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泛素連接酶E3A(UBE3A)重組蛋白人

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更新時(shí)間:2023-03-06 10:23:16瀏覽次數(shù):250

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 Homo sapiens (Human,人)
貨號(hào) GOY-01D401 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 英文名稱 Recombinant Ubiquitin Protein Ligase E3A (UBE3A)
物種 Homo?sapiens?(Human,人)    
泛素連接酶E3A(UBE3A)重組蛋白人公司正在出售的產(chǎn)品:人脂多糖結(jié)合蛋白(LBP)ELISA試劑盒96T 0.78-50 ng/mL人中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(LCN2/NGAL)ELISA試劑盒96T 0.156-10 ng/mL人白細(xì)胞激酶受體(LTK)ELISA試劑盒96T 156-10000 U/mL

詳細(xì)介紹

以下是相關(guān)產(chǎn)品:

英文名稱:Recombinant Exonuclease 1 (EXO1)  產(chǎn)品名稱:核酸外切酶1(EXO1)重組蛋白物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)

英文名稱:Recombinant Fucose-1-Phosphate Guanylyltransferase (FPGT)  產(chǎn)品名稱:巖藻糖-1-磷酸鳥苷酰轉(zhuǎn)移酶(FPGT)重組蛋白物種:Homo sapiens (Human,人)

英文名稱:Recombinant Prostate-specific Membrane Antigen (PMSA)  產(chǎn)品名稱:前列腺特異性膜抗原(PMSA)重組蛋白物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)

英文名稱:Recombinant Dystrophia Myotonica Protein Kinase (DMPK)  產(chǎn)品名稱:肌強(qiáng)直性營養(yǎng)不良蛋白激酶(DMPK)重組蛋白物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)

英文名稱:Recombinant Purine Nucleoside Phosphorylase (PNP)  產(chǎn)品名稱:嘌呤核苷磷酸化酶(PNP)重組蛋白物種:Homo sapiens (Human,人)

英文名稱:Recombinant Purine Nucleoside Phosphorylase (PNP)  產(chǎn)品名稱:嘌呤核苷磷酸化酶(PNP)重組蛋白物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

物種

貨號(hào)

泛素連接酶E3A(UBE3A)重組蛋白人

Homo sapiens (Human,人)

GOY-01D401

 

 

英文名稱:Recombinant Ubiquitin Protein Ligase E3A (UBE3A)

ANCR; AS; E6-AP; EPVE6AP; HPVE6A; Papilloma Virus E6-Associated,Angelman Syndrome; Oncogenic protein-associated protein E6-AP; Renal carcinoma antigen NY-REN-54

型號(hào):GOY-01D401

酶與激酶

發(fā)育科學(xué)

物種:Homo sapiens (Human,人)

來源:原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位::細(xì)胞核

預(yù)測(cè)分子量:32.0kDa

實(shí)際分子量:40kDa(差異分析請(qǐng)參閱說明書)

片段與標(biāo)簽:Ser158~Leu407 with N-terminal His Tag

緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)

性狀:凍干粉

純度:> 90%

等電點(diǎn):6.1

應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg


蛋白表達(dá)及純化:

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。

3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告。可按客戶要求提供含純化標(biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達(dá)90%以上。

操作步驟:

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2.  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,注意低溫操作;

3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;

4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;

2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;

3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

 

細(xì)胞數(shù)量

Lysis Buffer加入量

107個(gè)

0.5 mL~1 mL

5×106個(gè)

0.2 mL~0.5 mL

 

 

5.置于4℃搖床平臺(tái)上,溫和振蕩15 min;

6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);

7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品:

肌萎Dystrobrevin β蛋白抗體 DTNB

蓬亂蛋白1抗體 DVL1

異常原/脫-γ-羧基原抗體 DCP

結(jié)蛋白抗體 Desmin

DISC1 C端抗體 DISC1 (CT)

DISC1 N端抗體 DISC1 (NT)

多能發(fā)育相關(guān)基因2抗體 DPPA2

結(jié)腸直腸癌缺失基因抗體 DCC

防御素β1/Defensin β1抗體 beta Defensin 1

抗體 Digoxin

多巴胺脫羧酶抗體 DOPA Decarboxylase

DLX4抗體 DLX4

泛素連接酶E3A(UBE3A)重組蛋白人小鼠胚胎成纖維細(xì)胞英文名稱:PA317

CIN-1培養(yǎng)基基礎(chǔ) 規(guī)格: 250g 用途: 用于小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌的選擇性分離和培養(yǎng)

人胚腎細(xì)胞英文名稱:293

改良月桂基鹽胰蛋白胨肉湯(MLST) 規(guī)格: 250g 用途: 用于奶粉中阪崎腸桿菌的檢驗(yàn)的增菌和分子生物學(xué)檢驗(yàn)方法(PCR)選擇性增菌(GB 4789.40-2010和SN1...

人膀胱移行細(xì)胞英文名稱:J82

亞利桑那菌(SA) 規(guī)格: 100g 用途: 用于亞利桑那菌選擇性分離培養(yǎng)。(SN 0170-92)

脂蛋白關(guān)聯(lián)磷脂酶A2(LpPLA2)重組蛋白英文名稱:Recombinant Phospholipase A2, Lipoprotein Associated (LpPLA2)

M-FC肉湯/濾膜糞大腸菌肉湯/M-FC Broth大腸桿菌群的濾膜法檢測(cè)250克國產(chǎn)/進(jìn)口

纖維介素蛋白(FGL2)重組蛋白英文名稱:Recombinant Fibrinogen Like Protein 2 (FGL2)

半固體/半固體動(dòng)力培養(yǎng)基/半固體營養(yǎng)/Semi-Solid Agar細(xì)菌動(dòng)力觀察,菌種保存,H抗原位相變異試驗(yàn)等250克國產(chǎn)/進(jìn)口

神經(jīng)肽S(NPS)重組蛋白英文名稱:Recombinant Neuropeptide S (NPS)

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