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鈣蛋白酶6(CAPN6)重組蛋白人

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更新時(shí)間:2023-03-08 16:26:38瀏覽次數(shù):103

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
貨號(hào) GOY-01D789 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 英文名稱 Recombinant Calpain 6 (CAPN6)
物種 Homo sapiens (Human,人)    
鈣蛋白酶6(CAPN6)重組蛋白人公司正在出售的產(chǎn)品:脂聯(lián)素受體1抗體 英文名稱:Adiponectin Receptor 1 0.2ml腎上腺髓質(zhì)素受體抗體 英文名稱:ADM R 0.1ml腎上腺髓質(zhì)素抗體 英文名稱:ADM 0.1ml

詳細(xì)介紹

以下是相關(guān)產(chǎn)品:

產(chǎn)品名稱:-N-甲基轉(zhuǎn)移酶(GNMT)重組蛋白  物種:Homo sapiens (Human,人)  英文名稱:Recombinant Glycine-N-Methyltransferase (GNMT)

產(chǎn)品名稱:肌醇加氧酶(MIOX)重組蛋白  物種:Homo sapiens (Human,人)  英文名稱:Recombinant Myo Inositol Oxygenase (MIOX)

產(chǎn)品名稱:海藻糖酶(TREH)重組蛋白  物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)  英文名稱:Recombinant Trehalase (TREH)

產(chǎn)品名稱:DNA糖基化酶(UNG)重組蛋白  物種:Homo sapiens (Human,人)  英文名稱:Recombinant Uracil DNA Glycosylase (UNG)

產(chǎn)品名稱:尿苷二磷酸糖基轉(zhuǎn)移酶8(UGT8)重組蛋白  物種:Homo sapiens (Human,人)  英文名稱:Recombinant UDP Glycosyltransferase 8 (UGT8)

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

物種

貨號(hào)

鈣蛋白酶6(CAPN6)重組蛋白人

Homo sapiens (Human,人)

GOY-01D789

 

 

產(chǎn)品名稱:鈣蛋白酶6(CAPN6)重組蛋白人

英文名稱:Recombinant Calpain 6 (CAPN6)

CAPNX; CalpM; CANPX; Calpamodulin; Calpain-like protease X-linked

型號(hào):GOY-01D789

酶與激酶

物種:Homo sapiens (Human,人)

來(lái)源:原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位::細(xì)胞核, 細(xì)胞質(zhì)

預(yù)測(cè)分子量:58.7kDa

實(shí)際分子量:59kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書(shū))

片段與標(biāo)簽:Leu26~Arg495 with N-terminal His Tag

緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)

性狀:凍干粉

純度:> 97%

等電點(diǎn):5.9

應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg


蛋白表達(dá)及純化:

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。

3.通過(guò)親和,離子交換,疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達(dá)90%以上。

操作步驟:

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2.  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,注意低溫操作;

3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;

4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;

2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;

3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

 

細(xì)胞數(shù)量

Lysis Buffer加入量

107個(gè)

0.5 mL~1 mL

5×106個(gè)

0.2 mL~0.5 mL

 

 

5.置于4℃搖床平臺(tái)上,溫和振蕩15 min;

6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);

7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品:

緊密連接蛋白MUPP1抗體 MUPP1

線粒體核糖體蛋白S4抗體 MRPS4

肌管素相關(guān)蛋白14抗體 MTMR14

小腦癥基因1/認(rèn)知相關(guān)蛋白抗體 Microcephalin 1/BRIT1

鋅指蛋白60抗體 Miz1/ZNF60

肌球蛋白6抗體 MYO6

肌肉素抗體 Musclin

代謝型受體-3抗體 MGLUR3

促代謝型受體1+5抗體 MGLUR1 + MGLUR5

MHC I類鏈相關(guān)蛋白A/組織相容性復(fù)合物MHCIa抗體 MICA

促代謝型受體2+3抗體 MGLUR2 + MGLUR3

肌肉特異性環(huán)指蛋白2抗體 MURF2

鈣蛋白酶6(CAPN6)重組蛋白人兔抗馬IgG(免疫血清)5ml支

PVDF膜(0.45um 13.25cm×15cm13.25×15cm張

AEC顯色試劑盒(20×)1ml盒

AB-PAS染色液試劑盒(阿利新藍(lán)-過(guò)碘酸-雪夫染色試劑盒)50ml×6盒

HPD300大孔吸附樹(shù)脂500g瓶

冰凍切片抗原修復(fù)液(1×)500ml瓶

Rifampicin 13292-46-1100mg

Hydrindantin dihydrate 二水還原茚三酮5g瓶

Triton X-100 曲拉通X-100100ml瓶

Genipin-1-b-D-gentiobioside 京尼平龍膽雙糖苷29307-60-620mg

Choline bitartrate 酒石酸氫25g瓶

兔抗人IgA-RBITC0.5ml支

35mm培養(yǎng)皿20套包

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