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中性鞘磷脂酶(NSMASE)重組蛋白人

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更新時(shí)間:2023-03-08 15:04:09瀏覽次數(shù):196

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
貨號(hào) GOY-01D690 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 英文名稱 Recombinant Neutral Sphingomyelinase (NSMASE)
物種 Homo sapiens (Human,人)    
中性鞘磷脂酶(NSMASE)重組蛋白人公司正在出售的產(chǎn)品:人端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶(TERT)ELISA試劑盒96T 0.156-10 ng/mL人胸苷激酶1(TK1)ELISA試劑盒96T 0.06-4 pmol/L人腫瘤壞死因子配體超家族成員14(TNFSF14)ELISA試劑盒96T 78-5000 pg/mL

詳細(xì)介紹

以下是相關(guān)產(chǎn)品:

產(chǎn)品名稱:乳酸脫氫酶B(LDHB)重組蛋白  物種:Homo sapiens (Human,人)  英文名稱:Recombinant Lactate Dehydrogenase B (LDHB)

產(chǎn)品名稱:乳酸脫氫酶B(LDHB)重組蛋白  物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)  英文名稱:Recombinant Lactate Dehydrogenase B (LDHB)

產(chǎn)品名稱:乳酸脫氫酶B(LDHB)重組蛋白  物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)  英文名稱:Recombinant Lactate Dehydrogenase B (LDHB)

產(chǎn)品名稱:法尼基二磷酸法尼基轉(zhuǎn)移酶1(FDFT1)重組蛋白  物種:Homo sapiens (Human,人)  英文名稱:Recombinant Farnesyl Diphosphate Farnesyltransferase 1 (FDFT1)

產(chǎn)品名稱:蛋白激酶Bβ(PKBb)重組蛋白  物種:Homo sapiens (Human,人)  英文名稱:Recombinant Protein Kinase B Beta (PKBb)

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

物種

貨號(hào)

中性鞘磷脂酶(NSMASE)重組蛋白人

Homo sapiens (Human,人)

GOY-01D690

 

 

英文名稱:Recombinant Neutral Sphingomyelinase (NSMASE)

SMPD2; N-SMase; ISC1; Neutral Sphingomyelin Phosphodiesterase; Sphingomyelin Phosphodiesterase 2,Neutral Membrane; Lyso-platelet-activating factor-phospholipase C

型號(hào):GOY-01D690

酶與激酶

物種:Homo sapiens (Human,人)

來(lái)源:原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位::細(xì)胞膜

預(yù)測(cè)分子量:57.2kDa

實(shí)際分子量:57kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書)

片段與標(biāo)簽:Lys2~Arg236 with N-terminal His and GST Tag

緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)

性狀:凍干粉

純度:> 97%

等電點(diǎn):6.8

應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg


蛋白表達(dá)及純化:

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。

3.通過(guò)親和,離子交換,疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達(dá)90%以上。

操作步驟:

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2.  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,注意低溫操作;

3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;

4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;

2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;

3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

 

細(xì)胞數(shù)量

Lysis Buffer加入量

107個(gè)

0.5 mL~1 mL

5×106個(gè)

0.2 mL~0.5 mL

 

 

5.置于4℃搖床平臺(tái)上,溫和振蕩15 min;

6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);

7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品:

磷酸化胰島素受體底物-1抗體 phospho-IRS1(Ser789)

異戊烯焦磷酸1抗體 IDI1

磷酸化胰島素受體底物-1抗體 phospho-IRS1(Ser636 + Ser639)

胰島素誘導(dǎo)基因1抗體 Insig1

FC段γ受體3/免G Fc段受體III抗體 CD16

磷酸化白介素-1受體相關(guān)激酶4抗體 phospho-IRAK4 (Thr345)

IQCF1蛋白抗體 IQCF1

IQCJ蛋白抗體 IQCJ

免超家族成員3抗體 IGSF3

免超家族成員6抗體 IGSF6

抑制素結(jié)合蛋白抗體 IGSF1

免超家族成員9抗體 IGSF9

中性鞘磷脂酶(NSMASE)重組蛋白人β(FGβ)重組蛋白英文名稱:Recombinant Fibrinogen Beta (FGb)

半固體發(fā)酵管BR20支國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

神經(jīng)束蛋白(NFASC)重組蛋白英文名稱:Recombinant Neurofascin (NFASC)

弧菌顯色培養(yǎng)基/Vibrio Chromogenic Medium用于弧菌的顯色培養(yǎng),副溶血性弧菌顯藍(lán)色,其他弧菌顯無(wú)色1升國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

WTRL1(大鼠肺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

大鼠腎動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

結(jié)晶紫中性紅膽鹽葡萄糖(VRBGA) 規(guī)格: 250g 用途: 用于阪崎腸桿菌的選擇性分離培養(yǎng)以及腸道菌的計(jì)數(shù)和鑒別(SN/T 1632.1-2005)。

人子宮內(nèi)膜細(xì)胞英文名稱:Ishikawa

XLD培養(yǎng)基 規(guī)格: 250g 用途: 用于臨床標(biāo)本及食品中志賀氏、沙門氏菌選擇性分離。(GB4789.4-2008,F(xiàn)DA BAM chapter5,ISO 657...

TT(人甲狀腺導(dǎo)管細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

干擾素誘導(dǎo)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)關(guān)聯(lián)病毒抑制蛋白(Viperin)重組蛋白英文名稱:Recombinant Virus Inhibitory Protein (Viperin)

 

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