詳細介紹
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 物種 | 貨號 |
雙特異性磷酸酶5(DUSP5)重組蛋白人 | Homo sapiens (Human,人) | GOY-01D838 |
英文名稱:Recombinant Dual Specificity Phosphatase 5 (DUSP5)
DUSP; HVH3; Dual specificity protein phosphatase hVH3
型號:GOY-01D838
酶與激酶
物種:Homo sapiens (Human,人)
來源:原核表達
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)
亞細胞定位::細胞核
預測分子量:18.4kDa
實際分子量:18kDa(差異分析請參閱說明書)
片段與標簽:Met1~Glu135 with N-terminal His Tag
緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
性狀:凍干粉
純度:> 95%
等電點:10.2
應用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg
蛋白表達及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細胞中,通過瞬時表達產(chǎn)生目標蛋白。
2.收集含有目標蛋白的部分(細胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。
5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。
交付內(nèi)容:純化好的目標蛋白及純化報告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶撕灒?/span>Tag)或切除純化標簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達90%以上。
以下是相關產(chǎn)品:
產(chǎn)品名稱:白介素1受體關聯(lián)激酶2(IRAK2)重組蛋白 物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠) 英文名稱:Recombinant Interleukin 1 Receptor Associated Kinase 2 (IRAK2)
產(chǎn)品名稱:磺基轉(zhuǎn)移酶(SULT1A1)重組蛋白 物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠) 英文名稱:Recombinant Sulfotransferase 1A1 (SULT1A1)
產(chǎn)品名稱:延胡索二酰乙酰乙酸水解酶(FAH)重組蛋白 物種:Homo sapiens (Human,人) 英文名稱:Recombinant Fumarylacetoacetate Hydrolase (FAH)
產(chǎn)品名稱:過氧化還原酶3(PRDX3)重組蛋白 物種:Homo sapiens (Human,人) 英文名稱:Recombinant Peroxiredoxin 3 (PRDX3)
產(chǎn)品名稱:碳酸酐酶Ⅱ(CA2)重組蛋白 物種:Rhesus monkey (Simian,恒河猴) 英文名稱:Recombinant Carbonic Anhydrase II (CA2)
操作步驟:
Ⅰ 實體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;
2. 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞,將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4. 細胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個 | 0.5 mL~1 mL |
5×106個 | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。
公司正在出售的產(chǎn)品:
多藥耐藥蛋白/P-糖蛋白抗體(C端) MDR1
雞馬立克氏病火雞皰疹病毒抗體 Marek's Disease Vaccine, Live
抗體 Metronidazole
黑色素瘤相關抗原4抗體 MAGE-A4
鈣結合蛋白39抗體 CAB39
線粒體抗病毒信號MAVS蛋白抗體 MAVS
巨噬細胞集落刺激因子受體抗體 MCSF Receptor
腫瘤轉(zhuǎn)移相關蛋白1抗體 MTA1
三聚氰胺抗體 Melamine
磷酸化雷帕靶蛋白抗體 Phospho-mTOR (Ser2481)
粘蛋白4抗體 MUC4
黑皮質(zhì)素-1受體抗體 MC1 Receptor
雙特異性磷酸酶5(DUSP5)重組蛋白人Dextran Blue 2000 藍色葡聚糖 20001g瓶
Saikosaponin A 柴胡皂苷A20736-09-820mg
Albumin Bovine V 牛血清白蛋白V9048-46-8100mg
GoldView Ⅱ型核酸染色劑(5000×)0.5ml瓶
激光共聚焦細胞培養(yǎng)皿35mm-10(10個/包)35mm包
兔抗FITC-HRP1ml支
芬蘭彩色移液器0.5-10ul支
過碘酸-雪夫(AB-PAS)染色試劑盒6×100ml盒
Calceolarioside B 木通乙醇苷B105471-98-510mg
Acyl-CoA Synthetase 酯酰合成酶100U瓶
D-Mannose D-甘露糖3458-28-4100mg
PMA 佛波酯5mg瓶
豚鼠脾臟淋巴細胞分離液試劑盒200ml/KIT盒