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ⅡA組磷脂酶A2(PLA2G2A)重組蛋白人

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更新時(shí)間:2023-03-08 15:45:37瀏覽次數(shù):196

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
貨號(hào) GOY-01D747 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 英文名稱 Recombinant Phospholipase A2, Group IIA (PLA2G2A)
物種 Homo sapiens (Human,人)    
ⅡA組磷脂酶A2(PLA2G2A)重組蛋白人公司正在出售的產(chǎn)品:磷酸化三磷酸腺檸檬酸裂解酶抗體 英文名稱:phospho-ATP citrate lyase (Ser455) 0.1ml磷酸化ATR抗體 英文名稱:phospho-ATR (Ser428) 0.1ml天連接糖基化11抗體 英文名稱:ALG11 0.2ml

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

物種

貨號(hào)

ⅡA組磷脂酶A2(PLA2G2A)重組蛋白人

Homo sapiens (Human,人)

GOY-01D747

 

 

英文名稱:Recombinant Phospholipase A2, Group IIA (PLA2G2A)

PLA2; MOM1; PLA2B; PLA2L; PLA2S; PLAS1; sPLA2(platelets,synovial fluid); Non-pancreatic secretory phospholipase A2; Phosphatidylcholine 2-acylhydrolase 2A

型號(hào):GOY-01D747

酶與激酶

物種:Homo sapiens (Human,人)

來(lái)源:原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位::細(xì)胞膜

預(yù)測(cè)分子量:17.6kDa

實(shí)際分子量:18kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書(shū))

片段與標(biāo)簽:Asn21~Cys144 with N-terminal His Tag

緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)

性狀:凍干粉

純度:> 90%

等電點(diǎn):9.5

應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg


蛋白表達(dá)及純化:

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。

3.通過(guò)親和,離子交換,疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達(dá)90%以上。
以下是相關(guān)產(chǎn)品:

產(chǎn)品名稱:3-羥基3-甲基戊二酰還原酶(HMGCR)重組蛋白  物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)  英文名稱:Recombinant 3-Hydroxy-3-Methylglutaryl Coenzyme A Reductase (HMGCR)

產(chǎn)品名稱:谷光甘肽合成酶(GSS)重組蛋白  物種:Homo sapiens (Human,人)  英文名稱:Recombinant Glutathione Synthetase (GSS)

產(chǎn)品名稱:谷光甘肽合成酶(GSS)重組蛋白  物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)  英文名稱:Recombinant Glutathione Synthetase (GSS)

產(chǎn)品名稱:半連接酶催化亞基(GCLC)重組蛋白  物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)  英文名稱:Recombinant Glutamate Cysteine Ligase, Catalytic (GCLC)

產(chǎn)品名稱:天冬酰胺合成酶(ASNS)重組蛋白  物種:Homo sapiens (Human,人)  英文名稱:Recombinant Asparagine Synthetase (ASNS)

操作步驟:

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2.  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,注意低溫操作;

3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;

4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;

2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;

3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

 

細(xì)胞數(shù)量

Lysis Buffer加入量

107個(gè)

0.5 mL~1 mL

5×106個(gè)

0.2 mL~0.5 mL

 

 

5.置于4℃搖床平臺(tái)上,溫和振蕩15 min;

6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);

7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品:

低密度脂蛋白抗體 LDL

白介素6抗體 IL-6

LRRC19蛋白抗體 LRRC19

層粘連蛋白受體1單克隆抗體 LAMR1(M1S3)

層粘連蛋白受體1單克隆抗體 LAMR1(5D4)

T細(xì)胞活化連接蛋白抗體 LAT

LIX1抗體 LIX1

凝集素樣氧化型低密度脂蛋白受體抗體 LOX 1

MD-2蛋白抗體 MD-2

淋巴管內(nèi)皮透明質(zhì)酸受體抗體 LYVE-1

MD-1蛋白抗體 MD1

肝臟型脂肪酸結(jié)合蛋白抗體 liver FABP

ⅡA組磷脂酶A2(PLA2G2A)重組蛋白人酸性肉湯/Acid Broth酸性罐食品無(wú)菌試驗(yàn)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

催素(PRL)重組蛋白英文名稱:Recombinant Prolactin (PRL)

乙酰胺酚紅/Acetamide Agar250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

α2-纖溶酶抑制因子(α2PI)重組蛋白英文名稱:Recombinant Alpha-2-Plasmin Inhibitor (a2PI)

小鼠白血病細(xì)胞英文名稱:L1210

G(IgG)天然蛋白 英文名稱:Native Immunoglobulin G (IgG)

THP-1(人髓系白血病單核細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

人神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

KG-1(人急性骨髓性白血病細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

人前列腺成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

BEL-7402(人肝細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

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