蛋白激酶Cη(PKCh)重組蛋白人

蛋白激酶Cη(PKCh)重組蛋白人公司正在出售的產(chǎn)品：人可溶性CD38(sCD38)ELISA試劑盒96T 0.78-50 ng/mL人補(bǔ)體7(C7)ELISA試劑盒96T 0.78-50 ng/mL人嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白2(Eotaxin 2/CCL24)ELISA試劑盒96T 0.156-10 ng/ml

蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。

產(chǎn)品屬性：

 

 

產(chǎn)品名稱：蛋白激酶Cη(PKCh)重組蛋白人

英文名稱：Recombinant Protein Kinase C Eta (PKCh)

PRKCH; PRKC-H; PKC-L; PRKCL; NPKC-Eta

型號：GOY-01D146

酶與激酶

物種：Homo sapiens (Human，人)

來源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細(xì)胞定位：：細(xì)胞質(zhì)

預(yù)測分子量：30.9kDa

實(shí)際分子量：30kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標(biāo)簽：Phe355~Phe614 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：PBS, pH7.4, containing 0.01% SKL, 5% Trehalose.

性狀：凍干粉

純度：> 90%

等電點(diǎn)：5.6

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

英文名稱：Recombinant Homogentisate-1,2-Dioxygenase (HGD)  產(chǎn)品名稱：尿黑酸1,2-雙加氧酶(HGD)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant 4-Hydroxyphenylpyruvate Dioxygenase (HPD)  產(chǎn)品名稱：4-羥基酸雙加氧酶(HPD)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Prolyl-4-Hydroxylase Alpha Polypeptide I (P4Ha1)  產(chǎn)品名稱：-4-羥化酶α多肽Ⅰ(P4Ha1)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名稱：Recombinant Prolyl-4-Hydroxylase Alpha Polypeptide II (P4Ha2)  產(chǎn)品名稱：脯氨酰4-羥化酶α多肽Ⅱ(P4Ha2)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Prolyl-4-Hydroxylase Alpha Polypeptide III (P4Ha3)  產(chǎn)品名稱：脯氨酰4-羥化酶α多肽Ⅲ(P4Ha3)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Muscle, Skeletal, Receptor Tyrosine Kinase (MUSK)  產(chǎn)品名稱：骨骼肌特異性受體激酶(MUSK)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

 

 

 

5．置于4℃搖床平臺(tái)上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

細(xì)胞連接相關(guān)蛋白1抗體 CLASP1

冷誘導(dǎo)RNA結(jié)合蛋白抗體 CIRBP

細(xì)胞連接相關(guān)蛋白2抗體 CLASP2

磷酸化周期素依賴性激酶5抗體 phospho-CDK5(Tyr15)

異戊烯半羧基甲基轉(zhuǎn)移酶抗體 ICMT

核苷酸交換因子CLLD7抗體 CLLD7

趨化素樣因子超家族成員4抗體 CKLFH4

趨化素樣因子超家族成員7抗體 CKLFSF7

卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白64B抗體 CCDC64B

組蛋白H3-K9甲基轉(zhuǎn)移酶抗體 CLLD8

趨化素樣因子超家族成員5抗體 CKLFH5

趨化素樣因子超家族成員6抗體 CKLFH6

蛋白激酶Cη(PKCh)重組蛋白人A172(人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞)B16-F10(小鼠皮膚黑色素瘤細(xì)胞)

植物桿菌 Lactobacillus plantarum根瘤菌

疣孢漆斑菌 Myrothecium verrucaria大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

MA, 小鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞非洲綠猴腎細(xì)胞

黑曲霉 Aspergillus nigerPLC/PRF/5(人肝亞力山大細(xì)胞)

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae植物桿菌 Lactobacillus plantarum

不產(chǎn)色鏈霉菌 Streptomyces achromogenes黑曲霉 Aspergillus niger

日本根霉 Rhizopus japonicus多孢木霉

易脆毛霉 Mucor fragilis彎曲假單胞菌 Pseudomonas flectens

大鼠神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基小鼠黑色素瘤細(xì)胞

宇佐美曲霉 Aspergillus usamiiMM, 小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞

泡盛曲霉 Aspergillus awamori大鼠卵巢成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基

毛柄金錢菌(金針菇) Flammulina velutipes酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp. Lactis