丙酮酸脫氫酶β(PDHb)重組蛋白小鼠

產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant Pyruvate Dehydrogenase Beta (PDHb)

PDH-B; PHE1B; PHE1-B; Pyruvate Dehydrogenase(lipoamide)Beta

型號(hào)：GOY-01D549

酶與激酶

物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

來(lái)源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位：：Mitochondrion matrix.

預(yù)測(cè)分子量：30.5kDa

實(shí)際分子量：29kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書)

片段與標(biāo)簽：Gly65~Lys336 ((Accession # Q9D051) with

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 95%

等電點(diǎn)：6.7

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過(guò)親和，離子交換，疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告。可按客戶要求提供含純化標(biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。
以下是相關(guān)產(chǎn)品：

英文名稱：Active Phospholipase A2 Group VII (LpPLA2)  產(chǎn)品名稱：脂蛋白關(guān)聯(lián)磷脂酶A2(LpPLA2)活性蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Active Thymidine Kinase 1, Soluble (TK1)  產(chǎn)品名稱：可溶性胸苷激酶1(TK1)活性蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Active Cluster Of Differentiation 26 (CD26)  產(chǎn)品名稱：CD26分子(CD26)活性蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Active Matrix Metalloproteinase 9 (MMP9)  產(chǎn)品名稱：基質(zhì)金屬9(MMP9)活性蛋白物種：Sus scrofa; Porcine (Pig，豬)

英文名稱：Active Peptidylglycine Alpha Amidating Monooxygenase (PAM)  產(chǎn)品名稱：肽酰α酰胺化單加氧酶(PAM)活性蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名稱：Active Nitric Oxide Synthase 2, Inducible (NOS2)  產(chǎn)品名稱：誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(NOS2)活性蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

G蛋白偶聯(lián)受體172B抗體 GPR172B

高爾基體膜蛋白GP73抗體 GOLPH2

生發(fā)中心B淋巴細(xì)胞相關(guān)蛋白2抗體 GCET2

G蛋白轉(zhuǎn)錄因子α3抗體 GNAT3

G蛋白偶聯(lián)受體124抗體（腫瘤血管內(nèi)皮標(biāo)記物） GPR124

半乳糖凝集素1抗體 Galectin 1

α葡萄糖苷酶2抗體 GANAB

半乳糖凝集素7抗體 Galectin 7

B淋巴細(xì)胞生發(fā)中心相關(guān)蛋白抗體 GCET1

鱗狀細(xì)胞癌增強(qiáng)蛋白1抗體 GASC1

特異性囊腫病液體蛋白15抗體 GCDFP15

Gα gust抗體 G alpha gust

丙酮酸脫氫酶β(PDHb)重組蛋白小鼠ECV-304(人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

苯培養(yǎng)基 規(guī)格： 100g 用途： 用于鑒別細(xì)菌利用銨鹽作氮源并分解葡萄糖的試驗(yàn)。

結(jié)晶紫中性紅膽鹽/VRBA用于大腸菌群的檢驗(yàn)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

DU 145(人前列腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

Fraser肉湯增菌液（FB1，F(xiàn)B2）基礎(chǔ) 規(guī)格： 250g 用途： 用于李斯特氏的選擇性增菌培養(yǎng)（SN/T0184.1-2005，ISO標(biāo)準(zhǔn)）。

腺英文名稱：MDA-MB-157

趨化因子C-X-C-基元受體3(CXCR3)重組蛋白英文名稱：Recombinant Chemokine C-X-C-Motif Receptor 3 (CXCR3)

大鼠淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

人急性淋巴母細(xì)胞白血病細(xì)胞英文名稱：MOLT-4

胱天7(CASP7)重組蛋白英文名稱：Recombinant Caspase 7 (CASP7)

TMP培養(yǎng)基/TMP Agar的分離培養(yǎng)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口