磷酸二酯酶10A(PDE10A)重組蛋白人

蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。

產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant Phosphodiesterase 10A (PDE10A)

cAMP and cAMP-inhibited cGMP 3',5'-cyclic phosphodiesterase 10A

型號(hào)：GOY-01D821

酶與激酶

物種：Homo sapiens (Human，人)

來源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位：：細(xì)胞質(zhì)

預(yù)測(cè)分子量：34.7kDa

實(shí)際分子量：33kDa(差異分析請(qǐng)參閱說明書)

片段與標(biāo)簽：Asn508~Asp779 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性狀：凍干粉

純度：> 95%

等電點(diǎn)：6.0

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

產(chǎn)品名稱：5'-核苷酸酶Ⅲ(NT5C3)重組蛋白  物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)  英文名稱：Recombinant 5'-Nucleotidase, Cytosolic III (NT5C3)

產(chǎn)品名稱：Ⅴ(F5)重組蛋白  物種：Sus scrofa; Porcine (Pig，豬)  英文名稱：Recombinant Coagulation Factor V (F5)

產(chǎn)品名稱：卵巢腫瘤蛋白1(OTUB1)重組蛋白  物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)  英文名稱：Recombinant Otubain 1 (OTUB1)

產(chǎn)品名稱：肽酶抑制因子16(PI16)重組蛋白  物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)  英文名稱：Recombinant Peptidase Inhibitor 16 (PI16)

產(chǎn)品名稱：水解酶(BLMH)重組蛋白  物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)  英文名稱：Recombinant Bleomycin Hydrolase (BLMH)

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

毒蕈堿型乙酰受體M3抗體 Muscarinic Acetylcholine receptor M3

環(huán)指蛋白61抗體 RNF61

錯(cuò)配修復(fù)蛋白1抗體 MLH1

血管緊張素Ⅱ2型受體相互作用蛋白抗體 Angiotensin II Type 2 Receptor

巨噬細(xì)胞清道夫受體抗體 MARCO

生肌調(diào)節(jié)因子6抗體 Myf6

甲基化CpG結(jié)合蛋白抗體 MBD1

單克隆抗體 Morphine (C1F3)

GTP結(jié)合蛋白MAS1抗體 MAS1

髓鞘相關(guān)糖蛋白-a抗體 MAG

單克隆抗體 Morphine(2F11)

黑色素瘤相關(guān)抗原抗體 MAGE-1

磷酸二酯酶10A(PDE10A)重組蛋白人Heparin Sepharose 6FF 肝素-糖凝膠 6FF25mL瓶

Swertiamarin 獐牙菜苦苷17388-39-520mg

Chitin 幾丁質(zhì)-殼多糖10g瓶

Isorhynchophylline 異鉤藤堿181124320mg

煌焦油藍(lán)染色液100ml瓶

Fibrinogen 原（來源于牛血漿）1g瓶

Mulberroside A 桑皮苷A102841-42-920mg

Leupeptin 亮抑酶肽5mg瓶

PyBOP 六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷基磷5g瓶

Lyticase 溶壁酶1g瓶

Astragalus Polysacharin 黃芪89250-26-020mg

Carbenicillin Disodium Salt 羧芐青 (進(jìn)口)100mg支

Tetrahydropalmatine 延胡索酸乙素6024-85-720mg