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彈性蛋白酶3B(ELA3B)重組蛋白大鼠

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更新時(shí)間:2023-03-08 16:27:31瀏覽次數(shù):121

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
貨號(hào) GOY-01D766 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 英文名稱 Recombinant Elastase 3B (ELA3B)
物種 Rattus norvegicus (Rat,大鼠)    
彈性蛋白酶3B(ELA3B)重組蛋白大鼠公司正在出售的產(chǎn)品:肺α/β水解酶蛋白3抗體 英文名稱:ABHD3 0.2ml三結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白F亞基3抗體 英文名稱:ABCF3 0.2mlADCK1蛋白抗體 英文名稱:ADCK1 0.2ml

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

物種

貨號(hào)

彈性蛋白酶3B(ELA3B)重組蛋白大鼠

Rattus norvegicus (Rat,大鼠)

GOY-01D766

 

 

產(chǎn)品名稱:彈性蛋白酶3B(ELA3B)重組蛋白大鼠

英文名稱:Recombinant Elastase 3B (ELA3B)

CELA3B; Chymotrypsin Like Elastase Family Member 3B; Protease E; Fecal Elastase; Elastase 1; Cholesterol-Binding Pancreatic Protease; Pancreatic Endopeptidase E

型號(hào):GOY-01D766

酶與激酶

物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)

來(lái)源:原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位::n/a

預(yù)測(cè)分子量:27.3kDa

實(shí)際分子量:27kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書)

片段與標(biāo)簽:Val28~Asn269 with N-terminal His Tag

緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)

性狀:凍干粉

純度:> 90%

等電點(diǎn):5.6

應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg


蛋白表達(dá)及純化:

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。

3.通過(guò)親和,離子交換,疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達(dá)90%以上。
以下是相關(guān)產(chǎn)品:

產(chǎn)品名稱:二肽酶3(DPEP3)重組蛋白  物種:Homo sapiens (Human,人)  英文名稱:Recombinant Dipeptidase 3 (DPEP3)

產(chǎn)品名稱:肌肽酶1(CNDP1)重組蛋白  物種:Homo sapiens (Human,人)  英文名稱:Recombinant Carnosine Dipeptidase 1 (CNDP1)

產(chǎn)品名稱:雙腎上腺皮質(zhì)激素樣激酶1(DCLK1)重組蛋白  物種:Homo sapiens (Human,人)  英文名稱:Recombinant Doublecortin Like Kinase 1 (DCLK1)

產(chǎn)品名稱:雙腎上腺皮質(zhì)激素樣激酶1(DCLK1)重組蛋白  物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)  英文名稱:Recombinant Doublecortin Like Kinase 1 (DCLK1)

產(chǎn)品名稱:脂肪酸去飽和酶2(FADS2)重組蛋白  物種:Homo sapiens (Human,人)  英文名稱:Recombinant Fatty Acid Desaturase 2 (FADS2)

操作步驟:

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2.  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,注意低溫操作;

3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;

4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;

2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;

3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

 

細(xì)胞數(shù)量

Lysis Buffer加入量

107個(gè)

0.5 mL~1 mL

5×106個(gè)

0.2 mL~0.5 mL

 

 

5.置于4℃搖床平臺(tái)上,溫和振蕩15 min;

6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);

7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品:

LIM結(jié)構(gòu)域結(jié)合蛋白3抗體 LDB3

LAMTOR1蛋白抗體 LAMTOR1

ILK結(jié)合蛋白LIMS2抗體 LIMS2

淋巴細(xì)胞特異性接頭蛋白抗體 LNK

細(xì)胞表面免樣轉(zhuǎn)錄因子4抗體 LILRB2

淋巴細(xì)胞抗原6重復(fù)位點(diǎn)蛋白G6F抗體 LY6G6F

樁蛋白抗體 Leupaxin

脂蛋白受體相關(guān)蛋白/低密度脂蛋白相關(guān)蛋白的相關(guān)蛋白1抗體 LRPAP1

層粘蛋白α3抗體 LAMA3

溶酶體相關(guān)膜蛋白1抗體 LAMP1

皮屑樣蛋白2抗體 LEPREL2

羧肽酶抑制劑抗體 Lxn/Latexin

彈性蛋白酶3B(ELA3B)重組蛋白大鼠IgG干粉1g支

TTC 2,3,5化三苯基四氮唑1g瓶

圓蓋玻片 直徑24mm100片盒

NHS-Biotin -N-羥基丁二酰亞胺活化脂25mg瓶

p-Hydroxybenzaldehyde 對(duì)羥基123-08-0100mg

Trehalose 無(wú)水海藻糖99-20-720mg

LB Broth LB肉湯250g瓶

S-(-)-Carbidopa 38821-49-720mg

Panaxadiol 人參二醇19666-76-320mg

Sodium Danshensu 丹參素鈉20977-05-320mg

DiI 熒光染料10mg瓶

Isocorynoxeine 異去氫鉤藤堿51014-29-020mg

Nalidixic acid 萘啶酮酸10g瓶

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