Human,人)
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產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 物種 | 貨號(hào) |
半乳糖苷酶α(GLa)重組蛋白小鼠 | Mus musculus (Mouse,小鼠) | GOY-01D115 |
產(chǎn)品名稱:半乳糖苷酶α(GLa)重組蛋白小鼠
英文名稱:Recombinant Galactosidase Alpha (GLa)
GALA; GL-A; Alpha-D-Galactoside Galactohydrolase; Alpha-D-Galactosidase A; Melibiase; Agalsidase
型號(hào):GOY-01D115
酶與激酶
代謝通路
物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)
來(lái)源:原核表達(dá)
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)
亞細(xì)胞定位::溶酶體
預(yù)測(cè)分子量:30.2kDa
實(shí)際分子量:30kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書)
片段與標(biāo)簽:Val29~Gly258 with N-terminal His Tag
緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)
性狀:凍干粉
純度:> 97%
等電點(diǎn):5.7
應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg
蛋白表達(dá)及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。
2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過(guò)親和,離子交換,疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。
4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。
5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。
交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告。可按客戶要求提供含純化標(biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達(dá)90%以上。
操作步驟:
Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,注意低溫操作;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;
2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細(xì)胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個(gè) | 0.5 mL~1 mL |
5×106個(gè) | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺(tái)上,溫和振蕩15 min;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
公司正在出售的產(chǎn)品:
磷酸化相關(guān)死亡促進(jìn)因子抗體 phospho-BAD(Ser91)
磷酸化乳腺癌抗雌激素耐藥蛋白1抗體 phospho-BCAR1 (Tyr751)
肌動(dòng)蛋白樣蛋白6A抗體 BAF53A
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磷酸化紅細(xì)胞陰離子交換蛋白1抗體 phospho-Band3 (Tyr359)
障礙自整合蛋白BAF抗體 BANF1
磷酸化轉(zhuǎn)錄因子MYB相關(guān)蛋白B抗體 phospho-B MyB (Ser577 + Ser581)
磷酸化轉(zhuǎn)錄因子MYB相關(guān)蛋白B抗體 phospho-B MyB (Thr487)
磷酸化B-Raf抗體 phospho-B Raf (Thr446 + Ser601)
磷酸化B-Raf抗體 phospho-B Raf (Thr598)
磷酸化B-Raf抗體 phospho-B-Raf (Ser729)
磷酸化B-Raf抗體 phospho-B Raf (Thr753)
半乳糖苷酶α(GLa)重組蛋白小鼠PIEC(豬髖動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 )大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum
斯氏假單胞菌 Pseudomonas stutzeriSW 1990(人胰腺細(xì)胞)
SP Rabbit HRP Kit(DAB)/兔Streptavidin-HRP試劑盒(帶DAB顯色液)釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
煙曲霉 Aspergillus fumigatusQGY-7701(人肝細(xì)胞)
KB(人口腔表皮樣細(xì)胞)C4-2(人前列腺細(xì)胞)
炭樣小單孢菌 Micromonospora carbonacea酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp. lactis
嗜熱鏈球菌 Streptococcus thermophilus酒假絲酵母 Candida kefyr
蘇云金芽胞桿菌達(dá)姆斯塔特亞種 Bacillus thuringiensis subsp. darmstadiensis大鼠外周血白細(xì)胞培養(yǎng)基
rCSC, 大鼠心肌細(xì)胞RLFs, 大鼠肺成纖維細(xì)胞
微黃八疊球菌 Sarcina subflava微紫青霉 Penicillium janthinellum
酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp.lactisBC3H1(小鼠腦瘤細(xì)胞)
螢光假單胞桿菌 Pseudomonas fluorescensHK-2, 人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細(xì)胞
異常漢遜酵母 Hansenula anomala釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae