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基質金屬蛋白酶14(MMP14)重組蛋白小鼠

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更新時間:2023-03-08 12:19:00瀏覽次數(shù):174

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產品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
貨號 GOY-01D593 應用領域 化工
主要用途 僅供科研實驗 英文名稱 Recombinant Matrix Metalloproteinase 14 (MMP14)
物種 Mus musculus (Mouse,小鼠)    
基質金屬蛋白酶14(MMP14)重組蛋白小鼠公司正在出售的產品:人環(huán)指蛋白39(RNF39)ELISA試劑盒96T 0.78-50 ng/mL人胰島再生源蛋白3 - alpha(REG-3-alpha)ELISA試劑盒96T 0.78-50 ng/mL人核糖體結合蛋白1(RRBP1)ELISA試劑盒96T 78-5000 pg/mL

詳細介紹

蛋白表達及純化:

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞,然后將重組質粒轉染到細胞中,通過瞬時表達產生目標蛋白。

2.收集含有目標蛋白的部分(細胞或培養(yǎng)上清)。

3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產品質量。

5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。

交付內容:純化好的目標蛋白及純化報告。可按客戶要求提供含純化標簽(Tag)或切除純化標簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達90%以上。

產品屬性:

產品名稱

物種

貨號

基質金屬蛋白酶14(MMP14)重組蛋白小鼠

Mus musculus (Mouse,小鼠)

GOY-01D593

 

 

英文名稱:Recombinant Matrix Metalloproteinase 14 (MMP14)

MMP-X1; MT1-MMP; MTMMP1; Membrane Inserted; Membrane-type matrix metalloproteinase 1; Membrane-type-1 matrix metalloproteinase

型號:GOY-01D593

酶與激酶

代謝通路

腫瘤免疫

感染免疫

心腦血管

物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)

來源:原核表達

宿主E.coli

內毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位::細胞膜, 細胞質, 細胞外基質

預測分子量:46.0kDa

實際分子量:44kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標簽:His121~Asn487 with N-terminal His Tag

緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)

性狀:凍干粉

純度:> 90%

等電點:6.4

應用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg


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產品名稱:胃原A(PGA)重組蛋白  物種:Homo sapiens (Human,人)  英文名稱:Recombinant Pepsinogen A (PGA)

操作步驟:

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2.  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作;

3. 取組織勻漿液轉移到1.5mL預冷的離心管,離心10000轉/分,4℃離心5 min;

4. 取上清轉移至新的預冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

5. 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取

1. 貼壁培養(yǎng)的細胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;

2. 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞,將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉/分離心5 min洗兩次;

3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4. 細胞洗滌后,轉至新的預冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

 

細胞數(shù)量

Lysis Buffer加入量

107個

0.5 mL~1 mL

5×106個

0.2 mL~0.5 mL

 

 

5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min;

6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);

7. 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

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