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組織蛋白酶K(CTSK)重組蛋白人

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更新時間:2023-03-02 15:34:08瀏覽次數(shù):260

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
貨號 GOY-01D155 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研實驗 英文名稱 Recombinant Cathepsin K (CTSK)
物種 Homo sapiens (Human,人)    
組織蛋白酶K(CTSK)重組蛋白人公司正在出售的產(chǎn)品:人肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)ELISA試劑盒96T 0.312-20 ng/mL人衰變加速因子(DAF/CD55)ELISA試劑盒96T 31.2-2000 pg/mL(LH)ELISA試劑盒96T 3.75-240 mIU/mL

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

物種

貨號

組織蛋白酶K(CTSK)重組蛋白人

Homo sapiens (Human,人)

GOY-01D155

 

 

產(chǎn)品名稱:組織蛋白酶K(CTSK)重組蛋白人

英文名稱:Recombinant Cathepsin K (CTSK)

CTS-K; CTS02; CTSO; CTSO1; CTSO2; PKND; PYCD; Pycnodysostosis; Cathepsin O; Cathepsin X

型號:GOY-01D155

酶與激酶

感染免疫

骨骼代謝

物種:Homo sapiens (Human,人)

來源:原核表達

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細(xì)胞定位::溶酶體

預(yù)測分子量:27.2kDa

實際分子量:30kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標(biāo)簽:Ala115~Met329 with N-terminal His Tag

緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl, pH8.0, containing 0.01% SKL, 5% Trehalose.

性狀:凍干粉

純度:> 95%

等電點:9.0

應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg


蛋白表達及純化:

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過瞬時表達產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。

3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達90%以上。
以下是相關(guān)產(chǎn)品:

英文名稱:Recombinant Lysyl Oxidase Like Protein 1 (LOXL1)  產(chǎn)品名稱:賴氨酰氧化酶樣蛋白1(LOXL1)重組蛋白物種:Homo sapiens (Human,人)

英文名稱:Recombinant Lysyl Oxidase Like Protein 1 (LOXL1)  產(chǎn)品名稱:賴氨酰氧化酶樣蛋白1(LOXL1)重組蛋白物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)

英文名稱:Recombinant Lysyl Oxidase Like Protein 2 (LOXL2)  產(chǎn)品名稱:賴氨酰氧化酶樣蛋白2(LOXL2)重組蛋白物種:Homo sapiens (Human,人)

英文名稱:Recombinant Lysyl Oxidase Like Protein 2 (LOXL2)  產(chǎn)品名稱:賴氨酰氧化酶樣蛋白2(LOXL2)重組蛋白物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)

英文名稱:Recombinant Lysyl Oxidase Like Protein 2 (LOXL2)  產(chǎn)品名稱:賴氨酰氧化酶樣蛋白2(LOXL2)重組蛋白物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)

英文名稱:Recombinant Lysyl Oxidase Like Protein 4 (LOXL4)  產(chǎn)品名稱:賴氨酰氧化酶樣蛋白4(LOXL4)重組蛋白物種:Homo sapiens (Human,人)

操作步驟:

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2.  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作;

3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;

4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;

2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;

3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

 

細(xì)胞數(shù)量

Lysis Buffer加入量

107個

0.5 mL~1 mL

5×106個

0.2 mL~0.5 mL

 

 

5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min;

6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);

7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品:

鈣磷蛋白1抗體 Calcyphosine 1

1號染色體開放閱讀框220抗體 C1orf220

鈣磷蛋白2抗體 Calcyphosine 2

磷酸化鉀通道相互作用蛋白3抗體 phospho-CSEN (Ser63)

16號染色體開放閱讀框61抗體 C16orf61

視錐感光細(xì)胞環(huán)磷酸鳥苷門控通道蛋白CNG3抗體 CNG3

環(huán)核苷酸門控陽離子通道蛋白β3/CNG-β3抗體 CNGB3

非受體激酶c-Abl抗體 c-Abl

甘油二酯磷酸轉(zhuǎn)移酶抗體 CHPT1

嗜鉻粒素B抗體 Chromogranin B

卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白152抗體 CCDC152

血管加壓素激活鈣啟動受體蛋白1抗體 Cullin 5

組織蛋白酶K(CTSK)重組蛋白人香菇 Lentinula edodes地衣芽孢桿菌 Bacillus licheniformis

淡紫擬青霉 Paecilomyces lilacinus戊糖桿菌 Lactobacillus pentosus

小鼠支氣管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti

L Wnt-3A(小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞)大鼠視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基

戊糖桿菌 Lactobacillus pentosusRLF, 大鼠淋巴成纖維細(xì)胞

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae溫特曲霉 Aspergillus wentii

鏈霉菌 Streptomyces sp.SK-OV-3(人卵巢細(xì)胞)

白色鏈霉菌白色變種 Streptomyces albus var. albus植物桿菌 Lactobacillus plantarum

豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna雙孢蘑菇

人非小細(xì)胞肺細(xì)胞大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

小鼠外周血白細(xì)胞培養(yǎng)基SNU-5(人胃細(xì)胞)

桿菌屬 Lactobacillus sp.釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

禾旋孢腔菌 Cochliobolus sativus熱帶假絲酵母 Candida tropicalis

 


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