內(nèi)皮型一氧化氮合酶(eNOS)重組蛋白兔

內(nèi)皮型一氧化氮合酶(eNOS)重組蛋白兔公司正在出售的產(chǎn)品：人可溶性糖蛋白130(sgp130/sCD130)ELISA試劑盒96T 0.156-10 ng/mL人細胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA試劑盒96T 31.2-2000 pg/mL人胰島素樣生長因子1(IGF-1)ELISA試劑盒96T 78-5000 pg/mL

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

英文名稱：Recombinant Aminopeptidase A (ENPEP)  產(chǎn)品名稱：谷氨氨肽酶(ENPEP)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Carboxypeptidase N2 (CPN2)  產(chǎn)品名稱：羧肽酶N2(CPN2)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Adenylate Cyclase 8, Brain (ADCY8)  產(chǎn)品名稱：腺苷酸環(huán)化酶8(ADCY8)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Hydroxymethylglutaryl Coenzyme A Synthase (HMGCS)  產(chǎn)品名稱：羥甲基戊二酰合酶(HMGCS)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名稱：Recombinant Deoxyribonuclease II (DNASEII)  產(chǎn)品名稱：脫氧核糖核酸酶Ⅱ(DNASEII)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Tyrosyl tRNA Synthetase (YARS)  產(chǎn)品名稱：酪氨酰tRNA合成酶(YARS)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

產(chǎn)品屬性：

 

 

英文名稱：Recombinant Endothelial NOS (eNOS)

NOS3; ECNOS; NOS III; E-NOS; C-NOS; ENOS; CNOS; Constitutive NOS; Nitric Oxide Synthase 3, Endothelial

型號：GOY-01D360

酶與激酶

心腦血管

物種：Oryctolagus cuniculus (Rabbit，兔)

來源：原核表達

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位：：n/a

預(yù)測分子量：-

實際分子量：-(差異分析請參閱說明書)

片段與標(biāo)簽：N-terminal His Tag

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 97%

等電點：-

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

蛋白表達及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細胞中，通過瞬時表達產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報告。可按客戶要求提供含純化標(biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達90%以上。

操作步驟：

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞，將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

 

 

 

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

抑癌蛋白DKK3抗體 DKK3

胞漿動力蛋白中間鏈2抗體 DYNC1I2

單克隆抗體 Digoxin(2E2)

腫瘤壞死因子配體超家族成員10C DcR1

干擾素誘導(dǎo)蛋白p58ipk抗體 DNAJC3

轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子DACH2抗體 DACH2

穿膜蛋白DLK1抗體 DLK1

Dysferlin蛋白抗體 Dysferlin

死亡相關(guān)蛋白5抗體 DAP5

解旋酶DEAD5抗體 DDX19B

防御素β2/Defensin β2抗體 Defensin Beta 2

細胞間粘附分子非整合素蛋白3抗體 DC-SIGN

內(nèi)皮型一氧化氮合酶(eNOS)重組蛋白兔大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum廣州蒼白桿菌 Escherichia coli

迪慶綿羊皮膚成纖維樣細胞根瘤菌 Rhizobium sp.

P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1] (小鼠骨髓瘤細胞)人胰腺細胞

EPC, 大鼠血管內(nèi)皮祖細胞小鼠小腸血管內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基

白地霉 Geotrichum candidum桿菌屬 Lactobacillus sp.

費氏中華根瘤菌 Sinorhizobium fredii弗氏鏈霉菌* Streptomyces fradiae

U14(小鼠子宮頸細胞)釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

小鼠關(guān)節(jié)軟骨細胞培養(yǎng)基苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti

MKN45(人胃細胞)香菇 Lentinula edodes

小鼠肺大靜脈內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基LLC-MK2(恒河猴腎細胞)

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae戊糖桿菌 Lactobacillus pentosus

擬囊體側(cè)耳 Pleurotus cystidiosus釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

根土壤桿菌 Agrobacterium tumefaciens真姬菇 Hypsizigus marmoreus