蛋白激酶Cε(PKCe)重組蛋白人

產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品名稱：蛋白激酶Cε(PKCe)重組蛋白人

英文名稱：Recombinant Protein Kinase C Epsilon (PKCe)

PKC-E; PRKCE; PRKC-E; NPKC-Epsilon

型號(hào)：GOY-01D198

信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)

酶與激酶

細(xì)胞凋亡

內(nèi)分泌學(xué)

心腦血管

物種：Homo sapiens (Human，人)

來(lái)源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位：：分泌

預(yù)測(cè)分子量：32.4kDa

實(shí)際分子量：32kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書)

片段與標(biāo)簽：Leu403~Asp672 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：20mM Tris, 150mM NaCl, pH8.0, containing 0.01% SKL, 5% Trehalose.

性狀：凍干粉

純度：> 90%

等電點(diǎn)：5.4

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過(guò)親和，離子交換，疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。
以下是相關(guān)產(chǎn)品：

英文名稱：Recombinant Glutathione S Transferase Pi (GSTp)  產(chǎn)品名稱：S轉(zhuǎn)移酶π1(GSTp)重組蛋白物種：Bos taurus; Bovine (Cattle，牛)

英文名稱：Recombinant Lactate Dehydrogenase A (LDHA)  產(chǎn)品名稱：乳酸脫氫酶A(LDHA)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名稱：Recombinant Enolase 3 (ENO3)  產(chǎn)品名稱：烯醇化酶(ENO3)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名稱：Recombinant Enolase 3 (ENO3)  產(chǎn)品名稱：烯醇化酶(ENO3)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名稱：Recombinant Enolase 3 (ENO3)  產(chǎn)品名稱：烯醇化酶(ENO3)重組蛋白物種：Oryctolagus cuniculus (Rabbit，兔)

英文名稱：Recombinant Enolase 1 (ENO1)  產(chǎn)品名稱：非神經(jīng)元性烯醇化酶(ENO1)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

著絲粒蛋白B抗體 CENPB

CD318抗體 CDCP1

1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框111抗體 C1ORF111

19號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框80抗體 C19orf80

半雙加氧酶1抗體 CDO1

膠原蛋白11A2抗體 Collagen XI alpha 2

CUL4B蛋白抗體 Cullin 4B

1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框103抗體 C1orf103

促腎上腺皮質(zhì)激素釋放激素結(jié)合蛋白抗體 CRHBP

3號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框23抗體 C3orf23

凋亡抑制因子2抗體 API2

瓜環(huán)肽抗體 CCP

蛋白激酶Cε(PKCe)重組蛋白人小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌 Yersinia enterocolitica布魯塞爾德克酵母 Dekkera bruxellensis

根瘤菌小鼠脂肪細(xì)胞

293A，人胚腎上皮細(xì)胞系（腺病毒包裝級(jí)別）HFF-1(人成纖維細(xì)胞)

費(fèi)氏中華根瘤菌 Sinorhizobium fredii赭曲霉 Aspergillus ochraceus

苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti黑曲霉 Aspergillus niger

胰腺腺蘇云金芽孢桿菌 Bacillus thuringiensis

RAW 264.7(小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞)Hanks’ Balanced Salt Solution

人皮下脂肪細(xì)胞培養(yǎng)基豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna

爪哇根霉 Rhizopus javanicus人非小細(xì)胞肺細(xì)胞

大鼠前脂肪細(xì)胞培養(yǎng)基大鼠腎小管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基

球擬圓酵母 Torulopsis globosa酸球菌 Lactococcus lactis

環(huán)狀芽胞桿菌 Bacillus circulans柄鏈格孢=柄格孢菌 Alternaria longipes

Sf-21(昆蟲細(xì)胞)人胚肺成纖維細(xì)胞